曾杰
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子BA-ELISA方法的建立与评价
- 2015年
- 目的：建立一种定量检测囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）的生物素-亲和素ELISA（BA-ELISA）方法并评价其可靠性。方法：优选设计CFTR三个表位的大肠杆菌表达抗原,免疫新西兰白兔获得CFTR多克隆抗体,用纯化后的抗体包被酶标板,并用生物素对其标记,从人精子提取CFTR作为抗原,用辣根过氧化物酶偶联的亲和素检测,优化两种抗体浓度及实验参数,建立可定量检测CFTR蛋白的双抗体夹心BA-ELISA方法;用临床精子标本评估所建立方法的重复性、特异性等。结果：CFTR包被抗体和生物素化CFTR抗体最适浓度分别为4μg/ml和10μg/ml,最佳封闭液为1%BSA-PBST,抗原与包被抗体最佳反应时间60 min,底物显色最佳时间15 min。批内、批间变异系数分别为2.16%~9.23%和2.29%~11.71%,包被的CFTR抗体与精子胞浆蛋白无交叉反应,最低检出下限为0.15 ng/ml,标准反应曲线具有良好的线性关系R2=0.962。结论：成功创建了定量检测CFTR蛋白的ELISA方法,具有特异性强、灵敏度高等特点。
- 邱枫曾杰李坤陈爱君徐万祥倪崖
- 分泌型磷脂酶A2-ⅡD在人类精子获能过程中的作用
- 精子顶体反应是精子穿过卵子透明带并和卵子融合的前提.以往研究发现磷脂酶A2 (PLA2)与精子顶体反应有关.顶体反应发生时PLA2被激活，引起磷脂酰胆碱水解，产生花生四烯酸和溶血磷脂，促使精子顶体反应发生.PLA2在哺乳...
- 李坤金建远陈文颖谢海锋邱枫曾杰孙培蓓石其贤倪崖
- 关键词：顶体反应精子获能
