刘宏利 作品数:15 被引量:23 H指数:3 供职机构: 第三军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
靶向肝脏的caspase-1抑制剂及其应用 本发明公开了一种靶向肝脏的caspase-1抑制剂,由人乙型肝炎病毒Pre-S1肽通过柔性接头与caspase-1抑制剂连接而成,Pre-S1肽由Pre-S1蛋白的第1-50位氨基酸组成,caspase-1抑制剂由YVA... 王靖雪 吴玉章 刘钱 刘宏利PreS1多肽(2-21Aa)介导肝脏靶向脂质体的制备及其靶向性研究 被引量:3 2014年 目的以来源于乙肝病毒(hepatitisBvirus,HBV)PreSl抗原2-21Aa多肽(HBVpreS/2—21nyr)为导向的肝细胞靶向长效循环脂质体(10ngcirculatingliposome,LCL),通过体外细胞学实验验证其靶向性。方法固相合成HBVpreS/2—21m多肽,化学偶联Mal—PEG2000-DSPE(马来酰亚胺一聚乙二醇2000一硬脂酰基磷脂酰乙醇胺)生成HBVpreS/2五1q—PEG2000-DSPE;采用乙醇注入法制备脂质体,包裹荧光素钠(fluoresceinsodium,FS)形成HBVpreS/2—21nyt-FS—LCL;激光粒度仪、透射电镜、高效液相色谱检测和观察脂质体的粒径、超微形态及包封率;以稳定表达NTCP的HepG2为细胞模型,分析纳米脂质体靶向性。结果合成的靶向脂质体,呈类圆形,大小均匀,粒径为(94.09±9.2)nm,达到纳米级别;有效包裹荧光素钠,包封率为(89.32±1.02)%;与无靶向修饰脂质体相比,可递送更多的荧光素钠进入细胞内。结论HBVpreS/2—21myt修饰的靶向脂质体,有较高的包封率,为纳米脂质体,能特异性地通过NTCP靶向肝细胞,有望成为一种新型的肝细胞靶向给药系统。 韩超 刘宏利 李军 蓝竹 吴玉章 韩俊峰关键词:纳米脂质体 乙型肝炎病毒感染动物模型研究进展 被引量:1 2014年 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染严重影响人类健康。稳定、可靠的HBV感染动物模型对于HBV感染致病机制的研究和干预措施的研发有重要意义。HBV有很强的宿主选择性,长期以来黑猩猩是唯一的HBV感染动物模型,但黑猩猩的使用受到严格的伦理限制。人们尝试了很多方法以建立HBV感染的小型动物模型。树鼩是唯一可被HBV感染的非灵长类动物。与HBV相关的鸭肝炎病毒和土拨鼠肝炎病毒感染模型的应用推动了对HBV复制机制的认识和治疗方法的评价。近年来发展的人-鼠嵌合体模型则使得人们得以利用常规的实验动物开展HBV研究。这些模型存在各自的优缺点,在某些方面可以互补。本文就目前常用的HBV感染动物模型作一概述。 李军 刘宏利 韩超 熊传奇 曾兴光 韩俊峰 吴玉章关键词:乙型肝炎病毒 动物模型 树鼩 嵌合体小鼠 HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定 被引量:2 2010年 目的优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法。方法在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖,PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000g纯化后的HBV超微形态;70000 g纯化后的HBV颗粒感染树鼩肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性。结果100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000g还提高3.7倍多。电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞。结论70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性。 曾兴光 石统东 韩俊峰 邹丽云 谢谆怡 刘宏利 吴玉章关键词:乙型肝炎病毒 纯化 靶向肝脏的caspase-1抑制剂及其应用 本发明公开了一种靶向肝脏的caspase-1抑制剂,由人乙型肝炎病毒Pre-S1肽通过柔性接头与caspase-1抑制剂连接而成,Pre-S1肽由Pre-S1蛋白的第1-50位氨基酸组成,caspase-1抑制剂由YVA... 王靖雪 吴玉章 刘钱 刘宏利文献传递 颗粒性肽-DNA复合疫苗抗肿瘤免疫的研究 被引量:7 2004年 诱导有效的抗肿瘤免疫应答是肿瘤免疫治疗的主要目标 ,由于肽疫苗和DNA疫苗具备较高的安全性和实用性 ,因而成为肿瘤疫苗学领域中发展最为迅速的肿瘤免疫治疗方案之一。但是这两种疫苗形式仍然具有各自的缺点 ,其抗原呈递动力学存在显著差异 ,提示这两种疫苗可能存在互补性。本研究对多肽疫苗和DNA疫苗进行综合 ,设计出新型肽 DNA复合疫苗 ,并以P815A为模式抗原 。 刘宏利 赵建平 倪兵 贾正才 周伟 赵婷婷 邹丽云 吴玉章关键词:肿瘤 DNA疫苗 肽疫苗 乙型肝炎病毒颗粒的分离纯化方法 本发明公开了乙型肝炎病毒颗粒的分离纯化方法,是将乙型肝炎病毒DNA阳性血清以70000g进行不连续蔗糖密度梯度(60%、45%、35%、25%、15%)离心5小时,再自离心管底部分段吸取离心液并分别收集到不同的容器内,合... 曾兴光 吴玉章 刘宏利 韩俊峰 邹丽云 谢谆怡新型颗粒性肽-DNA复合疫苗有效激发肿瘤抗原特异性CTL反应 被引量:2 2004年 目的 设计新型抗肿瘤治疗性疫苗。方法 以多聚赖氨酸为桥梁 ,将抗原肽与其编码基因并置于同一疫苗颗粒 ,进而设计出颗粒性肽 DNA复合疫苗。结果 该疫苗可激发体内肿瘤特异性CTL反应 ,并对P815肿瘤具有特异性杀伤活性。结论 该颗粒性肽 刘宏利 赵建平 倪兵 贾正才 周伟 邹丽云 吴玉章关键词:肿瘤 细胞毒性T淋巴细胞 DNA疫苗 肽疫苗 多聚赖氨酸 颗粒性肽-DNA复合疫苗激发抗肿瘤免疫的研究 该课题以该研究所前期'模拟病毒'的研究工作为基础,对多肽疫苗和DNA疫苗进行综合,以期实现这两种抗原形式在抗肿瘤免疫激发过程中的协同互补,进而设计出肽-DNA复合疫苗.多聚赖氨酸作为自组织非病毒基因转染载体,已经在基因治... 刘宏利关键词:CTL 肿瘤 肽疫苗 DNA疫苗 文献传递 病毒接种剂量对HBV感染成年树鼩的影响 被引量:7 2012年 目的探讨不同病毒接种剂量对乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)感染树鼩进程的影响。方法分别给4组树鼩接种含101、102、104和108GE(genome equivalents)乙肝病毒的感染者血清,于不同时间点采集树鼩血清标本,应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence,PCR)检测血清HBV DNA浓度,用电化学发光免疫测定法(electrochemiluminescence immunoassay,ELICA)检测血清中HBV感染标志物,用临床生化分析仪测定谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)水平。结果接种108GE HBV后树鼩体内HBV感染持续3周,接种104GE HBV后树鼩体内HBV感染延长至15周,接种101和102GE HBV后树鼩体内HBV感染可以存在9周。结论病毒接种剂量对HBV感染成年树鼩的进程有显著影响,中低剂量(101、102和104GE)接种利于树鼩体内HBV感染的维持。 李军 刘宏利 韩超 熊传奇 曾兴光 韩俊峰 吴玉章关键词:乙型肝炎 乙型肝炎病毒 树鼩