李坚
- 作品数：7 被引量：49H指数：4
- 供职机构：杭州市萧山区第四人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 猫α-synuclein蛋白的表达纯化及生物学特征分析
- 2015年
- 目的对猫突触核蛋白（α-synuclein）进行克隆、表达及纯化,并探讨其生物信息学特征。方法在Genebank中α-synuclein基因的保守区域内设计引物,从猫脑c DNA文库中PCR扩增得到猫的α-synuclein基因,再将此基因双酶切后克隆到p ET28a原核表达载体中,构建重组质粒,测序正确的重组质粒转化BL21（DE3）大肠杆菌,采用IPTG诱导表达。然后对猫α-synuclein氨基酸的同源性和疏水性进行分析。结果实验成功从猫脑c DNA文库中扩增出α-synuclein基因,基因全长381个碱基,编码126个氨基酸。获得的全长基因成功克隆进入p ET28a,最后转染大肠杆菌BL21（DE3）,获得可溶性表达的α-synuclein蛋白质,蛋白质分子量为13.12k D,与预期分子量一致。生物信息学分析显示猫α-synuclein蛋白与人源及鼠源α-synuclein氨基酸具有很高的同源性,分别为87.35%和83.15%,但是与鼠和人的氨基酸序列比较,猫α-synuclein氨基酸缺失41～54位氨基酸。蛋白质结构预测显示猫α-synuclein具有很好的疏水性,有助于诱导表达时形成可溶性蛋白,这一结果在本研究中得到证实。结论本研究首次克隆了猫α-synuclein基因,并在大肠杆菌中实施了可溶性表达,为后期研究α-synuclein的进化、蛋白晶体结构、生物学功能和帕金森动物模型的构建奠定了一定的基础。
- 倪斌张玲李坚张金喜周健杨可威张君智戴一鸣夏雅琴鲁燕华刘俊平李建峰
- 关键词：Α-突触核蛋白帕金森病克隆原核表达纯化
- VSD技术结合皮瓣转移治疗四肢伤口慢性感染的临床分析
- 2014年
- 目的：探讨VSD技术结合皮瓣转移治疗四肢伤口慢性感染的临床效果。方法应用 VSD技术结合皮瓣转移治疗四肢伤口慢性感染28例。结果28例中除2例远端皮瓣坏死经换药愈合，其余均Ⅰ期愈合，感染控制，随访2个月～4年，皮瓣无溃疡，感染无复发，患肢外观及功能可接受。结论 VSD技术结合皮瓣转移治疗四肢伤口慢性感染效果好，效程短、可早期覆盖伤口。
- 张金喜朱建龙张海明李坚
- 关键词：VSD技术皮瓣转移伤口感染
- 腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝周围软组织缺损创面被引量：4
- 2013年
- 目的探讨腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝周围软组织缺损的临床效果。方法．利用腓肠神经营养血管皮瓣修复外伤后足踝周围软组织缺损16例。结果16例中1例远端皮瓣部分坏死，其余均一期愈合。随访2个月-2年，皮瓣无溃疡。外观可以接受。结论腓肠神经营养血管皮瓣转移是修复足踝周围软组织缺损创面的理想方法。
- 张金喜朱建龙余伟彪李敏皋张海明李坚
- 关键词：软组织缺损腓肠神经营养血管皮瓣
- 经皮椎体成形骨水泥注入治疗老年脊椎骨质疏松压缩性骨折的疗效被引量：28
- 2014年
- 随着社会老龄化的不断加重,骨质疏松性胸腰椎压缩性骨折(OVCF)的发病率逐年增多。OVCF可造成严重而持续的疼痛,使许多老年患者的生活质量下降,死亡率增加。目前,在治疗OVCF方面上,经皮椎体成形术(PVP)已得到广泛应用〔1〕。在胸腰段椎体进行PVP,椎弓根入路已经得到广泛应用。双侧入路手术相比于单侧时,术者和患者暴露在射线下的时间更长,创伤更大,故单侧椎弓根入路具有手术时间短、创伤小。
- 李坚陈其昕张金喜李敏皋
- 关键词：椎体成形术骨质疏松压缩性骨折
- 老年患者关节置换后假体感染的相关因素与干预措施研究被引量：5
- 2015年
- 目的研究老年患者关节置换后发生假体感染的相关因素,并探究其预防对策,降低假体感染发生率。方法选择2012年1月-2014年10月医院180例接受治疗的老年关节置换术患者作为研究对象,观察分析患者关节置换后发生假体感染的相关危险因素,采用SPSS18.0软件对数据进行统计分析。结果 180例老年关节置换术患者发生假体感染15例,感染率8.33%;老年患者关节置换后发生假体感染的危险因素分别为年龄>70岁、手术时间>4h、并发症种类≥2种、空腹血糖异常升高及不规范使用抗菌药物;空腹血糖异常升高可以导致关节置换后假体感染率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论预防感染相关因素术前控制合并症、术中严格规范操作、减少手术时间可降低术后假体感染的发生率。
- 张金喜李坚张海明曹嫌华郭剑栋
- 关键词：关节置换假体感染干预措施
- 示指固有伸肌腱转位修复重建V区拇长伸肌腱自发性断裂临床研究被引量：8
- 2014年
- 目的探讨示指固有伸肌腱转位修复重建V区拇长伸肌腱自发性断裂的临床效果。方法从2010年5月至2012年5月,本院共收治拇长伸肌腱V区自发性断裂21例,半随机分为2组,治疗组11例采用示指固有伸肌腱转位修复重建,对照组10例采用掌长肌腱移植修复。结果根据TAM评价标准,治疗组11例治疗效果优7例(63.6%),良4例(36.4%),差0例,对照组10例中优4例(40%),良4例(40%),差2例(20%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论采用示指固有伸肌腱转位修复重建拇长伸肌腱自发断裂效果满意。
- 张金喜李敏皋李坚
- 腓肠神经营养皮瓣修复足踝周围软组织缺损创面被引量：4
- 2013年
- 目的 探讨腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝周围软组织缺损的临床效果. 方法 利用腓肠神经营养血管皮瓣修复外伤后足踝周围软组织缺损16例. 结果 16例中1例远端皮瓣坏死,其余均Ⅰ期愈合.随访2个月～2年,皮瓣无溃疡,外观可以接受. 结论 腓肠神经营养血管皮瓣是修复足踝周围软组织缺损创面的理想方法.
- 张金喜朱建龙余伟彪李敏皋张海明李坚
- 关键词：软组织缺损腓肠神经营养皮瓣
