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周彪: 作品数：12 被引量：29H指数：3; 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>; 发文基金：四川省应用基础研究计划项目中央高校基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学一般工业技术更多>>

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藏猪源益生芽胞杆菌的筛选鉴定及部分益生特性的研究被引量：1: 2016年; 从藏猪粪便中分离筛选出具有良好益生潜力的益生芽胞杆菌,为藏猪源益生菌的开发奠定基础。先将健康藏猪粪便滤液于90℃水浴处理10 m in以杀死样品中的非芽胞杆菌,涂布于培养基后挑取单菌落纯化并扩大培养,再进行拮抗试验筛选能抑制常见病原菌的芽孢杆菌。综合形态学、生理生化特征及16S r D N A序列分析对筛选菌株进行鉴定,通过菌株耐受性试验、产水解酶试验、抗生素敏感试验等对菌株生物学特性进行研究。结果显示,筛选到3株对常见病原菌具有一定抑制作用的芽胞杆菌,其中,解淀粉芽胞杆菌SW U N-TP23在不利环境中具有较强的稳定性,可代谢产生纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶,菌体内不含抗常用兽用抗生素的耐药基因。结果表明,分离筛选到的解淀粉芽胞杆菌SWUN-TP23有良好的潜在益生能力,具有进一步开发研究的价值。; 郭政宏周彪张怡严亨秀; 关键词：藏猪芽胞杆菌生物学特性

新型小分子化合物对银屑病模型小鼠尾部鳞片颗粒层细胞的影响被引量：1: 2016年; 银屑病是一种慢性易复发的炎性皮肤疾病,为了探讨新型小分子化合物FMS样的酪氨酸激酶3(fms-like tyrosine kinase 3,FLT3)抑制剂对银屑病的治疗作用,采用了小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成模型,分别进行口服及外用给药,并取尾部皮肤制作病理切片,计算有颗粒层形成的鳞片数。结果显示:口服给药及外用给药组小鼠尾部鳞片颗粒细胞数均显著高于空白对照组(P<0.01),同时实验组小鼠颗粒细胞体积增大,胞浆内颗粒粗大且染色较深,细胞分界清楚,细胞核及核仁明显,但是各实验组内不同浓度间差异不显著,此外口服给药及外用给药组小鼠内脏器官均未出现明显的毒副作用。以上结果说明该新型小分子化合物FLT3抑制剂能使小鼠尾部鳞片颗粒细胞显著增多,而且口服和外用制剂均能有效拮抗银屑病,并对小鼠内脏器官无明显的毒副作用。; 郭政宏周彪唐冬梅严亨秀; 关键词：银屑病疗效分析给药方式

以多层磷酸钙纳米颗粒为载体的O型口蹄疫病毒VP1和VP2基因重组疫苗的构建被引量：1: 2015年; 构建以多层纳米颗粒为载体的O型口蹄疫病毒基因重组疫苗。在GenBank中查询编码O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1 141-160氨基酸和VP2 1-33氨基酸的核苷酸序列,合成该两段基因的重组基因并命名为VP1-VP2基因。再通过PCR扩增VP1和VP2基因,并将VP1、VP2及VP1-VP2基因分别插入到真核表达载体pcDNA3.1中,构建3种重组真核表达质粒(pcDNA3.1-VP1、pcDNA3.1-VP2和pcDNA3.1-VP1-VP2),并分别对重组质粒进行酶切、PCR鉴定及测序分析。将构建的重组质粒制备成多层磷酸钙纳米颗粒,检测其粒径、稳定性及体外转染效率。重组质粒酶切结果显示,基因片段大小与预期相符;测序显示与GenBank中相应基因序列同源性为100%。制备的多层纳米颗粒粒径约为530nm;在4℃过夜保存后,溶液均匀透明;体外转染HEK293细胞的转染效率在9.6%左右。成功构建了以多层磷酸钙纳米颗粒为载体的O型口蹄疫病毒VP1和VP2基因重组质粒,为进一步研究该基因疫苗奠定了基础。; 唐冬梅付丽新周彪郭政宏严亨秀; 关键词：口蹄疫 VP1基因 VP2基因基因疫苗

藏猪粪便芽孢杆菌基因组DNA的提取方法被引量：2: 2016年; 藏猪源的芽孢杆菌制剂具有潜在研究应用价值,更好地提取其基因组DNA对后期研究具有重要作用。采用微波法、酚/三氯甲烷法、改进CTAB法、试剂盒法等4种方法提取同一份藏猪粪便DNA,测定所得DNA含量及纯度,然后对DNA进行16S rRNA基因扩增并使用琼脂糖凝胶电泳法对比。结果表明,4种方法均能提取到藏猪粪便的芽孢杆菌基因组DNA,微波法虽然得到最多的DNA,但是其蛋白质含量过高,DNA纯度最低;试剂盒法提取的DNA纯度最高,但是DNA含量太低;综合比较,改进CTAB法DNA得率多且纯度高,性质稳定,扩增效果好,价格低廉,是最优提取方法。; 周彪郭政宏严亨秀; 关键词：藏猪粪便基因组DNA

银屑病样皮损的组织病理研究被引量：6: 2015年; 用咪喹莫特诱发小鼠出现银屑病样改变,通过优化病理切片技术对皮损进行组织病理学研究.在Balb/c小鼠背部皮肤涂抹咪喹莫特7天,诱发银屑病样皮损,对其进行PASI评分,分析皮损程度;取皮损组织,制作石蜡病理切片,对浸蜡、脱水、染色等步骤进行温度、时长的优化,比较传统切片染色和优化方法对Baker组织病理学评分的影响.模型组小鼠涂抹咪喹莫特7天后出现红斑、鳞屑和皮肤增厚等银屑病样改变;镜下观察组织切片,发现其表皮增厚,角化不全,出现Munro小脓肿,棘层肥大等银屑病样病理变化.经本实验室常规方法处理的切片,组织不完整,结构不易分辨,影响组织病理学评分,从而影响对该动物疾病模型的鉴定;经改进处理后的切片,组织完整,结构清晰,染色均匀,能进行直观观察并准确评分,从而能准确鉴定银屑病疾病模型是否正确建立,为新药的临床前研究奠定基础.本实验成功制备银屑病样动物模型,通过切片和染色方法的改进获得较高质量的皮损组织石蜡切片,提高了疾病动物模型成功建立的鉴定标准,也为进一步的银屑病新药研究奠定了良好的基础.; 唐冬梅周彪付丽新郭政红严亨秀; 关键词：咪喹莫特银屑病动物模型病理研究

普通磷酸钙纳米基因载体制备条件的优化: 2016年; 为了优化磷酸钙纳米基因载体制备条件,提高磷酸钙纳米载体的转染效率,试验采用普通磷酸钙纳米基因载体制备方法,根据搅拌时间(1,2,3,4 h)分为4组,通过电泳测定上清液和沉淀中载体含量和纳米颗粒含量,最后使用荧光标记法检测磷酸钙纳米基因载体转染效率。结果表明:纳米颗粒在沉淀中大量存在,而在上清液中没有发现纳米颗粒;搅拌1 h制备的纳米颗粒粒径最小,且沉淀中拥有最多的纳米颗粒含量,使用此组载体转染细胞效率为20%。说明搅拌1 h为磷酸钙纳米基因载体的最佳制备条件。; 周彪付立新唐冬梅郭政宏严亨秀; 关键词：纳米电泳荧光

藏猪源解淀粉芽孢杆菌的益生性、安全性和应用性研究: 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一种在形态、生理生化和培养特征等方面与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)非常相似的芽孢杆菌,其在生长繁殖过程中能够产生许多淀粉酶、蛋...; 郭政宏周彪严亨秀; 关键词：藏猪解淀粉芽孢杆菌安全性黄曲霉毒素B1; 文献传递

基于O型口蹄疫病毒VP2_(1-33)肽段增强VP1_(141-160)肽段免疫原性的新型纳米颗粒疫苗研究被引量：1: 2018年; 目的研究O型口蹄疫病毒中VP2_(1-33)肽段能否增强VP1_(141-160)肽段的免疫原性及其可能的免疫机制。方法分别构建两种新的含有VP1和VP2的重组质粒(PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2),并将重组质粒制备成纳米颗粒,检测其体外转染效率。然后将上述纳米颗粒作为基因疫苗免疫Balb/c小鼠,PBS及空载质粒作为对照。液相阻断ELISA方法检测不同时间小鼠血清中抗体情况;流式细胞术和免疫组化染色的方法分析免疫小鼠外周血、脾脏和腹股沟淋巴结中CD4+、CD8+T淋巴细胞的差异;淋巴细胞增殖实验检测免疫28d后小鼠外周血中淋巴细胞的增殖能力。结果对重组质粒进行鉴定,结果显示重组质粒(PcDNA3.1-VP1、PcDNA3.1-VP2)构建成功;体外转染实验结果显示该纳米颗粒体外转染效率约为28%,具有较高的转染效率。ELISA检测显示VP1与VP2共同免疫小鼠血清中的抗体滴度均在初次免疫后的第21和28d达到最高,并显著高于对照组(F=4.625,P<0.05);流式和免疫组化染色结果分析发现VP1与VP2共同免疫小鼠血液、淋巴结和脾脏中CD4^+、CD8^+T淋巴细胞数均显著高于对照组;淋巴细胞增殖实验结果显示VP1与VP2共同免疫小鼠淋巴细胞增殖能力均显著高于对照组(F=12.73,P<0.05)。结论 O型FMDV VP2的1-33肽段能增强VP1的141-160肽段的免疫原性,其可能通过激活细胞免疫和体液免疫实现。; 付丽新付丽新唐冬梅周彪罗又才严亨秀; 关键词：口蹄疫 VP1 VP2

一株藏绵羊源短小芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：11: 2016年; 为获得来源于藏绵羊的益生菌菌株,对健康母藏绵羊新鲜粪便进行90℃水浴处理5min以筛选具有抗逆性的芽孢杆菌,再综合形态学、生理生化特征及16SrDNA序列分析进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产水解酶试验等方法对其生物学特性进行研究。结果显示,从新鲜粪便样品中分离到的芽孢杆菌菌株SWUN-G43对大肠杆菌和沙门氏菌有明显的抑菌效果,通过分析鉴定其为短小芽孢杆菌,该菌株在pH 2.0的环境中存活率为50.43%,在0.3%胆盐环境中存活率为44.35%,可产生蛋白酶和纤维素酶,对12种常用的抗生素具有很高的敏感性。从试验结果可分析出该短小芽孢杆菌(SWUN-G43)有一定的抗逆性和潜在的益生能力,且该菌株不含耐药质粒,不会在动物肠道微生态系统中造成抗生素抗性的水平传递,具有作为微生态添加剂开发的潜力。; 郭政宏周彪严亨秀; 关键词：藏绵羊短小芽孢杆菌

CD11c^+DCs促K14-VEGF转基因小鼠银屑病样发病被引量：2: 2018年; 目的研究CD11c^+DCs对银屑病的促进作用及机制。方法取K14-VEGF转基因小鼠皮损皮肤进行表型鉴定。将CD11c^+DCs注射入未发病的转基因小鼠颈部皮下,对小鼠进行PASI评分;组织学检测小鼠耳朵和颈背部皮肤;检测骨髓、血液、脾脏和颌下淋巴结处T淋巴细胞和DCs;免疫荧光法检测皮损中CD4、CD8、IL-17a、IFN-γ和CD31含量;HE染色方法观察小鼠心、肝、脾、肺和肾的变化。结果 K14-VEGF小鼠皮损中90%FLT3阳性细胞表达CD11c。实验组表皮层厚度均显著高于对照组(P<0.01)。血液中CD3^+CD4^+T淋巴细胞数降低(P<0.01);骨髓、血液、脾脏和颌下淋巴结中的Th1和Th17细胞减少;同时,骨髓和颌下淋巴结中的CD11c^+DCs减少(P<0.01);皮损皮肤中表达CD4^+T、CD8^+T、IL-17a^+和IFN-γ^+的细胞均增多(P<0.01),血管增多(P<0.01)。结论 CD11c^+DCs可通过促使K14-VEGF小鼠皮肤中T淋巴细胞及血管增多使该小鼠银屑病样病变提前发生,提示CD11c^+DCs可能在银屑病的发生发展中起重要作用。; 张怡周彪郭政宏龙虎严亨秀; 关键词：银屑病免疫调节

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