李一锋
- 作品数:4 被引量:14H指数:2
- 供职机构:广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 载脂蛋白E缺乏对视神经脊髓炎体外模型的损伤影响被引量:2
- 2018年
- 目的 探索载脂蛋白E(ApoE)缺乏对视神经脊髓炎(NMO)体外模型的损伤影响。方法 将7 d龄的野生型及ApoE基因敲除(ApoE-/-)的C57BL/6J小鼠脊髓切片培养7 d后,将两种基因型的脊髓片按照随机数字表法随机分为实验组及对照组。实验组加入从NMO患者血清提取出的自身抗体免疫球蛋白G(NMO-IgG)及正常人补体血清;对照组不加NMO-IgG,余处理方式与实验组相同,继续培养24 h。用免疫荧光法检测脊髓片水通道蛋白4(AQP4)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙接头蛋白(IBA1)、髓鞘碱性蛋白(MBP)、人神经丝蛋白L(NFL)的表达水平,并根据脊髓片AQP4和GFAP缺失面积比例计算损伤积分。结果 与相应的对照组相比,ApoE基因敲除小鼠造模组(NMO-ApoE-/-组)和野生型小鼠造模组(NMO-WT组)均出现明显的AQP4、GFAP、MBP和NFL缺失(NMO-ApoE-/-组上述各项指标缺失面积百分比分别为83.88%±5.01%、82.44%±6.11%、45.02%±5.11%、54.65%±7.66%,相应对照组对应指标分别为10.44%±4.07%、5.73%±0.82%、9.12%±1.41%、5.72%±0.81%, t=34.143、37.269、20.300、19.051,均P〈0.05;NMO-WT组上述指标缺失面积比例分别为77.74%±6.75%、75.62%±5.76%、37.60%±4.88%、46.29%±4.98%,相应对照组对应指标分别为9.31%±2.97%、5.80%±0.82%、9.10%±1.63%、5.80%±0.81%,t=27.828、35.934、16.613、24.057,均P〈0.05),且NMO-ApoE-/-组染色缺失的程度较NMO-WT组严重(t=2.194、2.436、3.149、2.746,均P〈0.05),两组损伤积分均较各自对照组明显增高,均出现IBA1表达上调(NMO-WT组及对照组:19.88±1.11与11.18±0.65,t=25.270,P〈0.05),且NMO-ApoE-/-组的IBA1表达水平较NMO-WT组更高(25.81±1.61与19.88±1.11,t=9.101,P〈0.05)。结论 在补体存在的情况下,从NMO患者血清提取出的NMO-IgG可以诱导离体组织产生NMO样损伤。ApoE缺失可�
- 廖韦静李一锋唐玉兰范丽君黄帆
- 关键词:载脂蛋白E类视神经脊髓炎体外模型
- 载脂蛋白E对脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响被引量:1
- 2018年
- 目的探究载脂蛋白E(Apo E)对髓鞘抗原刺激的小鼠脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)作为抗原诱导免疫Apo E基因缺失型(Apo E-/-)和野生型(WT)型的C57BL/6J小鼠,免疫后第7天取小鼠脾脏,分离并体外培养淋巴细胞,随机分为4组,即Apo E-/-实验组(E-Apo E-/-)、WT实验组(E-WT)、Apo E-/-对照组(C-Apo E-/-)、WT对照组(C-WT)。予以MOG35-55刺激E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞,C-Apo E-/-组和C-WT组给予等量生理盐水作为对照处理,24 h后离心并收集上清。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度。结果 (1)小鼠被诱导免疫后,Apo E-/-小鼠和WT小鼠脾脏淋巴细胞均能分泌TNF-α、IL-17、MMP-9,Apo E-/-小鼠脾脏淋巴细胞分泌的量较多,差异有统计学意义(P<0.05);(2)体外用MOG35-55刺激脾脏淋巴细胞后,E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞TNF-α、IL-17、MMP-9的浓度明显升高,且E-Apo E-/-组较E-WT组更显著,差异有统计学意义(P<0.05);(3)各组小鼠脾脏淋巴细胞分泌TIMP-1的量未见明显差别,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Apo E可以调节脾脏淋巴细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-17和基质金属蛋白酶MMP-9,进而可能影响血脑屏障的完整性。
- 范丽君卢文玉唐玉兰黄帆李一锋卢珍梅韦俊杰郑明华
- 关键词:载脂蛋白E淋巴细胞基质金属蛋白酶-9血脑屏障
- 载脂蛋白E对EAE小鼠发病前期巨噬细胞分泌MMP-9、TIMP-1及炎症因子的影响被引量:6
- 2018年
- 目的探讨载脂蛋白E(ApoE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠发病前期脾脏巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP—1)及炎症因子的影响。方法按照随机数字表法,将20只ApoE基因敲除型(ApoE-/-)C57BL/6J小鼠分为ApoE-/- EAE组和ApoE-/-对照组,20只野生型(WT)C57BL/6J小鼠分为WTEAE组和WT对照组,每组10只。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35.55(MOG35—55)作为抗原诱导ApoE-/- EAE组和WTEAE组小鼠制成EAE模型,ApoE-/-对照组和WT对照组小鼠以生理盐水代替。提取造模后7d时小鼠脾脏巨噬细胞进行体外培养,ApoE-/- EAE组和WTEAE组巨噬细胞以MOG35—55刺激,ApoE-/-对照组和WT对照组巨噬细胞予等量生理盐水处理,48h后采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-6(IL-6)含量。结果WTEAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN—γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于ApoE-/-对照组,ApoE-/-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WTEAE组,WTEAE组巨噬细胞的TIMP-1分泌量明显高于WT对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论在EAE发病前期,脾脏巨噬细胞分泌的MMP-9及炎症因子增多,而ApoE表达的缺乏进一步促进巨噬细胞分泌更多的MMP-9及炎症因子,故给予ApoE补充可能会通过调节巨噬细胞分泌MMP-9及炎症因子.起到保护血脑屏障完整性、减轻炎症反应的作用。
- 卢珍梅卢文玉唐玉兰范丽君李一锋韦俊杰韦云飞
- 关键词:载脂蛋白E实验性自身免疫性脑脊髓炎巨噬细胞基质金属蛋白酶组织抑制因子-1炎症因子
- 高脂及糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体中eNOS和ET-1蛋白表达的研究被引量:5
- 2015年
- 目的探讨高脂及糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和内皮素一1(ET_1)蛋白表达的变化及其可能的机制。方法58只SPF级雄性SD大鼠随机分成3组:(1)对照组(n=14),普通饲料喂养;(2)高脂组(n=15),高脂饲料喂养24周后在原饲料配方中加入含0.2%硫氧嘧啶继续喂养;(3)糖尿病组(n=29),高脂饲料喂养24周后腹腔注射20mg/kgSTZ;于实验开始后36周末,检测大鼠血糖、血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素水平;成模后用阿朴吗啡诱导并观察大鼠阴茎勃起功能变化;采用Westernblot检测大鼠阴茎海绵体组织eNOS和ET-1蛋白表达。结果血糖、胰岛素、血脂检测结果显示成功建立了高脂和糖尿病模型。与对照组相比,高脂及糖尿病组大鼠勃起功能明显下降,eNOS蛋白表达显著降低,而ET-1显著升高(Jp〈O.05);与高脂组相比,糖尿病组eNOS与ET-1表达进一步失衡,且阴茎勃起功能障碍较高脂组加重。结论糖尿病和高脂血症导致勃起功能障碍的发病机制可能与阴茎海绵体组织内eNOS和ET-1表达失衡密切相关。
- 张成梅李一锋甘美舍申树林郑程李广裕梁季鸿
- 关键词:糖尿病勃起功能障碍