范丽君
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 供职机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 载脂蛋白E缺乏对视神经脊髓炎体外模型的损伤影响被引量：2
- 2018年
- 目的 探索载脂蛋白E（ApoE）缺乏对视神经脊髓炎（NMO）体外模型的损伤影响。方法 将7 d龄的野生型及ApoE基因敲除（ApoE－/－）的C57BL/6J小鼠脊髓切片培养7 d后，将两种基因型的脊髓片按照随机数字表法随机分为实验组及对照组。实验组加入从NMO患者血清提取出的自身抗体免疫球蛋白G（NMO－IgG）及正常人补体血清；对照组不加NMO－IgG，余处理方式与实验组相同，继续培养24 h。用免疫荧光法检测脊髓片水通道蛋白4（AQP4）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、离子钙接头蛋白（IBA1）、髓鞘碱性蛋白（MBP）、人神经丝蛋白L（NFL）的表达水平，并根据脊髓片AQP4和GFAP缺失面积比例计算损伤积分。结果 与相应的对照组相比，ApoE基因敲除小鼠造模组（NMO－ApoE－/－组）和野生型小鼠造模组（NMO－WT组）均出现明显的AQP4、GFAP、MBP和NFL缺失（NMO－ApoE－/－组上述各项指标缺失面积百分比分别为83.88%±5.01%、82.44%±6.11%、45.02%±5.11%、54.65%±7.66%，相应对照组对应指标分别为10.44%±4.07%、5.73%±0.82%、9.12%±1.41%、5.72%±0.81%, t＝34.143、37.269、20.300、19.051，均P〈0.05；NMO－WT组上述指标缺失面积比例分别为77.74%±6.75%、75.62%±5.76%、37.60%±4.88%、46.29%±4.98%，相应对照组对应指标分别为9.31%±2.97%、5.80%±0.82%、9.10%±1.63%、5.80%±0.81%，t＝27.828、35.934、16.613、24.057，均P〈0.05），且NMO－ApoE－/－组染色缺失的程度较NMO－WT组严重（t＝2.194、2.436、3.149、2.746，均P〈0.05），两组损伤积分均较各自对照组明显增高，均出现IBA1表达上调（NMO－WT组及对照组：19.88±1.11与11.18±0.65，t＝25.270，P〈0.05），且NMO－ApoE－/－组的IBA1表达水平较NMO－WT组更高（25.81±1.61与19.88±1.11，t＝9.101，P〈0.05）。结论 在补体存在的情况下，从NMO患者血清提取出的NMO－IgG可以诱导离体组织产生NMO样损伤。ApoE缺失可�
- 廖韦静李一锋唐玉兰范丽君黄帆
- 关键词：载脂蛋白E类视神经脊髓炎体外模型
- 载脂蛋白E对星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9表达的作用及机制研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨载脂蛋白E（ApoE）对星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的作用及机制。方法（1）体外培养C57BL／6J种属的ApoE基因敲除型（ApoE-／-）和野生型（WT）乳鼠的星形胶质细胞后，利用胶质纤维酸性蛋白fGFAP）抗体行免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞，利用MMP一9抗体行免疫荧光染色检测星形胶质细胞是否定性表达MMP-9。（2）将2种乳鼠的星形胶质细胞分别分为对照组、活化组、抗体1组、抗体2组、抗体3组、抗体4组，对照组不进行任何干预，活化组加入百Et咳毒素、热灭活的结核分枝杆菌H37Ra刺激，抗体1-4组在活化组的基础上分别加入抗白介素-6（IL-6）、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-12（IL-12）抗体以抑制其相应的炎症因子。采用ELISA法检测各组星形胶质细胞MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）浓度以及IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度。结果（1）2种乳鼠的星形胶质细胞均定性表达MMP-9，其中活化组MMP-9浓度均较对照组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）；抗体1-4组MMP-9浓度均较活化组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）；ApoE-／-乳鼠的活化组MMP．9浓度明显高于wT乳鼠的活化组，差异有统计学意义（P〈0．05）。TIMP-1浓度在各组问差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）2种乳鼠的活化组IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度均较对照组明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）；抗体1组IL-6浓度、抗体2组IFN—γ浓度、抗体3组TNF-α浓度、抗体4组IL-12浓度均较活化组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）；ApoE-／-乳鼠的活化组IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-12等炎症因子浓度均明显高于WT乳鼠的活化组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论ApoE可通过调节星形胶质细胞分泌炎症因子影�
- 卢文玉唐玉兰李一锋范丽君韦俊杰郑明华韦云飞程道宾
- 关键词：载脂蛋白E星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶组织抑制剂-1血脑屏障
- 载脂蛋白E对脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9表达的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探究载脂蛋白E(Apo E)对髓鞘抗原刺激的小鼠脾脏淋巴细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(MOG35-55)作为抗原诱导免疫Apo E基因缺失型(Apo E-/-)和野生型(WT)型的C57BL/6J小鼠,免疫后第7天取小鼠脾脏,分离并体外培养淋巴细胞,随机分为4组,即Apo E-/-实验组(E-Apo E-/-)、WT实验组(E-WT)、Apo E-/-对照组(C-Apo E-/-)、WT对照组(C-WT)。予以MOG35-55刺激E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞,C-Apo E-/-组和C-WT组给予等量生理盐水作为对照处理,24 h后离心并收集上清。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的浓度。结果 (1)小鼠被诱导免疫后,Apo E-/-小鼠和WT小鼠脾脏淋巴细胞均能分泌TNF-α、IL-17、MMP-9,Apo E-/-小鼠脾脏淋巴细胞分泌的量较多,差异有统计学意义(P<0.05);(2)体外用MOG35-55刺激脾脏淋巴细胞后,E-Apo E-/-组和E-WT组淋巴细胞TNF-α、IL-17、MMP-9的浓度明显升高,且E-Apo E-/-组较E-WT组更显著,差异有统计学意义(P<0.05);(3)各组小鼠脾脏淋巴细胞分泌TIMP-1的量未见明显差别,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Apo E可以调节脾脏淋巴细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-17和基质金属蛋白酶MMP-9,进而可能影响血脑屏障的完整性。
- 范丽君卢文玉唐玉兰黄帆李一锋卢珍梅韦俊杰郑明华
- 关键词：载脂蛋白E淋巴细胞基质金属蛋白酶-9血脑屏障
- 载脂蛋白E对EAE小鼠发病前期巨噬细胞分泌MMP-9、TIMP-1及炎症因子的影响被引量：6
- 2018年
- 目的探讨载脂蛋白E（ApoE）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠发病前期脾脏巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP—1）及炎症因子的影响。方法按照随机数字表法，将20只ApoE基因敲除型（ApoE-/-）C57BL／6J小鼠分为ApoE-／- EAE组和ApoE-/-对照组，20只野生型（WT）C57BL／6J小鼠分为WTEAE组和WT对照组，每组10只。采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35．55（MOG35—55）作为抗原诱导ApoE-/- EAE组和WTEAE组小鼠制成EAE模型，ApoE-/-对照组和WT对照组小鼠以生理盐水代替。提取造模后7d时小鼠脾脏巨噬细胞进行体外培养，ApoE-/- EAE组和WTEAE组巨噬细胞以MOG35—55刺激，ApoE-/-对照组和WT对照组巨噬细胞予等量生理盐水处理，48h后采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞培养液中MMP-9、TIMP-1、干扰素-γ（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及白介素-6（IL-6）含量。结果WTEAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WT对照组，ApoE-／-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN—γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于ApoE-／-对照组，ApoE-／-EAE组巨噬细胞的MMP-9、IFN-γ、TNF-α及IL-6分泌量均明显高于WTEAE组，WTEAE组巨噬细胞的TIMP-1分泌量明显高于WT对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论在EAE发病前期，脾脏巨噬细胞分泌的MMP-9及炎症因子增多，而ApoE表达的缺乏进一步促进巨噬细胞分泌更多的MMP-9及炎症因子，故给予ApoE补充可能会通过调节巨噬细胞分泌MMP-9及炎症因子．起到保护血脑屏障完整性、减轻炎症反应的作用。
- 卢珍梅卢文玉唐玉兰范丽君李一锋韦俊杰韦云飞
- 关键词：载脂蛋白E实验性自身免疫性脑脊髓炎巨噬细胞基质金属蛋白酶组织抑制因子-1炎症因子
