赵慧 作品数:9 被引量:13 H指数:2 供职机构: 河北医科大学第二医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
RKIP过表达对肝星状细胞在细胞外基质上黏附的抑制 被引量:2 2013年 目的:通过Raf激酶抑制蛋白(Raf kinase inhibitor protein,RKIP)过表达腺病毒感染肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),模拟肝纤维化病理状态下细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分的改变,探讨RKIP对HSC黏附功能的影响.方法:实验共分两组,分别是RKIP过表达组(RKIP-AD)和阴性对照组(GFP-AD).首先确定细胞感染病毒的最适感染强度(multiplicity of infection,MOI)值,在倒置荧光显微镜下观察细胞状态,计数细胞荧光数,筛选出最适MOI值.Western blot方法确定病毒感染后验证外源RKIP在细胞内表达情况.已干预好的细胞稀释成1.0×105/mL的浓度种在盖玻片和已准备好的由matrigel、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白包被的24孔板中,37℃培养1h后,甲醛固定,结晶紫染色.200×纤维镜下观察并计数黏附的细胞数,资料数据以mean±SD表示,采用t检验进行统计分析.结果:人源HSC细胞株LX-2的腺病毒载体感染率可达到80%-90%,适宜的MOI值为5.RKIP过表达组较对照组蛋白表达增多(3.47±0.02vs1.74±0.13,P<0.05).与GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的过表达抑制细胞在matrigel上的黏附(80±14vs152±42,P<0.05).与GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的过表达抑制细胞在Ⅰ型胶原上的黏附(70±13vs138±36,P<0.05).与GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的过表达抑制细胞在纤维连接蛋白上的黏附(133±27vs276±106,P<0.05).结论:体外过表达RKIP可以抑制HSC在胶原基质上的黏附. 马俊骥 赵慧 姜慧卿关键词:肝纤维化 肝星状细胞 RAF激酶抑制蛋白 细胞外基质 血清25-羟维生素D水平与婴幼儿食物过敏的关系研究 被引量:2 2022年 目的 探讨血清25-羟维生素D水平与婴幼儿食物过敏的关系,并分析食物过敏的危险因素。方法 纳入≤3岁确诊食物过敏的40例婴幼儿作为研究组,同时选取40例年龄匹配的健康儿童作为对照组。比较2组血清25-羟维生素D水平,并分析筛选食物过敏的可能危险因素。结果 2组血清25-羟维生素D水平比较差异无统计学意义(P>0.05);在食物过敏组中维生素D缺乏与不足患儿所占比例更高(P<0.05)。血清25-羟维生素D水平在IgE介导的食物过敏与非IgE介导的食物过敏患儿中比较,差异无统计学意义(P>0.05)。单因素Logistic回归分析结果表明,过敏性疾病家族史、湿疹史及低维生素D水平可能是食物过敏的危险因素(P<0.05)。多因素Logistic回归分析表明,湿疹史是食物过敏的独立危险因素(P<0.05)。结论 食物过敏患儿维生素D缺乏和不足者较多,但食物过敏和健康婴幼儿的血清25-羟维生素D水平差异无统计学意义;有湿疹史的婴幼儿,发生食物过敏的风险更高。 赵慧 任延延 张会丰关键词:食物过敏 维生素D 婴幼儿 葡萄糖和醛固酮对大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响 被引量:1 2011年 目的研究葡萄糖和醛固酮对大鼠心脏成纤维细胞增殖的影响。方法差速贴壁法培养新生大鼠心脏成纤维细胞,不同葡萄糖浓度培养液及醛固酮干预24h后,采用水溶性磷酸化四唑盐(WS T-1)、溴尿苷5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入法同步测定细胞的代谢活性和DNA合成。结果低糖组WST-1和BrdU两种方法测得的A_(450/690)值分别为0.270±0.016,0.206±0.018。与低糖组相比,高糖组细胞的代谢活性[WS T-1:(0.385±0.028)vs(0.417±0.034)]和DNA合成[BrdU:(0.270±0.029)vs(0.279±0.045)]均显著增加(P<0.01),两高糖组间细胞的代谢活性和DNA合成差异无统计学意义。低糖培养时,醛固酮(10^(-7)mol/L)显著促进成纤维细胞的增殖(WST-1:0.317±0.023,P<0.01;BrdU:0.235±0.018,P=0.019)。高糖培养时,醛固酮的刺激成纤维细胞增殖作用不明显(P>0.05)。在不同糖浓度,螺内酯均能显著抑制醛固酮引起的细胞代谢活性增强(P<0.05),但对DNA合成的抑制并不明显(P>0.05)。进一步分析表明,葡萄糖和醛固酮对成纤维细胞的DNA合成有交互作用(P=0.012)。结论葡萄糖及醛固酮均可促进大鼠心脏成纤维细胞增殖;当以较高浓度的葡萄糖对心脏成纤维细胞培养时,醛固酮的刺激增殖作用可被掩盖。 赵慧 崔炜 张海林 鲁静朝 王倩关键词:醛固酮 葡萄糖 成纤维细胞 心脏 增殖 大鼠原代肝星状细胞的分离方法研究 被引量:3 2012年 目的 探讨分离肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的有效方法.方法 采用链霉蛋白酶E (pronase E)和胶原酶(collagenase)灌注消化大鼠肝脏,12%Nycodenz密度梯度离心方法分离大鼠原代肝星状细胞.结果 原代肝星状细胞的细胞得率4×107/只大鼠,纯度为95%~98%,存活率96%.结论 肝脏消化酶灌注结合Nycodenz密度梯度离心是一种稳定的分离培养肝星状细胞的方法. 马俊骥 时军利 赵慧 程丽娟 姜慧卿关键词:肝细胞 细胞分离 以反复低钠血症和抽搐为表现的肾性抗利尿不适当综合征一例 被引量:1 2021年 患儿男,7岁,因“间断低血钠抽搐2年3个月,呕吐2 d”于2020年10月入河北医科大学第二医院儿科,经实验室反复检查及高通量基因检测,诊断为肾性抗利尿不适当综合征。经限水治疗,患儿血钠水平正常,无恶心、呕吐及抽搐等不适。由于肾性抗利尿不适当综合征的病例在国内尚未报道,故提升对其认知和诊疗水平尤为重要。 廉怡华 皮亚雷 赵慧 张亚男 张会丰关键词:抗利尿 低钠血症 低血钠 血钠水平 肾性 抽搐 病毒性脑炎合并心肌损害患儿血清Th1/Th2细胞因子含量变化及其诊断效能 2024年 目的探讨病毒性脑炎(viral encephalitis,VE)合并心肌损害患儿血清Th1/Th2细胞因子含量变化及其诊断效能。方法选取我院VE合并心肌损害患儿102例作为研究组,遵循1∶1分配原则另纳入102例VE、102例健康体检儿童作为VE对照组、正常对照组。统计3组血清Th1细胞因子[干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]及Th2细胞因子[白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-10]、心肌酶谱指标[乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、心肌损伤标志物肌酐蛋白(cardic troponin I,cTnI)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)],比较研究组不同心肌损害程度血清Th1/Th2细胞因子,Spearman分析血清Th1/Th2细胞因子与心肌损伤程度相关性,绘制受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)、决策曲线(decision curve analysis,DCA)和临床影响曲线(clinical impact curve,CIC)分析血清Th1/Th2细胞因子诊断VE合并心肌损害价值。结果3组血清IFN-γ、TNF-α、CK-MB、cTnI、LDH水平比较:研究组>VE对照组>正常对照组,血清IL-4、IL-10水平比较:研究组中度>轻度,血清IL-4、IL-10水平比较:重度<中度<轻度(P<0.05);VE合并心肌损害患儿心肌损害程度与IFN-γ、TNF-α呈正相关(r=0.599、0.634)(均P<0.05),与IL-4、IL-10呈负相关(r=-0.602、-0.587)(均P<0.05);血清Th1/Th2细胞因子联合、心肌酶谱联合诊断VE合并心肌损害的AUC分别为0.928(95%CI:0.883~0.959)、0.933(95%CI:0.890~0.963),两者诊断效能近似。DCA、CIC曲线显示,联合Th1、Th2细胞因子的模型诊断VE合并心肌损害净收益率、临床有效率较高。结论VE合并心肌损害患儿血清Th1/Th2细胞因子含量明显异常,且与心肌损伤程度联系密切,IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-4联合诊断VE合并心肌损害具有较高诊断效能及临床效益。 王蕾 门欣怡 袁小辉 赵慧 王薇关键词:心肌损害 ROC曲线 瑞舒伐他汀和阿托伐他汀对新生大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的作用 2010年 目的比较瑞舒伐他汀和阿托伐他汀对新生SD大鼠心脏成纤维细胞(CFs)的抑制作用。方法采用新生SD大鼠CFs进行体外培养,分别给予不同剂量瑞舒伐他汀和阿托伐他汀进行干预。应用MTT法测定CFs细胞数,5-溴脱氧尿嘧啶法测定DNA合成,羟脯氨酸法测定胶原合成,流式细胞仪测定细胞增殖周期。结果瑞舒伐他汀和阿托伐他汀均可明显抑制新生SD大鼠CFs增殖、DNA合成和胶原合成。在相同体外药物浓度下,2药对成纤维细胞的抑制作用无明显差异。2药均可增加CFs处于G0/G1期的百分率,降低CFs处于S期的百分率。结论瑞舒伐他汀和阿托伐他汀均为有效的抗心脏纤维化药物,2种药对心脏成纤维细胞的抑制作用无明显差异。 王倩 崔炜 张海林 李亚 赵慧 鲁静朝关键词:成纤维细胞 瑞舒伐他汀 阿托伐他汀 SiRNA靶向RKIP促进肝星状细胞在细胞外基质上的黏附 被引量:1 2014年 目的研究RKIP低表达对肝星状细胞(HSC)在细胞外基质上黏附功能的影响。方法通过RKIP的RNAi腺病毒载体感染HSC细胞株LX-2,实验分为RKIP的RNAi组(RKIP-RNAi-AD)和阴性对照组(NC-RNAi-GFP-AD)。Western印迹方法确定病毒感染后验证外源RKIP在细胞内表达情况。采用matrigel、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白包被的24孔板模拟肝纤维化病理状态下ECM成分的改变,将腺病毒干预后的LX-2以1.0×105/ml的浓度接种到包被后24孔板上,37℃培养1 h后,甲醛固定,结晶紫染色。200倍纤维镜下观察并计数黏附的细胞数。结果 RKIP的RNAi组较对照组蛋白表达减少(0.29±0.06 vs 0.73±0.14,P<0.05)。与NC-RNAi-GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的低表达促进细胞在matrigel上的黏附(170±25 vs 66±12,P<0.05)。与NC-RNAi-GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的低表达促进细胞在I型胶原上的黏附(200±25 vs 82±13,P<0.05)。与NC-RNAi-GFP-AD对照组相比,RKIP在HSC的低表达促进细胞在纤维连接蛋白上的黏附(276±28 vs 96±17,P<0.05)。结论 SiRNA靶向RKIP可以促进HSC在胶原基质上的粘附。 马俊骥 赵慧 姜慧卿关键词:肝纤维化 肝星状细胞 RAF激酶抑制蛋白 细胞外基质 婴幼儿血清25(OH)D水平、食物过敏与特应性皮炎严重程度的关系研究 被引量:3 2022年 目的探讨婴幼儿血清25-羟维生素D[25(OH)D]水平、IgE介导食物过敏与特应性皮炎(AD)严重程度之间的相互关系。方法纳入77例中重度AD患儿为研究组,40名健康儿童为对照组。比较AD无IgE介导食物过敏与AD合并IgE介导食物过敏患儿的血清25(OH)D水平,并分析血清25(OH)D水平与AD严重程度[AD积分指数评分(SCORAD)]的相关性。结果77例AD患儿中,AD合并IgE介导的食物过敏共19例(24.7%)。与无食物过敏AD患儿相比,AD合并食物过敏患儿的25(OH)D水平较低(P<0.001)。对照组与中度AD组的血清25(OH)D水平无差异(P>0.05);与中度AD组相比,重度AD组的25(OH)D水平较低(P<0.05)。AD患儿血清25(OH)D水平与SCORAD无相关性(P>0.05)。结论AD合并IgE介导食物过敏及重度AD的婴幼儿更易出现血清25(OH)D水平降低情况,但AD的严重程度与血清25(OH)D水平无关。 赵慧 张会丰 魏凤 任延延关键词:维生素D 食物过敏 特应性皮炎 婴幼儿