张海燕
- 作品数:11 被引量:34H指数:4
- 供职机构:西北农林科技大学植物保护学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 家蚕成品卵微粒子病McAb-ELISA检测方法的研究被引量:6
- 2008年
- 用纯化的微孢子虫抗兔多抗包被,做为捕获抗原,加入检测样品,然后用辣根过氧化物酶标记的单克隆抗体作为检测抗原,并对各步实验条件进行优化,建立检测家蚕微孢子虫的双抗体夹心ELISA检测方法。试验结果表明,多抗最适包被浓度为10ng/mL,最适包被条件为4℃过夜,酶标二抗工作浓度为1∶2000,待检样品和酶标二抗的反应时间分别为37℃1.5h和1h,底物37℃显色15min。此方法对纯化孢子的检测量为3.125×105spores/mL,对体外"添毒"蚕卵的检测量为5×106spores/mL。
- 万淼何永强张海燕张凡钱永华鲁兴萌
- 关键词:家蚕微孢子虫单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 小麦过氧化物还原酶基因TaPrx的克隆与功能初步分析被引量:7
- 2009年
- 【目的】克隆TaPrx基因并对其在小麦与条锈菌互作中的功能进行初步分析。【方法】利用PCR方法结合RACE技术在cDNA文库中筛选得到TaPrx基因的全长序列并进行生物信息学分析,然后克隆至pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3)后用IPTG进行诱导表达。通过Real-timeRT-PCR进行表达模式分析。【结果】得到TaPrx基因的全长序列688bp,ORF489bp,编码162个氨基酸残基,分子量17.36kD,等电点5.32,含一个保守的半胱氨酸残基(Cys),不含信号肽及跨膜结构域,亚细胞定位94%的可能性在细胞质。TaPrx融合蛋白分子量38kD,最佳IPTG诱导浓度0.05mmol·L-1,20℃诱导20h可得到最大量的融合蛋白。Real-timeRT-PCR分析表明TaPrx基因在小麦与条锈菌的亲和与非亲和互作中均受诱导表达,分别在接种后24h、18h达到表达高峰。【结论】获得了TaPrx基因特异性的多克隆抗体;TaPrx基因受条锈菌诱导表达,可能参与了小麦与条锈菌互作。但是否参与了小麦受条锈菌侵染后产生的ROS的清除与调节仍需进一步验证。
- 张海燕李国田王晓杰段迎辉徐亮胜郭军马金彪黄丽丽康振生
- 关键词:小麦条锈菌克隆原核表达REAL-TIMERT-PCR
- 家蚕消化道来源蒙氏肠球菌的鉴定被引量:3
- 2006年
- 研究了从家蚕消化道内分离出的4株肠球菌(C1、GC、FD、A20)的生理生化特征和16S rDNA序列,并与肠球菌种特异性探针序列进行了比较。生理生化特征测定结果表明,除A20外,C1、GC和FD与蒙氏肠球菌种的特征基本一致。由16S rDNA序列分析结果可知,分离菌株均与蒙氏肠球菌(Ent.mundtiiAJ301836)有高度同源性,在系统发育树内位于同一分支。分析肠球菌种特异性探针序列,分离菌株的16S rDNA含有与蒙氏肠球菌种特异性探针完全相同的序列。因此认为家蚕消化道内存在蒙氏肠球菌。
- 费晨张海燕钱永华鲁兴萌
- 关键词:RDNA系统发育树
- 一株家蚕肠球菌16SrDNA的研究
- 从健康家蚕消化道内分离到一株对家蚕微孢子虫发芽有抑制作用的肠球菌菌株 Enterococcus sp.。对该菌株进行生理生化、16S rDNA及肠球菌种特异性探针分析。Ent.sp.可发酵山梨醇和阿拉伯糖,不能发酵棉子糖...
- 费晨张海燕钱永华鲁兴萌
- 关键词:系统发育树
- 文献传递
- 一株家蚕肠球菌16SrDNA的研究
- 从健康家蚕消化道内分离到一株对家蚕微孢子虫发芽有抑制作用的肠球菌菌株Enterococcussp..对该菌株进行生理生化、16SrDNA及肠球菌种特异性探针分析.Ent.sp.可发酵山梨醇和阿拉伯糖,不能发酵棉子糖.通过...
- 费晨张海燕钱永华鲁兴萌
- 关键词:家蚕系统发育树生理生化
- 文献传递
- 小麦过氧化物还原酶基因TaPrx的克隆与功能初步分析
- 受生物和非生物胁迫后植物体内的活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量增加,对细胞造成毒害,如 DNA 损伤,蛋白变性及脂类过氧化等,且与植物过敏性坏死反应有关。植物在进化过程中形成了较完善的...
- 张海燕李国田王晓杰段迎辉徐亮胜郭军黄丽丽康振生
- 文献传递
- 蚕种冷库相关聚氨酯和乙二醇对家蚕幼虫的影响
- 2006年
- 聚氨酯和乙二醇可应用于蚕种冷库墙体建造和温度控制。本试验未见聚氨酯对家蚕幼虫的熏蒸毒性。乙二醇连续喂饲家蚕幼虫可导致家蚕的死亡和生长发育不良,但毒性相对较低。两种物质用于蚕种冷库较为安全。
- 费晨张海燕陈灵方徐杰钱永华鲁兴萌
- 关键词:聚氨酯乙二醇蚕种冷库
- 阿维菌素对家蚕毒性的试验被引量:10
- 2006年
- 阿维菌素的安全间隔期较长,不宜在桑园中使用。阿维菌素和依维菌素对家蚕的致死中浓度在10μg/L~0.1μg/L之间,两者对家蚕的毒性没有显著差异,随着蚕龄的增长家蚕抗性的增加不是十分明显,10μg/L~0.1μg/L的阿维菌素连续添食4龄家蚕,导致死亡蚕数增加,并且10μg/L、1μg/L的阿维菌素对入眠眠蚕体重的影响存在显著差异(P<0.05)。
- 张海燕周勤潘美良吴海平钱永华鲁兴萌
- 关键词:阿维菌素依维菌素家蚕安全间隔期毒性
- 家蚕微孢子虫(浙江株)α-微管蛋白基因部分片段的克隆及系统发育分析被引量:8
- 2007年
- 基于微孢子虫分类学地位的争议,通过克隆家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)的α-Tubulin基因,利用BioEditor将核苷酸序列翻译成氨基酸序列,并从NCBI中收集不同物种的α-Tubulin基因,用CLUSTALX(1.81)、Mega2以及在线生物信息学软件CLUSTALW(1.83)分析序列并构建系统发育树。结果显示:家蚕微孢子虫及其它微孢子虫与真菌聚为一类,且微孢子虫以一个独立群与接合菌(zygomycetes)的噬虫霉属(Entomophaga)、耳霉属(Conidiobolus)关系最近,与子囊菌(ascomycetes)、担子菌(basidiomycetes)、壶菌(chytrids)及其它接合菌互为姐妹群。
- 张海燕万淼费晨钱永华鲁兴萌
- 关键词:家蚕微孢子虫系统发育树
- 阿维菌素对家蚕毒性的试验
- 阿维菌素的安全间隔期较长,不宜在桑园中使用。阿维菌素和依维菌素对家蚕的致死中浓度在10μg/L~O.1μg/L之间,两者对家蚕的毒性没有明显差异,随着蚕龄的增长家蚕抗性的增加不是十分明显,10μg/L~0.1μg/L的阿...
- 鲁兴萌张海燕周勤潘美良吴海平钱永华
- 关键词:阿维菌素依维菌素安全间隔期
- 文献传递