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张建新
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
供职机构:
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
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发文基金:
国家自然科学基金
国家科技支撑计划
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相关领域:
农业科学
生物学
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合作作者
朱战波
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
汤炜
黑龙江八一农垦大学生命科学技术...
崔玉东
黑龙江八一农垦大学生命科学技术...
吴志军
黑龙江八一农垦大学生命科学技术...
于立权
黑龙江八一农垦大学生命科学技术...
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B细胞抗原表...
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表位
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大肠埃希菌
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GAPC
机构
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作者
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张建新
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2015
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停乳链球菌GapC_(1-150aa)蛋白单克隆抗体的制备及其线性表位鉴定
被引量:3
2015年
链球菌GapC蛋白是表达于各种链球菌的膜蛋白,具有良好的免疫原性。为研制预防链球菌感染的表位疫苗和研发以单克隆抗体(MAb)为基础的检测试剂盒,本研究利用表达的停乳链球菌GapC蛋白aa1~aa150片段制备了3株MAbs,并利用噬菌体展示技术对这3株MAbs的抗原表位进行分析,获得一个线性表位1377HDILDG142。该研究不仅有助于了解链球菌GapC的免疫保护作用机制,也有助于进一步研究表位疫苗和建立检测方法。
张丽萌
周雪
魏玉华
樊自尧
汤炜
代建
杨轩
张建新
杨汐静
刘道龙
王成
王健南
于永忠
吴志军
于立权
孙虎男
马金柱
宋佰芬
朱战波
崔玉东
关键词:
停乳链球菌
GAPC
单克隆抗体
B细胞抗原表位
应用RED同源重组技术构建表面展示链球菌GapC1的大肠埃希菌
被引量:1
2015年
目的应用RED同源重组技术构建表面展示链球菌Gap C1-150 aa(Gap C1)的大肠埃希菌,为进一步构建大肠埃希菌表面展示重组菌株奠定基础。方法根据Gen Bank中登录的gap C基因序列(GI:30348860)设计引物,以质粒p KD3、p QE30/lpp-omp A-gap C为模板进行PCR扩增、融合,获得融合片段,转化入含p KD46质粒的大肠埃希菌HB101中,利用p KD46编码的RED系统将融合片段重组入基因组中,经氨苄西林(Amp)和氯霉素(Cm)抗性筛选,获得去除p KD46质粒的重组菌(HB101LOG)。对重组菌株进行PCR、Western blot、流式细胞术、荧光显微镜及生物学特性检测。结果 PCR结果显示,重组菌株构建正确;重组大肠埃希菌HB101LOG在菌体表面表达了外源蛋白Gap C1-150 aa;激光共聚焦显微镜观察到HB101LOG可见明显的绿色荧光,HB101未见绿色荧光;重组菌株HB101LOG和HB101的生长曲线符合大肠埃希菌的生长规律。结论应用RED系统成功构建了能展示链球菌Gap C1-150 aa的大肠埃希菌重组菌株。
杨汐静
张建新
陈晓亭
汤炜
于思淼
刘伟
姚笛
吴志军
于立权
朱战波
崔玉东
关键词:
链球菌
大肠埃希菌
RED同源重组
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