付加芳
- 作品数：33 被引量：12H指数：2
- 供职机构：山东省医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程文化科学更多>>
- 转录组分析棒状链霉菌F613-1高产克拉维酸的分子基础被引量：2
- 2017年
- 旨在探究S.clavuligerus工业菌株高产克拉维酸(CA)的分子基础。采用转录组高通量测序,对比标准菌株和高产CA的工业菌株F613-1之间的基因转录水平差异,结合菌株表型差异进行综合分析。结果表型比较显示,F613-1在固体培养基中生长速度、气生菌丝形态、孢子形成等方面与标准菌株存在差异。液体摇瓶培养中,菌体生长速度无明显变化,但F613-1的糖消耗量显著降低,同时CA产量比ATCC27064提高约11.7倍。转录组分析显示,F613-1中CA基因簇及其途径特异性调控基因的表达量显著升高,其副产物全霉素基因簇的表达量显著下降;CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛代谢相关基因的转录水平发生显著变化,精氨酸合成代谢基因上调,而3-磷酸甘油醛分解代谢基因下调;ABC转运系统中80多个基因的转录水平也发生明显变化,其中42个显著上调,38个显著下调。工业生产菌株高产克拉维酸的主要原因是CA基因簇及其调控基因表达量的升高、相关副产物基因簇的沉默及CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛的积累。
- 覃荣活付加芳宗工理王志宇曹广祥
- 关键词：棒状链霉菌转录组克拉维酸
- 嗜酸乳杆菌NC55的安全性评价
- 2023年
- 嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)广泛应用于发酵饮品及食品领域。该实验室从发酵食品中分离获得一株嗜酸乳杆菌,将其命名为嗜酸乳杆菌NC55,该研究通过抗生素敏感实验、有害代谢产物实验及动物实验对NC55菌株进行安全性评价。结果显示,NC55菌株对多数抗生素敏感,未携带质粒,不存在耐药性通过质粒传递的可能。NC55菌株无氨基脱羧酶活性,菌株表现为不溶血。动物实验过程中小鼠生命活动正常,解剖发现主要脏器无病变,未发现细菌移位现象;致畸试验显示小鼠胚胎发育正常。综上,嗜酸乳杆菌NC55在抗生素敏感实验、质粒检测、溶血实验及动物实验中均表现出良好的安全性,可被认为是应用于人和动物的潜在有益菌株。
- 林赓马欣谢雨欣王杰谢欣茹付加芳付加芳
- 关键词：嗜酸乳杆菌安全性评价溶血实验动物实验
- 真核细胞表达人骨形态发生蛋白-7的研究进展被引量：1
- 2017年
- 针对目前生物系统表达的人骨形态发生蛋白-7(h BMP-7)产量不能满足市场需求量、活性低、成本高的现状,对目前h BMP-7在酵母表达系统、昆虫、哺乳动物组织细胞的表达状况进行综述,分析其各自的优势和局限性,并对h BMP-7真核系统表达进行展望,指出h BMP-7是一种有重要价值的生长因子,具有强烈的骨诱导活性,临床上可用于治疗骨折、骨不愈合,未来的研究重点应是h BMP-7表达量的问题。
- 薛俊英付加芳王世立
- 关键词：毕赤酵母哺乳动物细胞
- 寡肽信号分子对棒状链霉菌产生克拉维酸的影响
- 克拉维酸(clavulanic acid,CA)是一种氧青霉烷类广谱β-内酰胺酶抑制剂,临床上用于治疗β-内酰胺类抗生素耐药菌感染。CA由棒状链霉菌发酵产生,因此CA产量的提高主要是通过发酵工艺的改进和菌株育种实现。研究...
- 宋道平曹广祥付加芳王世立
- 双组份信号转导系统MprAB和TrcRS协同调控结核分枝杆菌rv1057基因表达的分子机制被引量：1
- 2017年
- 目的探讨结核分枝杆菌rv1057基因受到双组份信号转导系统MprAB和TrcRS协同调控的作用机制。方法采用凝胶阻滞迁移试验分析MprA和TrcR在体外与目标基因启动子片段的特异性结合能力；荧光定量PCR检测目标基因的转录水平，以H37RvSDS处理组的表达值为1个单位进行倍数变化分析；蛋白质免疫印迹法检测目标基因的表达；通过构建lacZ报告基因检测rv1057启动子不同区域启动转录的能力。统计学处理采用t检验。结果MprA结合trcR启动子；无SDS条件下D981、H37Rv菌株的trcR相对表达量分别为H37RvSDS处理组的1．7和2．5倍，差异有统计学意义（t=18．54，P〈0．05）；有SDS条件下，D981、H37Rv菌株的trcR相对表达量分别为H37RvSDS处理组的1．0和2．1倍，D981菌株的trcR转录水平显著高于H37Rv菌株，差异有统计学意义（t=15．86，P〈0．05）。H37Rv菌株培养过程中加入SDS后trcR的相对表达量变化倍数显著下降，差异有统计学意义（￡一16．99，P〈0．05）；MprA和TrcR都可以结合rv1057启动子并调控其表达；MprA激活rv1057的转录，而TrcR阻遏rv1057的转录。结论MprAB和TrcRS协同调控rv1057基因的表达，环境存在SDS时MprA被激活，阻碍trcR表达并激活r口1057的转录，而无sDs时TrcR阻遏rv1057的转录。
- 宗工理张佩佩付加芳马军霞钟传青曹广祥
- 关键词：分枝杆菌结核
- 结核分枝杆菌Rv1057基因对巨噬细胞感染早期细胞因子表达的影响分析被引量：1
- 2017年
- Rv1057是结核分枝杆菌中唯一的7-折叠片β-螺旋蛋白,其生物学功能尚不清楚。为探讨Rv1057基因在结核分枝杆菌感染初期对巨噬细胞免疫应答的影响,利用Rv1057基因缺失菌株D1057和野生型H37Rv菌株感染巨噬细胞,检测结核分枝杆菌在巨噬细胞内的增殖速度,分析巨噬细胞在感染初期的细胞因子表达量变化。研究结果表明:D1057菌株在巨噬细胞内的活菌数量和增殖速度都显著低于H37Rv,被D1057感染的巨噬细胞中IL-1β、IL-10、TNF-α和IFN-γ表达量显著降低,但IL-8大量表达且无显著差异。上述研究结果证实,缺失Rv1057会降低结核分枝杆菌刺激巨噬细胞产生某些细胞因子的能力,明确了Rv1057基因参与结核分枝杆菌与巨噬细胞之间的免疫应答,为进一步解析Rv1057基因的生物学功能、结核分枝杆菌的致病机制奠定了基础。
- 付加芳张佩佩古苑欣宗工理曹广祥
- 关键词：结核分枝杆菌巨噬细胞存活率细胞因子
- 人碱性磷酸酶糖蛋白的癌细胞高效表达系统及其应用
- 本发明公开了一种人骨肉瘤细胞系MG‑63在外源表达人碱性磷酸酶糖蛋白中的应用，以及rhALP的外源表达方法，包括如下步骤：(1)构建含有rhALP的重组质粒；(2)将重组质粒整合至人骨肉瘤MG‑63细胞内，获得能够表达r...
- 曹广祥付加芳马军霞王志宇宗工理王世立
- 降解苯丙氨酸的工程益生菌构建及其喂养苯丙酮尿症小鼠的效果分析
- 2024年
- 苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)是一种常染色体隐性遗传病,低蛋白饮食是目前临床治疗的主要方法,而采用工程益生菌治疗尚处于研发阶段。为了探究工程益生菌对PKU的治疗效果,该研究基于大肠埃希菌Nissle 1917(EcN)菌株,构建了一株表达苯丙氨酸裂解酶的工程益生菌EcN-PAL。通过λ-Red同源重组系统在EcN中导入经优化设计的苯丙氨酸裂解酶基因,并通过体外降解实验和小鼠喂养实验验证其功能性。实验结果表明,工程益生菌EcN-PAL成功表达苯丙氨酸裂解酶,并且可降解苯丙氨酸和有效降低PKU小鼠的血液苯丙氨酸浓度。该研究成功构建的工程益生菌EcN-PAL对苯丙氨酸有良好的降解效果,动物实验证实可有效治疗PKU小鼠,为用于PKU患者的益生菌治疗奠定了基础。
- 马欣付加芳付加芳张佩佩曹广祥
- 关键词：苯丙酮尿症
- 分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的研究进展
- 2018年
- Ⅶ型分泌系统是近年来新发现的一种新型、特殊的分泌系统,最先在结核分枝杆菌中发现.Ⅶ型分泌系统负责分枝杆菌的毒力蛋白分泌,介导分枝杆菌与宿主间发生相互作用,并参与分枝杆菌体内锌铁平衡等,在分枝杆菌的生长代谢及致病过程中发挥重要作用.本文从Ⅶ型分泌系统的基因组成与类型、分泌底物、转运机制及其与菌株致病性的关系等方面,对分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的研究进展进行简要综述,为发展用于疾病诊断、治疗和预防的新策略提供依据.
- 付加芳王志宇张佩佩宗工理曹广祥
- 关键词：分枝杆菌基因结构分泌机制
- 含有不同信号肽重组hBMP-7表达载体的构建
- 人骨形态发生蛋白-7(Human bone morphogenetic protein-7,hBMP-7)又名成骨蛋白-1(Osteogenic Protein,OP-1),是一种重要的成骨生长因子,其在肾脏的形态发生中...
- 薛俊英付加芳李俊玲王世立
- 关键词：HBMP-7U2-OS信号肽转染
