陈涵斌 作品数:9 被引量:24 H指数:3 供职机构: 温州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 温州市科技局资助项目 浙江省公益性技术应用研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
miR-7-5p抑制胰腺癌细胞放疗后加速再增殖的体外实验研究 被引量:3 2020年 目的研究放疗后濒死胰腺癌细胞(PANC-1)释放的微小RNA-7-5p(miR-7-5p)对存活PANC-1加速再增殖效应的相关机制。方法通过慢病毒感染,建立荧光素酶标记的PANC-1-LUC胰腺癌细胞放疗后加速再增殖模型。通过RT-qPCR检测miRNA-7-5p的表达水平,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,双荧光素酶法验证miR-7-5p靶基因,Western blotting检测γH2A.X与DDIT4蛋白的表达情况。结果miR-7-5p在受辐照PANC-1(10 Gy)濒死细胞上清中表达下调,受辐照PANC-1细胞与存活PANC-1-LUC细胞共培养,可促进放疗后存活PANC-1-LUC细胞加速再增殖及其DNA损伤修复,而上调miR-7-5p可抑制放疗后胰腺癌细胞PANC-1-LUC再增殖。进一步研究表明,miR-7-5p在胰腺癌细胞中通过靶向下调DDIT4通路促进凋亡信号。结论受辐照胰腺癌细胞可通过下调miR-7-5p促进DDIT4表达,从而抑制细胞凋亡及调控细胞周期再分布来加速再增殖,表明提高miR-7-5p的水平能够提高胰腺癌细胞的放疗敏感性,这将为改善胰腺癌放疗抵抗提供了一种新的思路和方法。 叶志强 郭贵龙 陈涵斌 吕奇原 谷甸娜关键词:胰腺癌 体外实验 邻苯二甲酸酯染毒哺乳期母鼠对雄性仔鼠睾丸Leydig细胞形态及功能的影响 被引量:5 2015年 目的:观察邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对哺乳期雄性仔鼠睾丸子Leydig细胞(PLC)形态和功能的影响及作用机制。方法:SD孕鼠20只,随机均分为4组(n=5):正常对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组。仔鼠出生第1天起分别以0、10、100、750 mg/(kg·d)DEHP灌胃染毒母鼠,直到仔鼠出生后21 d。用化学发光法检测雄性仔鼠血清睾酮(T)水平;测量体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD);光镜及电镜下观察睾丸Leydig细胞形态结构;免疫组化方法检测睾丸类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)表达;Real-time PCR法检测睾丸胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表达。结果:与正常组比较,低剂量组T无明显变化,中、高剂量组血清T水平明显降低(P<0.01)。低剂量组睾丸重量增加(P<0.05),高剂量组睾丸重量、仔鼠体重明显下降(P<0.01);中、高剂量组AGD明显缩短(P<0.01)。低剂量组睾丸Leydig细胞明显增生,呈簇状分布;中、高剂量组睾丸Leydig细胞灶区轻度增生,高剂量组部分生精小管生精细胞层次减少、生精细胞凋亡并脱落。电镜观察各给药组Leydig细胞胞浆脂质颗粒减少,线粒体、内质网减少。低剂量组IGF-ⅠmRNA表达增高(P<0.05);中、高剂量组睾丸St AR蛋白表达降低(P<0.05)。结论:哺乳期染毒DEHP可干扰仔鼠PLC的睾酮合成,St AR蛋白的降低和Leydig细胞的损伤可能是其机制。 陈涵斌 马骏 李慧敏 牛三强 陈显武 陈国荣 陈三妹 王蓉蓉关键词:LEYDIG细胞 仔鼠 SOAT1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1 2021年 目的:观察甾醇O-酰基转移酶1(SOAT1)在肝细胞癌(HCC)组织及癌旁组织中的表达,探索其与患者预后及临床病理特征之间的相关性。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库收集HCC数据集,下载SOAT1 mRNA表达谱及预后资料,比较SOAT1 mRNA在50例正常肝组织与374例HCC组织中的表达,分析表达量与患者预后相关性。收集53例HCC患者石蜡组织标本,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁组织中SOAT1的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征之间的相关性。结果:TCGA数据库数据分析显示,与癌旁正常组织比较,SOAT1在HCC中表达显著升高(P<0.01)。预后生存分析发现SOAT1高表达患者的5年生存率较低(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与癌旁组织相比,HCC组织中SOAT1蛋白表达量显著升高(P<0.05)。癌组织中SOAT1蛋白表达量与肿瘤临床分期及微血管癌栓形成相关(P<0.05)。结论:SOAT1在HCC组织中表达增高,并与HCC癌患者的临床病理特征密切相关,其表达与肿瘤恶性程度高度相关。 陈瑶 杨训俊 陈涵斌 陈国荣关键词:肝细胞癌 肿瘤转移 预后分析 肿瘤相关成纤维细胞来源外泌体ciRS-7经miR-7/IGF1R轴促进胰腺癌细胞糖酵解 2021年 目的:探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)来源外泌体ciRS-7对胰腺癌细胞糖酵解代谢的影响。方法:采用超速离心法提取CAFs外泌体,并通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外泌体中ciRS-7的表达及胰腺癌细胞糖酵解关键酶mRNA的表达;构建含ciRS-7野生及突变序列的荧光素酶检测报告质粒,在胰腺癌细胞中验证ciRS-7与miR-7的关系;蛋白质印迹(Western blot)法检测IGF1R/AKT蛋白表达。结果:ciRS-7在胰腺癌相关成纤维细胞的外泌体中表达上调(P<0.05);CAFs释放的外泌体促进胰腺癌细胞糖酵解和增殖(P<0.05);敲降胰腺癌相关成纤维细胞ciRS-7的表达,其外泌体可抑制胰腺癌细胞糖酵解相关基因的表达(P<0.05);ciRS-7在胰腺癌细胞中经miR-7/IGF1R/AKT通路促进癌细胞糖酵解(P<0.05)。结论:ciRS-7在胰腺癌相关成纤维细胞的外泌体中高表达,下调ciRS-7具有抑制胰腺癌细胞糖酵解的作用。 谷甸娜 陈涵斌 钱方璟 陈扬 叶志强关键词:肿瘤相关成纤维细胞 外泌体 胰腺癌 糖酵解 康艾注射液对大鼠巨噬细胞酶活性的影响 被引量:7 2014年 目的:研究康艾注射液对大鼠巨噬细胞内酶活性的影响及免疫器官胸腺、脾脏形态变化。方法:雄性SD大鼠24只,随机均分为实验组与对照组(n=12)。实验组按5 ml/kg·d腹腔注射康艾注射液,对照组注射等容积生理盐水,持续注射30 d。股动脉放血处死大鼠,分别获取大鼠肺泡巨噬细胞(AM)和腹腔巨噬细胞(PM),用二辛可酸法(BCA法)测超微蛋白含量,用生化方法测定AM和PM内乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。光镜下观察脾脏和胸腺的形态学改变。结果:实验组大鼠AM和PM内LDH、iNOS和GSH-Px酶活性均高于对照组(均P<0.05);ACP、SOD和SDH活性均高于对照组(均P<0.05)。光镜下,实验组脾脏动脉周围淋巴鞘增厚,淋巴细胞层次增加,淋巴小结体积增大,中央可见生发中心扩大;两组胸腺在形态学上未见明显差异。结论:康艾注射液可激活巨噬细胞,具有增强机体免疫力的作用。 陈涵斌 应丽丽 赵灵灵 项一轩 林刻智 王卫关键词:巨噬细胞 酶活性 酶联免疫吸附试验 脾脏 胸腺 泛素相关基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义 2023年 目的探讨泛素相关基因(URGs)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及临床意义。方法筛选癌症基因组图谱(TCGA)数据库中HCC患者差异表达的URGs,以差异表达最明显的泛素结合酶(UBE)2C为对象,采用qRT-PCR法和免疫组化法验证UBE2C的表达及与HCC患者临床病理特征、预后的关系;构建与URGs相关HCC临床预后模型,并绘制ROC曲线分析模型预测患者1、2、3年生存期的效能。结果qRT-PCR和免疫组化结果均证实,相比癌旁组织,UBE2C mRNA和蛋白在HCC组织中均显著高表达(均P<0.05);生存分析结果显示,UBE2C高表达组累计生存率显著低于UBE2C低表达组(P<0.01)。TCGA数据显示UBE2C高表达与HCC患者年龄及肿瘤分级、分期、大小均显著相关(均P<0.01),UBE2C高表达是HCC患者较差预后的独立影响因素(P<0.01)。临床数据发现UBE2C高表达与肿瘤分级、分期、血清甲胎蛋白(AFP)及HBsAg相关(均P<0.05);TCGA中发现11个URGs与HCC不良预后相关。构建的预后模型预测患者1、2和3年生存期的AUC分别为0.762、0.708和0.683。结论UBE2C在HCC中高表达,且与HCC分级、分期、不良预后相关;利用URGs构建预测HCC的临床预后模型可有效预测患者术后生存期。 何莉 曹璐璐 廖广霖 杜圣蔚 陈见昂 陈国荣 陈涵斌关键词:肝细胞肝癌 临床病理特征 棉酚对糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病纤维化的影响 被引量:1 2017年 目的:研究棉酚对糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)纤维化的影响及其可能机制。方法:雄性SD大鼠30只,随机均分成3组:正常对照(NC)组、2型糖尿病(T2DM)组、棉酚治疗(T2DMG)组。采用高脂饮食及低剂量链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病大鼠模型,T2DMG组模型构建后用棉酚灌胃(15 mg·kg^(-1)·d^(-1) 灌胃4周,再按每周15 mg·kg^(-1)灌胃8周)。光镜及电镜下观察肝组织形态学改变;Masson染色观察肝组织纤维化病变;免疫组织化学检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、糖皮质激素受体(GR)、核转录因子-κB(NF-κB)及转化生长因子β1(TGFβ1)蛋白的表达;RT-PCR法检测肝组织11β-HSD1、GR、NF-κB及TGFβ1 m RNA表达。结果:与NC组比较,T2DM组肝组织明显纤维化,α-SMA、11β-HSD1、GR、NF-κB、TGFβ1蛋白表达明显增多(P=0.001、0.004、0.001、0.001、0.002),GR、TGFβ1 m RNA表达明显增加(P=0.01、0.001);与T2DM组比较,T2DMG组肝纤维化病变明显减轻,肝组织α-SMA、11β-HSD1、GR、NF-κB、TGFβ1蛋白表达明显减少(P=0.009、0.031、0.002、0.009、0.027),11β-HSD1、GR、TGFβ1 m RNA表达明显减少(P=0.003、0.038、0.014)。结论:棉酚可以有效改善NAFLD相关肝纤维化病变,其机制可能是抑制肝脏11β-HSD1、GR、NF-κB、TGFβ1的表达。 李秧秧 陈涵斌 徐菲菲 万丽 陈国荣 陈垒 陈三妹 王蓉蓉关键词:糖尿病 棉酚 糖皮质激素受体 核转录因子-ΚB 转化生长因子Β1 代谢综合征及非酒精性脂肪肝与乳腺癌相关性的临床研究 背景: 作为全球恶性肿瘤发病率之首的乳腺癌,在全球范围内每年造成52.2万人死亡,其中发达国家的发病率较发展中国家发病率更高,乳腺癌已成为当今中国最常见的肿瘤,同时它也是城市女性最高发的恶性肿瘤.肥胖作为乳腺癌高危因素... 陈涵斌关键词:乳腺癌 非酒精性脂肪肝 代谢综合征 分子表型 p40、TTF-I、p63、CK5/6在肺腺癌和肺鳞癌中的表达及其意义 被引量:7 2014年 目的:探讨p40、TTF-1、p63和CK5/6在肺腺癌和肺鳞癌中的表达及其意义。方法:应用组织芯片技术结合免疫组织化学法,检测p40、TTF-1、p63和CK5/6在108例肺腺癌标本、66例肺鳞癌病理标本中的表达,分析其差异及临床病理意义。结果:①p40、p63、CK5/6、TTF-1在肺鳞癌中的阳性表达率分别为93.9%(62/66)、86.4%(57/66)、89.4%(59/66)、6.1%(4/62)。②p40、p63、CK5/6、TTF-1在肺腺癌中的阳性表达率分别为3.7(4/108)、22.2%(24/108)、24.1%(26/108)、95.4%(103/108)。③p40、p63、CK5/6在肺鳞癌中的特异度分别是96.3%、77.8%、75.9%,p40特异度高于p63、CK5/6(P<0.05)。④p40、p63、TTF-1与性别、病理类型、肿块大小、吸烟史有关(均P<0.05),与年龄、分化程度、淋巴结转移及TNM分期无关(均P>0.05)。⑤在低分化肺鳞癌中p40的阳性表达率(为89.3%)较p63(为78.6%)、CK5/6(为82.1%)高(均P<0.05)。结论:p40、TTF-1、p63和CK5/6在肺癌的诊断及鉴别中具有重要价值,p40对肺鳞癌的鉴别明显优于p63和CK5/6,p40在低分化肺鳞癌中具有较高的阳性表达率。性别、病理类型、肿块大小、吸烟史与p40、TTF-1、p63、CK5/6的表达有相关性。 焦立卓 陈涵斌 赵灵灵 王玲 林中民 陈霖 陈国荣 蔡国平关键词:P40 TTF-1 P63 CK5