刘刚 作品数:203 被引量:691 H指数:13 供职机构: 第二军医大学长征医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市卫生局科技发展基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 化学工程 环境科学与工程 更多>>
MicroRNA-27a调控在椎间盘髓核细胞凋亡中的作用机制研究 背景 椎间盘退变性疾病(Intervertebral degenerative disc disease,IDDD)指由椎间盘退变引起的以颈肩腰腿痛为主要表现的一系列临床综合征,为临床上的常见病和多发病,正在给越来越多的... 刘刚关键词:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 文献传递 羟乙基淀粉对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量:7 2008年 目的观察羟乙基淀粉(HES130/0.4,万汶)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法46只SD大鼠随机分为缺血-再灌注组(IR组,n=12)、白蛋白-缺血-再灌注组(A-IR组,n=12)、羟乙基淀粉-缺血-再灌注组(V-IR组,n=12)和假手术组(S组,n=10)。IR、A-IR和V-IR组分别在缺血25 min时静脉持续泵入生理盐水、5%白蛋白和羟乙基淀粉(HES130/0.4),于缺血前、缺血30min以及再灌注60、120、180 min时,测定HR、MAP、左室收缩峰压(LVSP)、左室内压变化最大速率(±dp/dtmax)以评价心肌功能。再灌注180 min处死大鼠行TTC染色法测定心肌梗死面积及髓过氧化物酶(MPO)活性并观察心肌组织病理学改变。结果缺血30 min、再灌注60、120和180 min,V-IR组HR、MAP、LVSP和±dp/dtmax的绝对值均较IR组和A-IR组升高(P<0.05)。V-IR组心肌梗死面积明显比IR组和A-IR组减小(P<0.05)。再灌注后,IR、A-IR和V-IR组MPO活性显著高于S组(P<0.05),但V-IR组MPO活性较IR组和A-IR组有所降低(P<0.05),IR组和A-IR组MPO活性比较差异无统计学意义。心肌病理学切片示V-IR组病理学变化较IR组和A-IR组减轻。结论羟乙基淀粉对缺血-再灌注损伤的心肌组织具有保护作用,能促进心功能恢复,其机制可能与羟乙基淀粉抑制缺血-再灌注时中性粒细胞的激活和浸润有关。 孙海静 石学银 徐海涛 王亚华 朱秋峰 刘刚关键词:羟乙基淀粉 再灌注损伤 心肌保护 中性粒细胞 高GC含量DNA模板的PCR扩增 被引量:6 2013年 目的:探索高GC含量DNA的PCR扩增条件,为扩增达托霉素生物合成基因簇及拼接奠定基础。方法:在PCR扩增体系中,使用高保真的聚合酶及添加不同浓度的DMSO、7-deaza-dGTP等增强剂,并选择合适的PCR循环程序,优化富含GC的DNA的PCR扩增条件。结果:向反应体系中额外添加1%~4%的DMSO可以显著提高富含GC的DNA的PCR扩增产物量,但会降低其特异性;7-deaza-dGTP可以提高扩增产物的特异性及保真度,但产量会有所下降。应用touch down PCR并在体系中添加7-deaza-dGTP能够提高扩增产物的特异性和产率,增加扩增的保真度。结论:应用优化的PCR扩增条件将所有达托霉素生物合成基因簇分段扩增出来,并可扩增出长达6 kb的片段,且序列完全正确,可以进行后续拼接。 邢玉华 戴素琴 刘体颜 王微 谭俊杰 曲国龙 刘刚 陈惠鹏关键词:PCR 多肽研究XX:丙型肝炎病毒(HCV)合成多肽的抗原性及线性抗体谱 被引量:1 1996年 依据蛋白质的亲水性、可亲性、柔韧性、抗原性、电荷分布及HPLC滞留系数等六种性质,使用“Goldkey”软件系统给出了HCV-BK各蛋白抗原决定簇预测曲线,共设计、合成15个多肽片段:P1(475~495),P3(449~468),P4(658~663),P5(645~663),P6(484~489),P7(475~489),P15(655~662),P16(230~237),P17(225~237),P18(1220~1240),P19(1694~1735),P24(1230~1240),P25(1482~1493),P26(384~389)和P27(2355~2389)。发现NS1区%和NS4区P19有很强的抗原性。用其检测PT-HC,阳性率分别为60%和63% 刘刚 梁争论 蔡孟深 庄辉 郭建平 陶其敏关键词:丙型肝炎病毒 合成多肽 抗原性 抗原决定簇 重组人proEMAP Ⅱ/p43蛋白N端和C端结构域的构建及活性鉴定 2010年 目的构建表达重组人proEMAPⅡ蛋白N端(p43N)及C端(p43C)结构域,并进行活性鉴定。方法分别在大肠杆菌中表达p43N及p43C蛋白,并纯化获得目的蛋白;利用血管内皮细胞管腔形成实验及细胞迁移实验进行活性鉴定,并比较等摩尔浓度下,p43蛋白、p43N、p43C及p43N+p43C的活性差异。结果 p43N及p43C均具有抑制内皮细胞管腔形成和迁移的活性,在等摩尔浓度条件下,p43蛋白的生物活性高于p43N和p43C,p43N活性最弱,但p43N和p43C共同作用时,抑制活性高于单独作用。结论获得具有生物活性的p43N及p43C蛋白,为进一步确定p43N作用机制及其与p43C相互关系奠定了基础。 王慧敏 邹亮 邢玉华 董桂福 刘刚 张部昌 陈惠鹏关键词:血管内皮细胞 管腔形成 细胞迁移 活性鉴定 重组人proEMAPⅡ/p43体外抑制新生血管生成活性方法的建立 被引量:3 2010年 目的建立proEMAPⅡ/p43蛋白体外检测抑制新生血管生成活性的方法。方法利用内皮细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验等体外检测血管生成的模型,研究p43蛋白抑制血管生成的活性。结果 p43蛋白能明显抑制内皮细胞迁移和管腔形成,但对内皮细胞增殖和细胞周期没有明显的量效关系。结论最终选用细胞迁移实验和管腔形成实验作为主要活性检测方法,细胞迁移实验作为p43蛋白活性的定量检测方法,迁移抑制率作为活性高低的评价标准,管腔形成实验用于p43蛋白活性的定性研究。 邢玉华 刘大涛 刘刚 邹亮 胡立德 付学奇 陈惠鹏关键词:新生血管生成 细胞增殖 细胞迁移 管腔形成 HPO结构与受体结合功能关系的初步研究 被引量:1 2003年 肝细胞生成素(HPO)是一种新型细胞因子,在肝再生过程中具有重要的调控作用,研究发现在肝源细胞表面有其特异性受体。为了研究HPO结构与其受体结合功能的关系,构建并表达了HPO及其系列缺失体,利用流式细胞术检测了HPO及其系列缺失体与受体的结合能力。结果表明,在HPO的序列中可能有多个受体结合功能区,其N端的前10位氨基酸残基和C端的第11-20位氨基酸残基对于其受体结合能力是必需的,而C端前10位氨基酸残基对HPO与受体的结合有一定的抑制作用。此外HPO结构的完整性对于其受体结合功能也是必需的。 刘刚 王清明 陈吉中 范国才 陈惠鹏关键词:肝细胞生成素 流式细胞术 环状胎盘一例 1998年 患者28岁。因足月妊娠40周,于1996年12月11日入本院产科。孕2产1。即往人工流产1次。此次妊娠经过顺利。孕期无阴道流血,门诊于妊娠28周、37周、40周分别行B超检查,示胎盘附着于子宫侧壁、子宫前壁、子宫前侧壁。妊娠40周+3自然临产,顺娩一... 吕滨江 刘刚关键词:胎盘 环状胎盘 超深低温和复苏对犬脑的影响 被引量:2 1999年 目的:研究超深低温对犬脑组织缺血的保护作用。方法:建立实验犬闭胸式体外循环,体内体外结合降温,并以海脉素置换行控制性放血,至红细胞比容降至5% 左右。中心体温7~10℃维持低流量体外循环90 m in。复温过程中回输自体血并予复苏。结果:7 只犬中1 只因技术因素死于术中,其余6 只复苏后神经功能均恢复,但在2~4 h 后均死于肺功能不全。病理检查示:脑、肝脏、肾脏正常;心脏轻度缺血性改变;肺水肿、肺泡出血明显。结论:超深低温下犬脑、肝、肾可耐受缺血90 m in 而无明确异常,但在复苏后维持肺功能困难。 杨朋范 江基尧 刘刚 石学银 金焰 林兆奋 卢洪流 蔡如珏 袁国梁 朱诚关键词:超深低温 脑缺血 环境内分泌干扰物二噁英的细胞毒性及锌的保护作用 探讨2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)的细胞毒性作用及其机制,并初步探讨锌对TCDD所致细胞毒性作用的保护效应,为进一步探索临床防治措施提供理论基础。分别以不同浓度的TCDD和ZnCl2染毒HepG2细胞,细胞... 刘刚 卢春凤 孙岩松 彭双清关键词:锌 氧化应激 细胞凋亡 文献传递