骆方军
- 作品数：13 被引量：22H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
- 发文基金：浙江省公益性技术应用研究计划项目浙江省自然科学基金更多>>
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- 降钙素原检测对儿童细菌性感染的诊断价值被引量：6
- 2014年
- 目的 使用ROC曲线评价血清降钙素原定量（PCT-Q）检测对小儿细菌性感染的鉴别作用.方法 在应用抗生素前采集＜13周岁患儿125例的外周血,定量检测降钙素原和血培养、呼吸道病毒抗体IgG和IgM、肺炎支原体抗体IgM,分成非细菌感染组、一般感染组和重症感染组.以SPSS 19.5软件绘制ROC曲线,确定诊断界点.结果 以μg/L为单位,各组四分位数值M（P25～P75）分别是：非细菌性感染组0.158（0.125 ～0.314）、一般感染组0.894 （0.358～2.550）、重症感染组10.432（5.796～16.001）.曲线下面积0.919,最佳临界点为0.357 μg/L.该点灵敏度0.851,特异度0.800.结论 PCT-Q临界值的确定有利于小儿细菌感染早期诊断和鉴别诊断,促进抗生素的合理使用.
- 骆华毛小勇骆方军
- 关键词：降钙素原ROC曲线儿童
- TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎IL-2Rá mRNA检测的应用价值
- 目的利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体a(IL-2Ra)mRNA的表达水平,并进行痰病的活动性相关分析．方法根据GenBan...
- 骆方军吕建新
- 关键词：实时荧光定量逆转录聚合酶链反应脊柱炎强直性
- 文献传递
- 重症急性胰腺炎小鼠IL-37的动态变化及其意义研究被引量：6
- 2014年
- [目的]探讨IL-37在重症急性胰腺炎小鼠模型中的动态变化及意义。[方法]采用牛磺胆酸钠注射诱导小鼠重症急性胰腺炎,再用乌司他丁(UTI)给予治疗,分别于6h、12h、24h时处死小鼠,留取血清和胰腺组织。ELISA法检测各组小鼠血清中TNF-α、IL-6、TGF-β1和IL-37表达水平,利用Western blot和Real-Time PCR方法检测小鼠胰腺组织IL-37蛋白及IL-37 mRNA表达水平。[结果]重症急性胰腺炎组(SAP组)小鼠血清细胞因子TNF-α和IL-6水平均随着时间延长而显著增加(P<0.01);TGF-β1和IL-37的表达水平在12h后明显降低(P<0.01)。胰腺组织中IL-37蛋白及IL-37 mRNA表达也在12h后显著降低(P<0.01)。而经UTI治疗后,小鼠血清TNF-α和IL-6水平均随时间延长而降低,而TGF-β1和IL-37的表达水平则随时间延长而增高,并且胰腺组织中IL-37蛋白和IL-37 mRNA的表达水平也相应增高(P<0.01)。[结论]SAP小鼠中IL-37可能作为抑炎性细胞因子参与机体的病理变化。
- 姚洪锋郭瑜佳骆方军董学君
- 关键词：重症急性胰腺炎炎症
- 浙江省丽水市强直性脊柱炎患者外周血CD_4^+T淋巴细胞和CD_8^+T淋巴细胞程序性死亡因子1的表达及意义研究被引量：4
- 2016年
- 目的检测浙江省丽水市强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD_4^+T淋巴细胞、CD_8^+T淋巴细胞程序性死亡因子1(PD-1)阳性率,分析其与疾病活动性临床指标的关系,初步探讨其在AS发生发展中的作用。方法收集2013年12月—2014年4月浙江省丽水市中心医院收治的AS患者35例,根据Bath强直性脊柱炎活动指数(BASDAI)分为活动组(BASDAI>4)21例和稳定组(BASDAI≤4)14例,另选取同时期本院体检健康者20例为对照组。应用流式细胞术检测外周血CD_4^+T淋巴细胞、CD_8^+T淋巴细胞PD-1阳性率,分析AS患者外周血CD_4^+T淋巴细胞、CD_8^+T淋巴细胞PD-1阳性率与疾病活动性临床指标的相关性。结果活动组CD_4^+T淋巴细胞PD-1阳性率高于对照组和稳定组(P<0.05);稳定组和活动组CD_8^+T淋巴细胞PD-1阳性率高于对照组(P<0.05)。AS患者外周血CD_4^+T淋巴细胞PD-1阳性率与CD_4^+T淋巴细胞百分比、CD_4^+/CD_8^+呈负相关(P<0.05),与CD_8^+T淋巴细胞百分比、BASDAI、红细胞沉降率(ESR)呈正相关(P<0.05),与C反应蛋白(CRP)无直线相关关系(P>0.05)。AS患者外周血CD_8^+T淋巴细胞PD-1阳性率与CD_4^+T淋巴细胞百分比、CD_8^+T淋巴细胞百分比、CD_4^+/CD_8^+、BASDAI、ESR、CRP无直线相关关系(P>0.05)。结论浙江省丽水市AS患者外周血CD_4^+T淋巴细胞、CD_8^+T淋巴细胞PD-1表达增加,CD_4^+T淋巴细胞PD-1阳性率在AS活动期明显增加,与疾病的炎性反应指标相关,可能在AS的免疫病理中起重要作用。
- 胡晓蕾赵志钢骆方军朱涛辉
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞CD8阳性T淋巴细胞
- 实时荧光定量RT-PCR检测IL-2Rα mRNA方法学建立及在强直性脊柱炎中的应用
- 目的：1.构建白细胞介素-2受体α(interleukin-2 receptorα，IL-2Rα)mRNA实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-timefluorescence quantitative revers...
- 骆方军
- 关键词：白细胞介素核糖核酸强直性脊柱炎
- 文献传递
- TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎IL-2RαmRNA检测的应用价值
- 2005年
- 目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析。方法:用 Primer Express v2.0软件,根据GenBank提供的序列,在人IL-2Rα mRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA,加入已优化的一步法FQ-RT-PCR反应体系,扩增产物经凝胶电泳后切胶回收,并与pUCm-T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后,用T7RNA聚合酶转录为cRNA,作为FQ-RT-PCR系列浓度标准品。评价FQ-RT-PCR检测 IL-2Rα mRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA-B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2Rα mRNA基因的表达水平,结合血浆可溶性白细胞介素-2受体 (sIL-2R)浓度,探讨与炎症活动的相互关系。结果:成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7～107 cells/ml,其批内CV8.4%,批间CV9.6%;扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析,证实为IL- 2Rα mRNA特异性片段。对各30例HLA-B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明:与正常人对照组结果比较,HLA-B27阳性组与HLA-B27阴性组IL-2Rα mRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0.01)。IL-2Rα mRNA对炎症活动评价的灵敏度为96.7%。结论:FQ-RT-PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL- 2Rα mRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态,可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。
- 骆方军吕建新
- 关键词：实时荧光定量逆转录聚合酶链反应IL-2RΑ强直性脊柱炎PCR反应体系MRNA基因
- 一种用于弓形虫病防治的可复制型RNA疫苗及构建方法和应用
- 本发明涉及一种用于弓形虫病防治的可复制型RNA疫苗，所述疫苗是将弓形虫抗原基因NTPase‑II插入到甲病毒载体RREP上，获得重组质粒pRREP‑NTPase‑II，免疫前，将该重组质粒体外转录成RNA后，即可获得所述...
- 谭峰郑丽娜骆方军谢桂珍万玉静李相志林佳鑫刘阳阳
- 文献传递
- 一种用于弓形虫病防治的可复制型RNA疫苗及构建方法和应用
- 本发明涉及一种用于弓形虫病防治的可复制型RNA疫苗，所述疫苗是将弓形虫抗原基因NTPase-II插入到甲病毒载体RREP上，获得重组质粒pRREP-NTPase-II，免疫前，将该重组质粒体外转录成RNA后，即可获得所述...
- 谭峰郑丽娜骆方军谢桂珍万玉静李相志林佳鑫刘阳阳
- TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应在强直性脊柱炎白细胞介素2受体mRNA检测中的应用价值
- 2006年
- 目的利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）检测强直性脊柱炎（AS）患者外周血单个核细胞白细胞介素2受体α（IL-2Rα）mRNA的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析.方法根据GenBank提供的序列设计一对引物和一条TaqMan探针.提取外周血单个核细胞（PBMC）总RNA,加入FQ-RT-PCR反应体系,产物切胶回收与pUCm-T载体连接,用T7RNA聚合酶转成cRNA,制备系列浓度参照物.对其特异性、线性、精密度和探针稳定性进行评价.定量HLA-B27阳性组与阴性组AS患者PBMC的IL-2Rα mRNA基因表达并探讨与血浆可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的相互关系.结果成功构建了IL-2Rα mRNA的cRNA参照物.线性范围7～107 cells/ml,批内CV 8.4%,批间CV 9.6%.对各30例HLA-B27阳性与阴性AS的IL-2Rα mRNA检测表明,与正常对照组结果比较,阳性组与阴性组IL-2Rα mRNA和sIL-2R有明显差异（P〈0.01）.IL-2Rα mRNA对炎症活动评价的灵敏度为96.7%.结论 FQ-RT-PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL-2Rα mRNA比sIL-2R更能反映强直性脊柱炎患者的炎症活动程度.
- 骆方军吕建新
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
- 流式细胞术检测人类白细胞抗原B-27弱阳性时的处理方法被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨流式细胞术检测人类白细胞抗原-B27（ HLA-B27）结果为弱阳性时的处理方案。方法真空管采集强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者及腰痛者外周血，分别采用美国A公司和美国B公司的试剂盒检测HLA-B27／CD3和HLA-B27＋／HLA-B27-，比较两者在低荧光强度或弱阳性时对结果判断的差异。结果 A公司试剂盒检测时超过荧光强度判断标准但＜15％时的9份阳性标本中，B公司5份为阳性，4份为弱阳性。另外8份阴性标本结果全部符合。对两方法的结果判定强度进行比较，差异有统计学意义（U＝0．000，P＜0．01）。结论两方法在强度等级判断上存在差异，但临床应用各有优缺点，在弱阳性结果时需要结合临床症状、随访观察或用测序方法确定。
- 张华周国忠潘镔炳骆方军
- 关键词：流式细胞术
