赵文青
- 作品数：9 被引量：8H指数：1
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- Cadherin-11过表达载体的构建及其对大鼠牙髓细胞生物学特性的影响
- 2017年
- 目的:构建表达钙黏蛋白-11(Cadherin-11)的重组腺病毒载体,并观察其对大鼠牙髓细胞生物学特性的影响。方法 :PCR扩增Cadherin-11,在引物中引入NheⅠ和HindⅢ酶切位点,构建pDC316-mCMV-EGFP-Cadherin-11重组腺病毒穿梭载体。用含目的基因的重组质粒转染293T细胞,获得含目的基因的高滴度腺病毒。原代培养大鼠牙髓细胞,并用pDC316-mCMVEGFP-Cadherin-11重组腺病毒进行转染。采用免疫细胞化学法和RT-PCR法分别检测目的基因Cadherin-11的表达。结果:以pDC316-mCMV-EGFP-Cadherin-11转染大鼠牙髓细胞后,Cadherin-11mRNA和蛋白均为阳性表达(均P<0.05),且感染复数(MOI)为50时病毒转染效率最高。携带Cadherin-11目的基因的大鼠牙髓细胞生长速度明显高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:构建重组腺病毒载体pDC316-mCMV-EGFP-Cadherin-11可高效转染大鼠牙髓细胞,并稳定表达Cadherin-11基因;过表达Cadherin-11对大鼠牙髓细胞生长具有一定的促进作用。
- 陆彦玲陈婉赵文青蔡捷吴煜
- 关键词：腺病毒载体免疫细胞化学
- Cadherin-11与大鼠牙齿发育关系的初步研究
- 2015年
- 目的:研究观察钙黏蛋白-11在大鼠牙髓组织中的表达,探讨其与牙齿发育的关系。方法:用RT-PCR检测大鼠切牙牙髓组织钙黏蛋白-11 mRNA的表达,用免疫组化法检测其在牙髓组织中的分布。结果:RT-PCR显示在大鼠切牙牙髓组织有钙黏蛋白-11mRNA的表达。大鼠牙髓组织免疫组化染色可见钙黏蛋白-11广泛表达于牙髓细胞、成牙本质细胞的细胞浆和细胞膜;在根尖部牙髓细胞表现为弱阳性表达,往牙冠方向,表达增强,在牙髓冠方为强阳性表达。钙黏蛋白-11在成牙本质细胞为强阳性表达,比牙髓细胞表达强。在成釉细胞也可见表达。结论:钙黏蛋白-11在大鼠牙髓组织中选择性的表达,钙黏蛋白-11可能在牙齿发育中发挥重要的调控作用。
- 甘春兰陈婉蔡捷赵文青吴煜
- 关键词：免疫组化
- BMP-2诱导人牙髓细胞分化过程中miRNA表达谱的变化被引量：6
- 2017年
- 目的:筛选出骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)诱导人牙髓细胞(human dental pulp cells,h DPCs)成牙本质向分化时差异表达的微小RNA(miRNAs)。方法:以BMP-2诱导液培养h DPCs 14 d作为诱导组,以未诱导的h DPCs为对照组,实时定量PCR检测成牙本质相关基因:牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein-1,DMP-1)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达;通过miRNA芯片筛选h DPCs向成牙本质细胞分化过程中差异表达的miRNAs,采用实时定量PCR对结果进行验证;应用生物信息学软件进行靶基因预测,初步推测BMP-2诱导h DPCs分化过程中涉及的通路及功能。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:实时定量PCR结果显示,各目的基因(DSPP、DMP-1、ALP)在诱导组的表达均高于对照组(P<0.05)。基因芯片结果显示,h DPCs成牙本质向诱导后,差异表达的miRNAs有36个,包括上调20个和下调16个。实时定量PCR对其中5个miRNAs的验证结果与芯片结果基本一致。生物信息学分析显示,基因的功能分布为37.8%与生物过程有关,29%与细胞成分有关,33%与分子功能有关,约有0.2%的基因未检测出具体功能和作用。结论:在h DPCs经BMP-2诱导向成牙本质细胞分化过程中,存在miRNA表达谱变化,为进一步研究差异表达的miRNAs在h DPCs分化过程中的作用及其靶基因的生物学效应奠定了基础。
- 包丽荣赵文青林田陆彦玲吴煜
- 关键词：牙髓细胞BMP-2MIRNA基因表达谱
- Cadherin-11基因转染对大鼠牙髓细胞迁移和分化的影响
- 2015年
- 目的:探讨腺病毒载体介导的Cadherin-11(Cad-11)基因转染对大鼠牙髓细胞迁移能力和成牙本质分化能力的影响。方法:原代培养大鼠牙髓细胞,并用pD C316-mC MV-EGFP-Cadherin11重组腺病毒进行转染。通过免疫组化法检测Cad-11蛋白表达,用ALP染色和茜素红钙结节染色及定量检测其成牙本质分化情况。黏附实验和迁移实验分别检测Cad-11对牙髓细胞黏附和迁移的影响。结果:免疫组化染色示Cad-11转染成功并高表达Cad-11蛋白。Cad-11在矿化诱导14 d时可增强大鼠牙髓细胞ALP表达,诱导21 d,形成钙化结节量增加(P<0.05),同时增加细胞的黏附性和迁移能力(P<0.05)。结论:Cad-11能促进大鼠牙髓细胞成牙本质分化能力,同时提高其迁移活性。
- 甘春兰陈婉蔡捷赵文青吴煜
- 关键词：迁移分化
- BMP-2诱导牙髓细胞分化过程中的mirRNA表达谱的研究
- 一定条件的刺激下,牙髓细胞可以向成牙本质细胞方向分化,骨形态发生蛋-2 (BMP-2)在这一过程中发挥着关键作用。MicroRNAs作为一类具有调控功能的微小RNA,广泛存在于哺乳动物和人类细胞中,这类小片段非编码RNA...
- 赵文青
- 关键词：牙髓细胞骨形态发生蛋白2基因表达谱
- 文献传递
- BMP-2诱导牙髓细胞分化过程中的microRNAs表达谱的研究
- 一定条件的刺激下，牙髓细胞可以向成牙本质细胞方向分化，骨形态发生蛋-2（BMP-2）在这一过程中发挥着关键作用。MicroRNAs作为一类具有调控功能的微小RNA，广泛存在于哺乳动物和人类细胞中，这类小片段非编码RNA在...
- 赵文青
- 关键词：牙髓细胞骨形态发生蛋白2
- 文献传递
- 骨诱导形成蛋白-2诱导牙髓细胞矿化最佳条件的探究被引量：1
- 2015年
- 目的：探讨骨诱导形成蛋白-2（BMP-2）诱导人牙髓细胞（DPCs）矿化的最佳条件。方法 ：将人DPCs进行体外培养稳定传代,用含不同浓度BMP-2（0μg/L、50μg/L、100μg/L、150μg/L）的诱导液培养14d,另用浓度为100μg/L BMP-2诱导细胞,分别于7d、14d、21d检测各组细胞增殖情况、矿化结节的形成情况以及诱导成牙本质过程中相关牙本质涎磷蛋白（DSPP）、牙本质基质蛋白-1（DMP-1）、碱性磷酸酶（ALP）基因的表达水平。结果：不同浓度BMP-2诱导细胞过程中,诱导液浓度的改变对细胞增殖无明显作用;一定范围内随着诱导剂剂量的增加,DPCs矿化结节形成量,DSPP、DMP-1、ALP基因表达量上调,各浓度与对照组（BMP-2为0μg/L）比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,100μg/L组和50μg/L组之间的表达量比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,100μg/L组和150μg/L组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。在100μg/L浓度BMP-2诱导下,0~14d各表达明显增长,14d组与7d组各表达量差异有统计学意义（P〈0.05）,而14d组与21d组各表达量差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：BMP-2对DPCs增殖无明显作用,但有明显诱导细胞矿化作用,最佳浓度为100μg/L,最佳天数为14d。
- 赵文青林田陆彦玲吴煜
- 关键词：牙髓细胞矿化
- 大鼠牙髓干细胞的分离培养与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的:分离培养大鼠牙髓干细胞并对其进行生物学鉴定。方法:采用酶消化法分离获得大鼠牙髓干细胞,有限稀释法纯化细胞,测定细胞克隆形成率,细胞计数法测生长曲线,抗波形丝蛋白及角蛋白、抗STRO-1免疫化学染色。体外分化诱导实验检测细胞的多向分化能力。结果:分离纯化获得的大鼠牙髓干细胞在体外具有一定的克隆形成能力,波形丝蛋白、STRO-1均有表达。诱导条件下部分牙髓干细胞具有多向分化的潜力,符合干细胞特征。结论:成功从大鼠牙髓中获取牙髓干细胞。
- 陈婉甘春兰赵文青吴煜蔡捷
- 关键词：细胞克隆免疫化学诱导分化
- 润燥止痒胶囊、多西环素、医学护肤品三者联合治疗轻中度痤疮的临床评价
- 目的 评价润燥止痒胶囊、多西环素、医学护肤品三者联合应用治疗轻中度痤疮的临床疗效.方法 将 105 例轻中度痤疮患者随机分为治疗组(56 例)和对照组(49 例),治疗组接受润燥止痒胶囊联合多西环素治疗,对照组接受多西环...
- 吴玉清赵文青
