孙玉静
- 作品数：35 被引量：11H指数：1
- 供职机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：公益性行业(农业)科研专项国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 耐高温链霉菌在农业废弃物堆肥中的应用
- 一株可高效降解和转化水稻秸秆和猪粪氮素的耐高温放线菌。本发明所述的放线菌属于灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)，保藏编号为CGMCC No.5706。该菌不仅对水稻秸秆中的木质纤维素有很强...
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- 利用核酸适配体修饰纳米金粒子的三聚氰胺检测方法
- 一种食品安全技术领域的利用核酸适配体修饰纳米金粒子的三聚氰胺检测方法，通过构建含有已知三聚氰胺浓度的检测体系后，采用紫外分光光度计分别测定其在640nm和520nm处的吸光值之比并制作标准曲线；然后将经过前处理的待测对象...
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- 文献传递
- 一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用
- 本发明公开了一种灰略红链霉菌果胶酯酶及其编码基因和应用。该果胶酯酶基因从灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)克隆得到，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或其密码子优化后的SEQ ID NO...
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- 基于半纤维素酶的工程菌及其实现方法
- 本发明涉及基因工程技术领域的半纤维素酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA经过全基因合成构建得到的pUC57‐XL载体为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增并对应分别得到编码木聚糖酶的核苷酸序列XL和编码...
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- 基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法
- 一种基因工程领域的基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码外切葡聚糖酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得...
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- 基于木质素过氧化物酶的工程菌及其实现方法
- 一种基因工程领域的基于木质素过氧化物酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码木质素过氧化物酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，...
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- 基于巨大芽孢杆菌的亚硝酸盐还原酶小亚基外源表达方法
- 一种基因工程技术领域的基于巨大芽孢杆菌的亚硝酸盐还原酶小亚基外源表达方法，通过将测序得到的亚硝酸盐还原酶大亚基的基因序列通过引物序列扩增并连接到大肠杆菌表达载体中，从而获得重组表达载体，并进一步将重组表达载体导入大肠杆菌...
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- 基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法
- 一种基因工程技术领域的基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增得到谷氨酰胺合成酶编码基因；然后将该基因插入大肠杆菌表达载体pET‐22b(+)中得到含有...
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- 烟草和水稻中水稻条斑病菌过敏反应激发子Ssb_x互作因子的鉴定被引量：1
- 2015年
- 【目的】水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)中单链DNA结合蛋白(single-stranded DNA-binding protein,SsbX)通过病原菌III型分泌系统(type-III secretion system,T3SS)分泌,在非寄主植物烟草上产生过敏反应(hypersensitive response,HR),研究旨在明确SsbX激发烟草产生HR的机理。【方法】将水稻条斑病菌RS105菌株注射水稻和烟草叶片,应用CreatorTM SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建水稻和烟草cDNA文库,借助pGADT-Sfi AB载体上特殊酶切位点SfiⅠ,酶切检测水稻和烟草cDNA文库质量;以SsbX为诱饵,通过酵母双杂交技术(Y2H)从水稻和烟草cDNA文库中筛选在SD/-Ade/-Leu/-Trp/-His培养基上能够生长的阳性克隆;并利用β-gal试验验证阳性克隆;序列测定后,使用MEGA 4序列分析软件,并利用邻位相连法(neighbor-joining,NJ)对筛选获得的互作因子进行同源序列和系统进化树分析;利用荧光双分子互补试验(BiFC)于488 nm处黄色激发光和520—550 nm透射光、20×物镜下,在激光共聚焦显微镜(Leica TCS SP5-II)观察SsbX与烟草和水稻中互作因子的互作位点。【结果】水稻和烟草cDNA文库构建和质量检测结果显示,随机挑选20个克隆中水稻来源的cDNA插入在pGADT-Sfi AB载体上,平均片段大小1.0kb;随机挑选20个克隆中烟草来源的cDNA均插入在pGADT-Sfi AB载体上,平均片段大小1.2 kb,说明水稻和烟草的cDNA文库构建质量较好;Y2H和β-gal试验结果显示,SsbX可与烟草和水稻的ADF2(actin-depolymerization factor 2)蛋白互作,使酵母AH109能够在SD/-Ade/-Leu/-Trp/-His平板上生长,并且β-gal染色显示为蓝色。水稻Os ADF2编码139氨基酸,蛋白质分子量为15.9 k D,而烟草Nb ADF2编码137氨基酸,蛋白质分子量为15.kD,两者同源性达69.02%。同源性以及系统进化树分析显示,植物中ADF2广泛存在,同源性高达60%以上。双子叶植物烟草和拟南芥的ADF2同源性最高,相似性达69.05%;单子叶禾本科植物水稻和狗尾草的
- 孙玉静马文秀蔡璐璐刘良邹丽芳陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌肌动蛋白解聚因子过敏反应
- 接种灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)对水稻秸秆堆肥及还田后土壤理化性质和微生物群落影响被引量：10
- 2015年
- 研究以1株高效水稻秸秆降解灰略红链霉菌(S.griseorubens)JSD-1为研究对象。制备该菌的固体菌剂(1010cfu/g),并以1.0%的比例接种到水稻秸秆(水稻秸秆:猪粪=10:1),经测定接种菌剂的堆肥处理高温期的最高温度71℃高于自然堆肥处理的65℃,且整个发酵周期缩短约30%。秸秆堆肥盆栽试验结果表明,添加秸秆堆肥不仅显著提高土壤有机肥、全氮、硝态氮和铵态氮含量,而且提高土壤纤维素酶、硝酸盐还原酶、蛋白酶及脲酶等土壤酶活性和土壤呼吸强度,且接种JSD-1的处理J效果好于自然堆肥处理N;但添加秸秆堆肥抑制土壤蔗糖酶活性。随后通过BIOLOG和PCR-DGGE分析施用不同秸秆堆肥对土壤微生物群落的影响,结果证实添加秸秆堆肥后土壤微生物群落的数量与结构均有较大改善;接种菌剂处理J作物(青菜)产量最高,较自然堆肥处理(N)和对照处理(CK)分别提高31.1%和106.7%。综上,灰略红链霉菌JSD-1在实现农作物秸秆的资源化利用方面具有较强的实际应用价值。
- 冯海玮孙玉静毛亮支月娥周培
- 关键词：堆肥土壤酶土壤微生物群落
