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双作用靶点水蛭素Ⅲ突变体库(R_(33)G_(34)D_(35)X_(36-r)HV3)的构建及最适突变体筛选被引量：1: 2011年; 构建水蛭素Ⅲ(HVⅢ)突变体库R33G34D35X36-rHVⅢ,从中筛选出具有与重组水蛭素Ⅲ(rHV3)抗凝血酶活性比活力相当,同时又具有很强的抗ADP诱导的血小板聚集抑制率的双作用靶点水蛭素Ⅲ突变体。通过基因定点突变技术构建水蛭素Ⅲ突变库R33G34D35X36-rHVⅢ,表达纯化后通过凝血酶滴定方法测定其抗凝血酶比活性,同时测定其抗ADP诱导的血小板聚集比活性。结果显示所有突变体的抗凝血酶比活性未发生变化,但各突变体抗ADP诱导的血小板聚集的比活性各异,当第36位为Met和Ser时所表现的抗ADP诱导的血小板聚集的比活性最强。由此可知水蛭素Ⅲ(HVⅢ)突变体库R33G34D35X36-rHVⅢ中第36位氨基酸种类对其抗凝血酶活性影响不大,但对其抗ADP诱导的血小板聚集的比活性影响较大,当该位点为Met和Ser时突变体具有很好的抗凝血酶和抗ADP诱导的血小板聚集的双重药理活性。; 许静王航谭树华; 关键词：定点突变抗血小板聚集 RGD序列

达托霉素发酵过程中前体癸酸的添加策略研究被引量：9: 2012年; 采用补料培养流加方式研究达托霉素发酵过程中前体物质癸酸的起始添加时间、添加量、癸酸耦合剂以及变速流加癸酸对发酵法生产达托霉素的影响。研究表明,达托霉素发酵过程中前体癸酸最佳起始添加时间为开始发酵后第36 h;癸酸最佳添加量为癸酸∶油酸甲酯(1∶1)70μL/12 h;癸酸最佳耦合剂为乙醇,配比为2.5∶1;变速添加癸酸溶液可使达托霉素的产量略有提高。; 吴旻王文轶王泽根刘敏王航王旻; 关键词：达托霉素前体癸酸流加

一种达托霉素发酵过程中癸酸添加的新方法: 本发明涉及一种达托霉素发酵过程中癸酸添加的新方法，即在玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)发酵培养过程中，同时添加脂肪酶及癸酸乙酯，以脂肪酶水解癸酸乙酯从而添加前体癸酸生产达托霉素，是一种提高...; 吴旻王旻王泽根王航; 文献传递

新型双作用靶点重组水蛭素突变体的优化设计与应用: 本发明公开了一种新型双作用靶点重组水蛭素III突变体R33G34D35M36-rHV3及其制备方法。前期结果(Tan，S.et al...; 谭树华王航许静; 文献传递

水蛭素的分子改造与结构修饰研究进展被引量：2: 2011年; 目的为更好地开发利用重组水蛭素,综述国内外水蛭素结构修饰研究状况。方法依据近年来国内外文献,进行分析、归纳和总结。结果与结论笔者通过对水蛭素进行各种分子改造或者结构修饰来产生新的类似物蛋白,从而解决水蛭素在临床应用中出现的种种问题,有的也可能会出现新的功能。; 王航许静谭树华; 关键词：水蛭素结构修饰

达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌NRRL11379接合转移系统的建立与优化被引量：2: 2014年; 玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)NRRL11379是一种具有环脂肽结构抗生素-达托霉素(Daptomycin)的产生菌。建立高效稳定的遗传操作系统是研究该链霉菌各功能基因作用以及构建基因工程菌的基础。实验探索了通过电穿孔、接合转移向玫瑰孢链霉菌中转入外源DNA的可能性。以链霉菌(Streptomyces)噬菌体ΦC31所构建的整合型载体pSET152-dptP为出发质粒,玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体作为受体菌,在不同的电场强度下进行电穿孔实验,结果表明:以玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体为受体菌,未获得转化子。以ET12567(PUZ8002,pSET152-dptP)为供体,玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体为受体,选取MS培养基为接合转移培养基,利用属间接合转移将质粒pSET152-dptP转入菌株NRRL11379中。结果表明:当供体大肠杆菌ET12567细胞量和玫瑰孢链霉菌NRRL11379菌丝体量比例为1∶1,MS培养基中MgCl2的浓度为0.01 mol/L,培养20 h后覆盖阿泊拉霉素50μg/mL以及萘啶酮酸50μg/mL时,接合转移频率最高,可达1.75×10-4。通过PCR验证,质粒pSET152-dptP已整合至玫瑰孢链霉菌NRRL11379菌株的染色体上。确定了玫瑰孢链霉菌属间接合转移的最佳条件。; 王航王文轶吴旻彭冉王旻; 关键词：达托霉素电转化

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王航