王文轶
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 酵母葡聚糖硫酸酯化修饰及其对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进作用被引量：2
- 2011年
- 目的:研究免疫增强活性较好的酵母葡聚糖硫酸酯(SPS)的修饰条件。方法:通过L9(3)4正交设计对氯磺酸-吡啶法制备SPS的工艺进行优化,并以MTT法测定其对小鼠脾淋巴细胞体外增殖的促进作用。结果:最佳修饰条件为氯磺酸∶吡啶=1∶6(V/V),反应温度70℃,反应时间3h,硫酸基取代度可达1.092。在50～200μg.mL-1内,最佳工艺所得SPS对小鼠脾淋巴细胞生长有显著促进作用,平均增殖率可达89.85%。结论:优化方法制备的SPS对小鼠脾淋巴细胞生长具有显著的促进作用。
- 聂煜王文轶周菲尹鸿萍王旻
- 关键词：葡聚糖酵母淋巴细胞
- 达托霉素发酵过程中前体癸酸的添加策略研究被引量：9
- 2012年
- 采用补料培养流加方式研究达托霉素发酵过程中前体物质癸酸的起始添加时间、添加量、癸酸耦合剂以及变速流加癸酸对发酵法生产达托霉素的影响。研究表明,达托霉素发酵过程中前体癸酸最佳起始添加时间为开始发酵后第36 h;癸酸最佳添加量为癸酸∶油酸甲酯(1∶1)70μL/12 h;癸酸最佳耦合剂为乙醇,配比为2.5∶1;变速添加癸酸溶液可使达托霉素的产量略有提高。
- 吴旻王文轶王泽根刘敏王航王旻
- 关键词：达托霉素前体癸酸流加
- 阴离子交换树脂对Streptomyces roseosporus发酵液中达托霉素的分离纯化研究被引量：8
- 2011年
- 目的:研究阴离子交换树脂对Streptomyces roseosporus发酵液中达托霉素的纯化工艺。方法:通过比较不同种类的阴离子交换树脂,以树脂对达托霉素的吸附量、洗脱率、纯度为考察指标综合评价。结果:筛选出对发酵液中达托霉素吸附较高,并具有较高回收率,杂质吸附较低的阴离子交换树脂330。确定最佳吸附条件为:吸附方式为静态吸附,吸附温度为15℃～30℃,吸附液的pH8.0～8.5,饱和吸附时间为10 h;最适洗脱条件为:洗脱方式为静态洗脱,洗脱剂为0.8 mol.L-1 NaCl水溶液,洗脱体积为12倍树脂体积,洗脱时间为8 h。结论:确定了阴离子交换树脂330对达托霉素的纯化工艺,在优化条件下,发酵液中达托霉素的纯度由2%提高到了60%,回收率达87.5%。
- 王泽根王文轶吴旻吴勋贵王伟明王旻
- 关键词：达托霉素阴离子交换发酵液
- 达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌NRRL11379接合转移系统的建立与优化被引量：2
- 2014年
- 玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)NRRL11379是一种具有环脂肽结构抗生素-达托霉素(Daptomycin)的产生菌。建立高效稳定的遗传操作系统是研究该链霉菌各功能基因作用以及构建基因工程菌的基础。实验探索了通过电穿孔、接合转移向玫瑰孢链霉菌中转入外源DNA的可能性。以链霉菌(Streptomyces)噬菌体ΦC31所构建的整合型载体pSET152-dptP为出发质粒,玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体作为受体菌,在不同的电场强度下进行电穿孔实验,结果表明:以玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体为受体菌,未获得转化子。以ET12567(PUZ8002,pSET152-dptP)为供体,玫瑰孢链霉菌NRRL11379新鲜菌丝体为受体,选取MS培养基为接合转移培养基,利用属间接合转移将质粒pSET152-dptP转入菌株NRRL11379中。结果表明:当供体大肠杆菌ET12567细胞量和玫瑰孢链霉菌NRRL11379菌丝体量比例为1∶1,MS培养基中MgCl2的浓度为0.01 mol/L,培养20 h后覆盖阿泊拉霉素50μg/mL以及萘啶酮酸50μg/mL时,接合转移频率最高,可达1.75×10-4。通过PCR验证,质粒pSET152-dptP已整合至玫瑰孢链霉菌NRRL11379菌株的染色体上。确定了玫瑰孢链霉菌属间接合转移的最佳条件。
- 王航王文轶吴旻彭冉王旻
- 关键词：达托霉素电转化
