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排序方式：

青海弧菌荧光素酶基因LuxAB的原核表达被引量：2: 2015年; 为研究青海弧菌的发光机制,参考霍乱弧菌的发光基因,设计了青海弧菌Lux AB基因的扩增引物,经PCR反应得到相应的片段,并建立了与其他常见荧光素酶的系统发育关系;同时对青海弧菌的16S r DNA进行克隆和测序,并基于16S r DNA建立青海弧菌与其他相近细菌之间的亲缘关系;随后,成功将Lux AB克隆到表达载体PHSG396中,转化大肠杆菌Top10,成功实现重组质粒在大肠杆菌中的表达。; 王妍稳丁武李璠张莉丽魏新元; 关键词：青海弧菌克隆原核表达

青海弧菌lux基因在大肠杆菌中的异源表达被引量：1: 2014年; 研究淡水发光菌青海弧菌Vibrio qinghaiensis Q67的lux CDABE发光基因在大肠杆菌中的表达,并测定其对相关因素的耐受性,为其应用条件的筛选提供有利依据.对构建好的重组菌进行酶切验证筛选出发光重组菌,将其在含氯霉素的液体LB培养基中以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,对发光特性的表达条件进行研究,考察重组菌生长与发光的对应关系,癸醛、p H、温度和IPTG对发光的影响,以及重组菌在室温下的稳定性测定.结果显示,重组菌发光强度随菌体生长先升后降,在对数生长后期发光强度达到最大;当癸醛浓度(0.1-3.0μL/m L)、p H(3.0-11.0)、温度(25-43℃)和IPTG(0.05-0.35 mg/m L)从小到大变化时,重组菌的光强均呈现先增后减趋势;各影响因素分别为癸醛浓度1.0μL/m L,p H 6.0,温度37℃,IPTG浓度0.10 mg/m L时,重组菌发光最强;发光在10min内达到最大值后迅速下降,后来平缓波动趋于稳定,3 h内光强仍在测量范围内.本研究表明,青海弧菌lux CDABE基因在大肠杆菌中能很好表达并维持发光,重组菌对环境的耐受性为lux基因作为发光标记基因提供了应用范围参考.; 张莉丽丁武王妍稳李璠; 关键词：青海弧菌重组菌发光异源表达

青海弧菌荧光素酶的异源表达条件的优化被引量：1: 2018年; 生物发光标记以其可视化,便捷,快速,灵敏,可用于活体研究等诸多优点越来越多地应用于科学研究中。本研究通过Ca Cl2方法将实验室构建的带有青海弧菌荧光素酶基因lux AB的重组质粒导入大肠杆菌Top10中,利用酶切和核酸电泳检测荧光素酶基因的存在,利用SDS-PAGE检测荧光素酶表达的情况,然后对其表达条件进行优化。单因素试验结果表明:在培养基初始pH值6.0,癸醛体积分数1.25‰,接种量1%,IPTG浓度0.1 mmol/L,装液量50 m L/150 m L,温度37℃条件下,重组菌的发光度最大,即表达量最高。正交试验结果表明:当pH 6,IPTG浓度0.08 mmol/L,接种量1.2%,温度36℃时重组大肠杆菌表达情况最好,发光度达1 262.7。本研究中的重组大肠杆菌为在益生菌等食品微生物中的应用提供技术依据。; 李璠丁武彭国霞王妍稳张莉丽; 关键词：青海弧菌荧光素酶生物发光

青海弧菌luxCDABE基因在大肠杆菌中克隆与表达: 2017年; 为探究荧光素酶编码基因表达产物发光特性,以青海弧菌基因组为模版扩增得到luxCDABE基因,构建表达载体pHSG396-luxCDABE。将载体导入大肠杆菌Top10,成功获得表达菌株Top10/pHSG396-luxCDABE(T-pluxCDABE),测定重组菌株的表达活性,与实验室构建的菌株Top10/pHSG 396-luxAB(T-pluxAB)发光情况进行比较。; 李璠丁武王妍稳; 关键词：青海弧菌 LUXCDABE 克隆

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李璠