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miR-139对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响被引量：1: 2016年; 目的阐明miR-139在骨肉瘤细胞中的表达水平及其对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法采用qRT-PCR检测miR-139在永生化成骨细胞系hF OB 1.19及骨肉瘤细胞系SOSP-9607、MG-63中的表达情况;采用5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5Aza-CdR)和曲古抑菌素A(TSA)处理骨肉瘤细胞,通过qRT-PCR检测miR-139的表达变化;将miR-139模拟物转染入骨肉瘤细胞中,通过MTT实验检测细胞增殖能力的变化,通过流式细胞术分析细胞凋亡的变化,通过Western blot检测Cyclin D1表达和Caspase-3活化的变化。结果与永生化成骨细胞系hF OB 1.19相比,miR-139在SOSP-9607和MG-63骨肉瘤细胞中的表达水平显著降低(P<0.01);5-Aza-CdR对SOSP-9607和MG-63骨肉瘤细胞中miR-139的表达没有影响,而TSA能够促进miR-139的表达(P<0.01);miR-139模拟物能够抑制骨肉瘤细胞的增殖能力,诱导骨肉瘤细胞凋亡,并抑制Cyclin D1的表达、促进Caspase3的激活(P<0.05或P<0.01)。结论 miR-139在骨肉瘤细胞中低表达,而过表达miR-139能够抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导其凋亡。; 李志全马龙董晖黎璞吴尧平; 关键词：骨肉瘤增殖凋亡

微创技术治疗青年臀肌挛缩症患者的临床效果: 2016年; 目的分析微创技术治疗青年臀肌挛缩症患者的中期随访疗效。方法对380例臀肌挛缩症患者采用微创技术松解挛缩带进行治疗,术后随访12~36个月,观察治疗效果。结果 380例患者中,优291例,良86例,差3例,优良率为99.2%。结论采用微创技术治疗青年臀肌挛缩症患者中期随访疗效满意,但实施手术的技术要求较高。; 马民亮吴尧平李志全刘艳武赵轶男陈晓超; 关键词：臀肌挛缩症手术治疗微创技术青年疗效

大鼠脑组织NT-3融合蛋白的表达、纯化及抗体制备: 2007年; 目的克隆大鼠脑组织神经营养素3(NT-3)基因,原核诱导表达并纯化,制备高效价抗体,为研究其对周围神经损伤修复的影响提供实验基础。方法用RT-PCR法扩增目的基因,依次克隆入pMD-18T载体及亚克隆入pRSET-A原核表达载体。导入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定后用镍柱纯化。免疫家兔制备特异性抗体。结果RT-PCR得到777 bp的片断,酶切鉴定及测序证实与GeneBank中大鼠NT-3序列一致,成功构建了原核表达载体pRSET-A-NT-3。导入BL21诱导得到一条约34 ku的新蛋白带。免疫家兔获得1∶64000的高效价特异性抗大鼠NT-3血清。; 李志全胡蕴玉朱庆生朱锦宇刘方; 关键词：蛋白纯化

骨科住院医师规范化培训中存在的问题与对策被引量：8: 2013年; 骨科因其亚专科多、专业性强的学科特点,给住院医师规范化临床技能培训带来一定困难。本文结合骨科临床教学特点和住院医师规范化培训工作的体会,分析了规范化培训过程出现的一些问题,提出了通过夯实基本功和应用案例为基础的教学法(CBL)拓展临床能力,以及应用问题为基础的教学法(PBL)进行快速提高的"三步教学法"进行临床技能培训,有效提高了受训医师的学习兴趣和主动性,增强了临床技能水平,使住院医师规范化培训在有限时间内高质量完成培训目标。; 李志全吴尧平吕昌伟朱寒; 关键词：骨科 CBL PBL

关于医用有机化学绪论课教学的思考被引量：6: 2014年; 有机化学与医学和生命科学的交叉与融合越来越紧密,为医学和生命科学的发展做出了突出的贡献。绪论课作为有机化学课程教学开宗明义的第一课,其成败直接影响到学生对本门课程的学习。而组织合理的授课内容是激发学生学习动机与兴趣、夯实基础、启发思考,从而实现温故知新、授人以渔的关键。; 秦向阳刘建强吴尧平何炜李志全; 关键词：医用有机化学绪论课温故知新授人以渔

脊髓内注射NT3重组腺病毒对前角神经元的保护作用被引量：2: 2006年; 目的观察脊髓内注射神经营养素3(Neurotrophin-3,NT3)重组腺病毒对坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元的保护作用。方法制作大鼠坐骨神经夹伤模型,12只大鼠随机分为治疗组与对照组,治疗组大鼠在立体定位仪上于脊髓腹角给予神经营养素3重组腺病毒(Adeno-NT3),对照组给予生理盐水。术后不同时间通过CTB逆标观察脊髓相应节段运动神经元再生的数目；通过尼氏染色计数并计算运动神经元的存活百分率。结果给予Adeno-NT3组与对照组相比,相应节段运动神经元再生数目和存活百分率明显增加,而且再生神经元增加的比例高于存活神经元。结论Adeno-NT3对坐骨神经损伤后的脊髓前角运动神经元具有保护作用。; 李志全胡蕴玉朱庆生朱锦宇刘方; 关键词：坐骨神经重组腺病毒神经营养素3

人NT3、BDNF基因Tet-on可调控重组腺病毒载体的构建和鉴定被引量：6: 2004年; 目的 :分别构建含人神经营养素 3(NT3)基因和脑源性神经营养因子 (BDNF)基因的重组四环素可诱导的腺病毒载体 ,并进行PCR和酶切鉴定。方法 :将NT3和BDNF基因依次分别亚克隆到pIND载体和pTRE Shuttle2载体中 ,构建重组载体pTRE Shuttle2 NT3和pTRE Shuttle2 BDNF。用PI SceI和I CeuI双酶切后将所获NT3及BDNF基因片段再与线性化的腺病毒载体pAdeno X连接 ,构建成pAdeno NT3及pAdeno BDNF的重组腺病毒载体。以电穿孔转化E .coli后挑取克隆进行PCR及酶切鉴定。结果 :重组腺病毒载体的PCR鉴定表明 ,在 312bp处出现特定的条带 ;酶切鉴定证实 ,得到约 2 3kb的预期片段 ,说明人NT3、BDNF基因与腺病毒载体pAdeno X已正确连接。结论 :成功地构建了含人NT3和BDNF基因的四环素可诱导重组腺病毒载体。; 李志全朱庆生朱锦宇郝伟许彦鸣王成济杨安钢; 关键词：神经营养素3 重组腺病毒载体

Adeno-X Tet-On系统调控LacZ基因在雪旺细胞中表达的研究被引量：2: 2004年; 目的　应用Adeno XTet On系统感染雪旺细胞 ,通过四环素衍生物强力霉素 (doxcycline ,Dox)调控LacZ基因产物 (βgal)的表达。方法　①取生后 5～ 6dSD仔鼠坐骨神经进行雪旺细胞培养 ,并进行形态学及S 10 0蛋白相关抗原免疫组织化学染色鉴定。②将Adeno XTet OnVirusStock与Adeno XTRE βgalVirusStock分别感染HEK2 93细胞 ,收获病毒并作滴度测定。③将扩增后的病毒感染雪旺细胞并绘制Dox调控下βgal诱导表达曲线。结果　①由体外培养获得的雪旺细胞纯度可达 90 %以上并且状态良好 ,免疫组织化学染色阳性结果明显。②扩增后的病毒滴度较高 ,分别达 1.2 6× 10 9、1.99× 10 9pfu/ml。　结论　将病毒感染雪旺细胞后 ,经检测发现DOX对; 郝伟朱锦宇朱庆生李志全杨安钢; 关键词：LACZ基因雪旺细胞周围神经损伤重组腺病毒载体

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李志全