孙崇云
- 作品数：10 被引量：42H指数：4
- 供职机构：温州医科大学更多>>
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- 葛根素对火药烟雾诱导支气管上皮细胞凋亡的防护作用被引量：7
- 2016年
- 目的探讨葛根素对火药烟雾诱导的支气管上皮细胞(BEAS-2B)凋亡的保护作用及其机制。方法体外培养BEAS-2B细胞,随机分为对照组(不加任何干预)、烟熏组(火药烟雾4g,作用10min)、烟熏+葛根素组(12.5、25、50、100μg/ml)。细胞接种12h后加入葛根素,继续培养至24h后烟雾作用10min,继续培养2h后进行检测。采用CCK-8试剂盒检测细胞活力,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,流式细胞仪检测Annexin V-PI双染细胞及caspase-3阳性率。结果与对照组相比,烟熏组BEAS-2B细胞活力明显下降(P<0.01),不同浓度葛根素能够不同程度地对抗烟熏的作用,其最佳保护浓度为25μg/ml。与烟熏组相比,烟熏+葛根素组Hoechst染色细胞凋亡率、Annexin V-PI双染细胞凋亡率及caspase-3阳性率均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论火药烟雾可致体外BEAS-2B细胞凋亡,而葛根素对火药烟雾诱导的BEAS-2B气管上皮细胞凋亡具有一定防护作用。
- 陈运霞兰晓梅张帆刘萍张立文刘晓婷梁臻龙王策孙崇云王成彬
- 关键词：烟雾吸入损伤上皮细胞支气管细胞凋亡葛根素
- 抗Eppin抗体对成熟精子的损伤及其凋亡
- 2015年
- 目的研究抗附睾蛋白酶抑制剂(Eppin)抗体对人成熟精子常规指标及其凋亡情况的影响,从而探讨Eppin抗体对精子的损伤机制。方法将正常男性精液标本经过精子培养液BWW稀释为20×10~6·ml^(-1)后分为7组:空白对照组、兔IgG抗体组和不同浓度抗Eppin抗体组(浓度分别为2.5、5、10、20和40ug·ml^(-1))共同孵育4h后,检测精子活力、精子凋亡率以及精子线粒体膜电位的改变。结果当抗Eppin抗体浓度达到5 ug·ml^(-1)后,精子发生明显的凋亡,浓度达到20ug·ml^(-1)后,精子的动力降低,同时在随着抗Eppin抗体浓度的增高,会发现线粒体膜电位的降低。结论抗Eppin抗体作为抗精子抗体的一种,当其浓度比较低时,不会对精子的动力造成明显影响。但当到达某一浓度时,会对精子产生损伤作用。
- 刘萍向代军陈运霞薛丹丹张帆孙崇云王策梁臻龙刘晓婷王成彬
- 关键词：精子凋亡线粒体膜电位
- 蓖麻毒素单抗制备及上转发光免疫层析定量检测方法研究被引量：1
- 2016年
- 目的建立一种可快速、精确地对蓖麻毒素（RT）进行定量检测的上转发光免疫检测技术（UPT-LF）,即RT-UPT-LF。方法采用杂交瘤细胞技术制备蓖麻毒素单克隆抗体并对效价进行评价;采用效价最高的4种单抗分别与上转发光纳米颗粒（UCP-NP）共价偶联,分别作为检测带,进而两两配伍,确定最优的配伍组合条件建立RTUPT-LF方法;对RT-UPT-LF的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价。结果与结论所建立的RT-UPT-LF方法可在15 min内完成对蓖麻毒素的检测,灵敏度可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5-1000 ng/ml,与其他高浓度毒素无非特异反应,该法为蓖麻毒素检测提供了一种新手段。
- 王晓晨周蕾孙崇云赵勇王鑫蕊张平平杨瑞馥马馨
- 关键词：蓖麻毒素免疫层析技术快速定量检测
- 基于磁珠液相免疫反应的电阻抗检测系统及其应用技术研究
- 目的： 将基于磁珠的液相免疫检测与电阻抗技术有机融合，解决传统电化学检测中生物活化电极作为耗材所带来的成本高、稳定性差、集成度低等问题。预期建立以生物活化磁珠作为液相均质检测系统、以电化学敏感电极作为定量分析系统、以流...
- 孙崇云
- 关键词：辣根过氧化物酶大肠杆菌
- 文献传递
- 基于上转换发光技术的尿液中吗啡及甲基苯丙胺快速定量检测方法研究被引量：12
- 2015年
- 目的利用上转换发光免疫层析技术（UPT-LF）建立一种尿液中吗啡（MOP）及甲基苯丙胺（MET）快速定量检测方法并对其进行系统评价。方法以上转换发光纳米颗粒（UCP-NPs）作为生物示踪物,竞争模式免疫层析作为检测平台,建立可对尿液中MOP及MET进行定量检测的UPT-LF,即MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF。以MOP-UPT-LF为代表,评价UPT-LF对痕量毒品检测极限,通过系列浓度标准品测定,评价定量检测能力。根据常规检测阈值,调整MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF检测敏感性及线性范围,并评价其定量检测能力。以LC-MS、GC-MS分别作为MOP、MET检测的金标准,以胶体金免疫层析作为对照,对执法现场收集尿样进行检测,确定UPT-LF定性检测性能。对系列浓度MOP模拟阳性样本同时进行LC-MS及MOP-UPT-LF定量检测,对系列浓度MET模拟阳性样本同时进行GC-MS及MET-UPT-LF定量检测,评价UPT-LF定量检测性能。结果在痕量检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性可达1ng/m L,线性范围为1~5000ng/m L（r=-0.98172,P〈0.0005）。在常规检测条件下,MOP-UPT-LF敏感性为50ng/m L,线性范围调整为50~3000ng/m L（r=-0.98464,P〈0.0005）;MET-UPT-LF敏感性为100ng/m L,线性范围为100~5000ng/m L（r=-0.99964,P〈0.0005）。就定性检测而言,MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF均较优,灵敏度及特异度均为100%,与胶体金结果一致。就定量检测而言MOP-UPT-LF及MET-UPT-LF与定量确证方法LC-MS及GC-MS无显著差异。结论本研究建立MOP-UPT-LF、MET-UPT-LF方法,在满足快筛试剂快速简便的基础上,进一步实现了现场快速定量检测,为尿液中毒品的现场快速定量检测提供了技术保障。
- 刘晓林承喜张平平杨笑熳赵勇李春凤孙崇云邱景富杨瑞馥周蕾
- 关键词：法医毒物学免疫层析吗啡甲基苯丙胺快速定量检测尿液
- 基于上转发光免疫层析技术的常见食源性致病菌快速检测方法研究与评价被引量：16
- 2015年
- 目的研制针对4种常见食源性致病菌：甲型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi A）、乙型副伤寒沙门菌（Salmonella paratyphi B）、大肠埃希菌O157∶H7（Escherichia coli O157∶H7）、副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）的基于上转发光免疫层析技术（UPT-LF）的快速定量检测试纸,并对其检测性能进行评价。方法以上转发光纳米颗粒（UCP-NPs）作为示踪物,基于双抗体夹心检测模型,研制针对上述4种靶标菌的UPT-LF试纸;以4种靶标菌的系列浓度标准菌悬液作为标准样品,评价试纸的敏感性、特异性、线性和精密性,并进行模拟染菌食品的检测,评价模拟样品阳性检出率。结果针对4种靶标菌的UPT-LF试纸均具有良好的线性,相关系数r为0.985-0.996;检测敏感性达10^5-10^6CFU/ml,与其他近缘菌株无交叉反应;对乳制品、饮料、小食品、水产、肉类等细菌污染的食品检出率较高。结论该研究建立的对4种常见食源性致病菌进行快速检测的UPT-LF,简便快速,具有良好的敏感性、特异性和线性定量能力,操作性能可满足食品安全检测的要求。
- 李春凤赵勇王晓英张平平刘晓孙崇云杨瑞馥王成彬周蕾
- 关键词：食源性致病菌甲型副伤寒沙门菌副溶血弧菌
- 基于双抗体夹心ELISA建立人血浆肌钙蛋白I的定量测定技术
- 2016年
- 目的基于双抗体夹心ELISA技术建立人血浆肌钙蛋白I(cTnI)定量检测方法,便于基层医疗机构使用。方法基于抗原、抗体筛选,包被抗体、酶标抗体用量优化,建立双抗体夹心ELISA检测cTnI的方法。测定cTnI标准抗原,利用Curve Expert软件建立定量公式,根据临床大型仪器实测结果校准定量公式,实现ELISA测定D值到血浆中cTnI浓度的直接定量。结果与结论双抗体夹心ELISA测量cTnI的敏感性可达0.1ng/ml,敏感性满足临床要求。小样本临床样品的评价实验显示,双抗体夹心ELISA定量结果与临床大型仪器测得的浓度差异无统计学意义(t=0.058,P>0.05)。所建立的双抗体夹心ELISA法可用于定量检测人血浆cTnI。
- 孙崇云周蕾王晓晨赵勇王鑫蕊张平平杨瑞馥王成彬
- 关键词：肌钙蛋白I酶联免疫吸附试验
- 男性生殖道感染患者脂多糖对成熟精子直接损伤作用与机制研究被引量：3
- 2016年
- 目的研究男性生殖道感染患者脂多糖(LPS)作用成熟精子后精子活力、活性氧以及凋亡指标的变化,探讨LPS对成熟精子的损伤情况,从而研究生殖道感染后影响男性生育能力的相关机制。方法通过上游法处理正常精液标本,调整浓度为5×106/ml的高活力精子重悬液,设置对照组和试验组,37℃孵育一定时间后检测精子活力、精子内活性氧、精子凋亡和线粒体膜电位等指标的变化情况。结果试验组精子内活性氧的平均荧光强度为559±42.7,线粒体膜电位的红色平均荧光强度/绿色平均荧光强度的比值为11.1±2.61,与对照组相比,精子内活性氧的升高和线粒体膜电位的降低差异均有统计学意义(P<0.05);但是并未增加精子的凋亡率和降低精子的活力。结论 LPS与高活力精子重悬液孵育作用于精子表面可能升高精子内活性氧,导致精子线粒体损伤,引起线粒体膜电位的降低,可能是男性生殖道感染LPS直接作用于精子参与影响男性不育的机制。
- 刘萍向代军陈运霞薛丹丹张帆孙崇云王策梁臻龙刘晓婷王成彬
- 关键词：脂多糖男性不育精子线粒体膜电位
- 基于上转发光免疫层析技术的鼠疫耶尔森菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌快速检测方法研究与对比评价被引量：6
- 2015年
- 目的研制基于上转发光免疫层析技术（UPT-LF）检测鼠疫耶尔森菌（简称鼠疫菌）、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的试纸，与BioThreatAlert免疫层析（BTA）试纸的检测和操作性能进行对比。方法以上转发光纳米颗粒作为生物示踪物，采用双抗体夹心模式分别研制检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的uPT．LF试纸。分别配制10^10、10^9、10^8、10^7、10^6、10^5、0CFU／ml系列浓度的鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌标准品以及10^9CFU／ml系列浓度的27种特异性评价菌株菌液，采用UPT-LF试纸对其进行检测，对3种UPT-LF试纸的敏感性、精密性、线性和特异性进行分析评价。配制模拟阳性样品，分别采用uPT-LF和BTA试纸对10^7、10^6、10^5、0CFU／ml系列浓度的标准品以及模拟阳性样品进行检测，比较UPT-LF和BTA试纸的检测时间、敏感性以及鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌的检出率。结果鼠疫菌UPT—LF、炭疽杆菌芽孢uPrr—LF、布鲁菌UPT-LF试纸的敏感性均达到10^5CFU／ml，各系列浓度检测带信号／质控带信号（T／C）值的变异系数均≤15％，lg[T／C值-临界值（cut—off值）]与lg（标准品浓度）的相关系数分别为0．996、0．998、0．999（F=1647．57、743．51、1822．17，P值均〈0．001）。鼠疫菌UPT-LF和布鲁菌UPT-LF试纸检测特异性评价菌株时，均无非特异性交叉反应，炭疽杆菌芽孢UPT—LF试纸检测枯草芽孢杆菌分离株2#芽孢、蜡样芽孢杆菌分离株1#芽孢存在非特异交叉反应，检测其他特异性评价菌株均无非特异性交叉反应。UPT-LF试纸检测鼠疫菌、炭疽杆菌芽孢、布鲁菌样品的时间分别为33、36、37min，BTA为115、115、111min；UPT-LF和BTA试纸检测0CFU／ml标准品的阴性率均为5／5；UPT-LF试纸检测炭疽杆菌芽孢、鼠疫菌、布鲁菌的敏感性均达到10^5CFU／ml，BTA试纸分别为10^6、10^6、10^5CFU／ml；模拟样品检测中，UP
- 李春凤张平平王晓英刘晓赵勇孙崇云王成彬杨瑞馥周蕾
- 关键词：耶尔森菌鼠疫免疫层析
- 基于免疫金银染色的原理快速检测人免疫球蛋白的方法学研究
- 目的:运用免疫金银染色(IGGS)的原理,在二氧化硅微球上进行快速检测人免疫球蛋白(IgG),达到肉眼可见的效果.方法:采用EDC/NHS化学偶联的方法将特定的捕获蛋白固定在直径为1mm的二氧化硅微球的表面,将偶联后的微...
- 梁臻龙王策孙崇云张帆王成彬
