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文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 3篇细胞
  • 2篇CD19
  • 1篇移植瘤
  • 1篇异种
  • 1篇异种移植
  • 1篇异种移植模型
  • 1篇质粒
  • 1篇质粒构建
  • 1篇生物力学
  • 1篇生物力学机制
  • 1篇受体
  • 1篇逆转
  • 1篇逆转录
  • 1篇逆转录病毒
  • 1篇皮下
  • 1篇皮下移植
  • 1篇皮下移植瘤
  • 1篇嵌合
  • 1篇转录
  • 1篇转染

机构

  • 4篇第二军医大学
  • 2篇复旦大学

作者

  • 4篇王扬
  • 3篇杨建民
  • 2篇徐丽丽
  • 2篇阮婕
  • 2篇唐古生
  • 2篇程辉
  • 1篇顾海慧
  • 1篇钱宝华
  • 1篇李明
  • 1篇王健民
  • 1篇胡晓霞
  • 1篇何妙侠
  • 1篇侯铁胜
  • 1篇周虹

传媒

  • 2篇白血病.淋巴...
  • 1篇中国矫形外科...
  • 1篇中华血液学杂...

年份

  • 2篇2015
  • 1篇2014
  • 1篇2000
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
骨质疏松对椎体骨折的影响机制被引量:5
2000年
李明王扬单晓巍侯铁胜
关键词:骨质疏松椎体骨折生物力学机制
CD19基因过表达K562细胞株及NOD-SCID小鼠皮下移植瘤模型的建立
2015年
目的建立人CD19基因过表达的K562细胞株(CD19.K562)NOD.SCID小鼠皮下移植瘤模型。方法克隆人CD19基因构建MigRl-CD19反转录病毒载体,转入Plat—A包装细胞,病毒上清转染K562细胞,反转录聚合酶链反应(PCR)及流式细胞术检测转染细胞CD19基因和蛋白表达,体外反复传代获得CD19-K562稳定转染细胞株,锥虫蓝染色,细胞计数检测细胞增殖,AnnexinV/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术检测细胞凋亡。CD19.K562细胞株皮下接种NOD-SCID小鼠并经体内外传代后建立移植瘤亚系CD19.K562-a,建立NOD—SCID小鼠皮下移植瘤模型。应用反转录PCR、瑞特染色、免疫组织化学等方法验证CD19.K562-a细胞性质。结果成功建立了人CD19.K562细胞稳定株,CD19阳性率(99.80±0.17)%。CD19-K562细胞增殖、凋亡未受转染及传代影响。CD19-K562细胞稳定株皮下接种NOD.SCID小鼠后经体外结合体内传代建立移植瘤亚系CD19-K562-a,其CD19阳性率为(99.78±0.04)%,CD19-K562.a和CD19.K562细胞均呈未分化形态。CD19.K562-a皮下接种NOD.SCID小鼠成功建立移植瘤模型,CD19.K562-a瘤体CD19基因表达强阳性。结论通过构建MigR1-CD19重组载体获得CD19基因过表达的K562稳定转染细胞株(CD19.K562),同时采用体外结合体内传代建立稳定成瘤的NOD.SCID小鼠移植瘤亚系CD19-K562.a并成功建立NOD—SCID小鼠皮下移植瘤模型。
王扬程辉陈科婷何妙侠阮婕唐古生杨建民
关键词:K562细胞异种移植模型
利用MigR1质粒构建CD19-CAR逆转录病毒载体优化其对人原代T细胞的转染效率被引量:3
2015年
目的优化二代CD19嵌合抗原受体(CD19-CAR)逆转录病毒载体对人原代T细胞的转染效率。方法应用重组DNA技术将CD19.CAR构建人逆转录病毒载体,转入plat-A包装细胞收集病毒上清并转染人原代T细胞及K562细胞系,采用流式细胞术检测不同条件下的转染效率,用RT-PCR方法检测目的基因的表达情况,用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α表达水平。结果①MigR1-CD19-CAR逆转录病毒载体成功构建后包装高滴度逆转率病毒;②相同条件下,MigR1-CD19-CAR逆转录病毒对K562细胞系转染效率显著高于T细胞;③对T细胞,离心120min组的转染率为(54.5±14.6)%,明显高于未离心组、离心30min组及离心60min组(P值均〈0.05);④CD3/CD28磁珠与rhIL-2联合对人T细胞活化扩增效率个体差异显著,根据扩增倍数优化个体转染时机可提高转染效率(最高达69.3%),且RT-PCR检测证实CD19.CAR目的基因在转染后72hT细胞中高效特异性转录;⑤CD19-CAR-T细胞与CD19.K562细胞共培养组IFN-γ、TNF-α表达水平均增加,分别为(13230±1543)pg/ml、(4217±211)pg/ml,与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P值均〈0.01)。结论通过MigR1-CD19-CAR逆转录病毒载体转染人原代T细胞,并通过延长离心转染时间、根据扩增倍数确定个体转染时机而成功优化转染效率,RT-PCR检测CD19-CAR目的基因在转染后人T细胞中高效特异性转录,CD19-CAR-T细胞特异性识别靶细胞引发IFN-γ、TNF-α表达水平增加。
王扬唐古生徐丽丽阮婕程辉周虹华亦斐胡晓霞顾海慧钱宝华王健民杨建民
关键词:质粒转染细胞因子类
嵌合抗原受体T细胞在B细胞性血液肿瘤中的研究进展被引量:2
2014年
嵌合抗原受体(CAR)转染的T细胞通过释放细胞因子及细胞毒性T淋巴细胞(CTL)效应可高效杀伤靶抗原阳性的肿瘤细胞,且不受相容性复合体(MHC)的限制.近年欧美多个癌症中心的临床试验表明,CD19靶向的CAR-T细胞输注不仅可使复发状态的B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者达完全缓解,且分子水平的微小残留病(MRD)也可转阴.其在慢性淋巴细胞白血病、B细胞性恶性淋巴瘤患者中也取得了显著疗效,相信不久的将来该技术必将成为肿瘤综合治疗的重要手段.
徐丽丽王扬杨建民
关键词:免疫治疗基因治疗
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