目的:探讨白藜芦醇在酒精诱导的SH-SY5Y细胞损伤中的抗氧化及抗凋亡作用,揭示白藜芦醇抗酒精神经性损伤的作用机制.方法:SH-SY5Y细胞经维甲酸诱导成正常神经细胞后以白藜芦醇预处理SH-SY5Y细胞24 h,用酒精诱导氧化应激及凋亡的产生.MTT方法检测白藜芦醇处理组与对照组SH-SY5Y细胞活力;用ELISA试剂盒检测不同实验组的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及细胞内总活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量、流式细胞术检测不同实验组细胞凋亡水平;采用RT-PCR方法检测抗氧化应激凋亡通路中关键基因SOD1、SOD2、过氧化氢酶及Caspase3和PRAP的m RNA表达水平.结果:MTT结果显示,与对照组比较,白藜芦醇(25、50、100μmol/L)对SH-SY5Y细胞的细胞毒性均在20%以下,300 mmol/L酒精可致近50%SH-SY5Y细胞死亡;25-100μmol/L白藜芦醇可有效对抗300 mmol/L酒精对SHS Y5Y引起的细胞毒性作用;S O D活性显示100μmol/L白藜芦醇预处理组SOD含量(0.391±0.011)明显高于非处理组(0.286±0.019),而R O S结果显示酒精诱导组(29234.79±2288)明显高于白藜芦醇25、50、100μmol/L预处理组(18023.26±1359.66;13528.44±1078.99;8219.87±635.99);RT-P C R结果显示,与300m m o l/L酒精比较,25、50和100μm o l/L白藜芦醇可上调SOD1(0.623±0.032;0.686±0.0213;0.854±0.014)、S O D2(1.001±0.058;0.938±0.021;1.190±0.078)、过氧化氢酶(1.828±0.067,2.018±0.079;2.196±0.100)及PARP(2.828±0.161;3.018±0.208;4.196±0.190)m RNA表达量;不同剂量白藜芦均可下调Caspase3 mR NA表达量(5.828±0.367;5.318±0.279;4.196±0.200).结论:本实验结果揭示了300 mmol/L的酒精可以引起SH-SY5Y细胞氧化应激与凋亡的发生表明白藜芦醇通过介导氧化应激及氧化应激引起的抗凋亡途径发挥了神经保护作用.
