张水英 作品数:6 被引量:9 H指数:2 供职机构: 云南农业大学植物保护学院 更多>> 发文基金: 云南省教育厅科学研究基金 云南省高校科技创新团队支持计划资助项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法 本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法,属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后,利用水稻条纹病毒单克隆抗体,建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该... 李凡 张水英 李月月 李梅蓉 谭冠林 杨耀珠 马庆文献传递 4种提取试剂对三七Y病毒RNA提取效果的比较 被引量:2 2014年 为比较不同核酸提取试剂对三七Y病毒(Panax virus Y,Pn VY)RNA提取效果的差异,本文以感染病毒病的三七叶片为研究对象,选取了3种商业化的RNA提取试剂盒和优化的CTAB总核酸提取法对提取Pn VY RNA的质量、操作时间、使用成本、RT-PCR扩增效率及DNA去除效果等方面进行了比较。结果表明:北京全式金生物技术有限公司的Trans Zol Plant试剂提取的总RNA质量最高,RT-PCR扩增效率较高,DNA去除完全,但成本也最高;宝生物工程(大连)有限公司的RNAiso Plus Total RNA试剂提取的总RNA质量、RT-PCR扩增效率和使用成本居中,无DNA残留;北京百泰克生物技术有限公司的TRIpure试剂提取的总RNA质量、RT-PCR扩增效率最低,成本居中,也无DNA残留,但耗时最短;而CTAB法提取的总核酸质量居中,RT-PCR扩增效率最高,成本最低,能同时提取到RNA及DNA,但耗时最长。对于复合感染DNA和RNA两种核酸类型病毒的样品来讲,CTAB法为最佳选择;对仅由RNA病毒侵染的材料而言,综合考虑后,Ta KaRa的RNAiso Plus Total RNA提取试剂是较为理想的选择。 李晓静 刘芳 李梅蓉 李月月 张水英 李凡关键词:CTAB法 应用RT-PCR和dot-ELISA方法检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒 被引量:2 2016年 本文比较了RT-PCR和dot-ELISA两种方法对单头灰飞虱携带水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)的检出率、检测灵敏度和检测成本。结果表明,两种方法均能检测到单头灰飞虱体内的RSV,RT-PCR检测单头灰飞虱体内RSV的阳性检出率比dot-ELISA方法低11.79%-15.77%,但RT-PCR的检测灵敏度比dot-ELISA高10倍,RT-PCR技术的检测成本比dot-ELISA的高。结果暗示,对于单头介体昆虫中的病毒检测,RT-PCR技术的检出率不一定比dot-ELISA的高。综合考虑后,如对室外大批量灰飞虱进行带毒率检测时可采用dot-ELISA方法,如需准确分析单头灰飞虱体内RSV时可采用RT-PCR方法。 张水英 蒋春和 兰平秀 张雪峰 李凡关键词:水稻条纹病毒 灰飞虱 RT-PCR DOT-ELISA 2013-2014年云南主要稻区病毒病调查及RSV的分子变异 被引量:5 2015年 于2013-2014连续两年对云南主要水稻种植区的水稻病毒病进行了调查,发现当前为害云南水稻的病毒病主要有水稻条纹叶枯病、南方水稻黑条矮缩病、水稻矮缩病和水稻齿叶矮缩病。其中,条纹叶枯病是当前为害云南水稻最严重的病毒病,部分田块最高发病率可达15.0%;其次是水稻矮缩病,调查田块最高发病率达10.0%;南方水稻黑条矮缩病的平均发病率达5.3%;水稻齿叶矮缩病只在局部地区发生且发病率都不高。对云南当前发生较普遍的RSV不同分离物RNA3基因间隔区(IR3)及RNA4基因间隔区(IR4)开展了分子变异分析。根据不同RSV分离物IR3、IR4核苷酸序列构建系统进化树,所分析的RSV分离物均可被划分为两个组,部分云南分离物和云南以外的中国、日本、韩国分离物聚在Ⅰ组,其余绝大多数云南分离物单独聚在Ⅱ组。不同RSV分离物的IR3和IR4长度差异较大,按每10个核苷酸的长度差异进行划分,均可划分为A、B、C三种不同的类型。部分RSV云南分离物IR3、IR4中有17-21nt的序列与其水稻、小麦和大麦等寄主的部分序列相同,这可能是病毒在进化过程中与寄主植物发生了重组。云南RSV分离物的IR3、IR4分子变异较大,可能与其特殊的地理、生态条件有一定的相关性。 张水英 谭冠林 任国敏 李梅蓉 李月月 兰平秀 桂富荣 王海宁 朱书生 李凡关键词:水稻病毒病 水稻条纹病毒 基因间隔区 分子变异 不同烟草种质感染番茄斑驳花叶病毒的细胞病理特征 2024年 番茄斑驳花叶病毒(tomato mottle mosaic virus,ToMMV)比同属烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)和番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)在茄科作物上的侵染性更强,为明确受ToMMV侵染后烟草不同表现症状对应的细胞病理学特征。本文构建了ToMMV的侵染性克隆载体,分别对感染ToMMV的不同烟草组织中的病毒粒子及不同表现症状的烟草细胞超微结构进行了观察分析。结果表明ToMMV为长度约220~310 nm,直径约16~18 nm的杆状粒子,感染ToMMV的珊西烟(Nicotiana tabacum var.Xanthi nc)种子也可携带病毒。ToMMV病毒粒子以分散或整齐分层排列于细胞质或液泡内。感染ToMMV的珊西烟和黄花烟(N.rustica)细胞均产生多泡体结构、大量次级小囊泡以及髓鞘样结构,线粒体嵴减少或消失。其中,症状表现为花叶、畸形的珊西烟叶片细胞中叶绿体变化较大,有膜破碎、大量液泡进入的现象;线形叶细胞中多泡体结构和次级小囊泡数量更多;而表现为系统性坏死的黄花烟叶片细胞中叶绿体变化较小。本研究ToM-MV侵染性克隆的构建和不同烟草被感染后的细胞病变观察为进一步研究ToMMV的致病机理以及与寄主的互作等提供了重要条件和依据。 李月月 李月月 张水英 张天毅 兰平秀 谭冠林 李凡利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法 本发明提供一种利用dot-ELISA检测单头灰飞虱体内水稻条纹病毒的方法,属于植物保护领域。该发明通过对灰飞虱的采集和研磨后,利用水稻条纹病毒单克隆抗体,建立检测单头介体灰飞虱携带水稻条纹病毒的dot-ELISA体系。该... 李凡 张水英 李月月 李梅蓉 谭冠林 杨耀珠 马庆文献传递