黄超华
- 作品数：20 被引量：58H指数：4
- 供职机构：深圳出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家高技术研究发展计划深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种非洲猪瘟抗原及其制备的荧光纳米晶试纸条
- 本发明公开了一种非洲猪瘟重组抗原及利用其制备的非洲猪瘟抗体检测荧光纳米晶试纸条。本发明利用基因工程的方法，获得非洲猪瘟病毒的特异性结构蛋白VP73蛋白作为重组抗原，其基因序列如序列表所示。将纯化后的VP73蛋白划线包被在...
- 吕建强花群义杨俊兴张彩虹曹琛福孙洁刘建利陶虹宗卉廖立珊唐金明曾少灵阮周曦黄超华
- 文献传递
- H5N8亚型流感病毒双重实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价
- 2018年
- 流感病毒变异迅速,为研究和建立一种针对H5 N8亚型流感病毒核酸准确灵敏的检测方法,分别选择H5 N8亚型流感毒株序列相对保守的HA基因和NA基因作为H5 N8亚型流感病毒检测的靶序列,设计两套特异性的引物和探针,选择两种不同的荧光标记,建立基于TaqMan探针的双重荧光RT-PCR快速检测H5 N8亚型禽流感病毒检测方法。实验结果表明,所建立的H5 N8亚型流感病毒real time RT-PCR检测方法 HA基因检测的灵敏度为10-5,NA基因检测的灵敏度为10-5,重复性好,特异性佳。结果表明:本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H5 N8亚型流感病毒,耗时短,可很快作出判定结果,适用于H5 N8流感病毒的分子生物学检测和监测。对于控制流感流行,减少经济损失,最大限度保护社会人群健康具有很大意义。
- 孙洁廖立珊廖立珊于力刘建利刘建利杨俊兴陶虹杨俊兴曾少灵林彦星黄超华
- 蓝舌病16型病毒核心样颗粒的获取与鉴定被引量：2
- 2019年
- 为了制备一种新型基因工程疫苗BTV-16 VLP疫苗,将蓝舌病病毒16型VP3与VP7基因片段插入杆状病毒双表达载体pFastBac Dual质粒中,通过转染Sf9细胞,同时表达VP3与VP7蛋白。经负染后电镜观察到有与蓝舌病病毒形态相似的核心样颗粒,表明蓝舌病VP3与VP7蛋白能自主组装形成核心样颗粒,并通过Western Blot试验验证该核心样颗粒与蓝舌病病毒具有相同的抗原性。因此本研究成功构建出16型蓝舌病病毒核心样颗粒,为病毒样颗粒装配打下了基础,为制备16血清型BTV VLP疫苗做好前期准备。
- 王潇黄超华黄超华史卫军曹琛福史卫军
- 关键词：蓝舌病重组杆状病毒
- 一种用于FMDV和SVA鉴别的试剂、方法及应用
- 本申请公开了一种用于FMDV和SVA鉴别的试剂、方法及应用。本申请的试剂包括FMDV引物探针组和SVA引物探针组；FMDV引物探针组的上下游引物分别为Seq ID No.1和2所示序列，探针为Seq ID No.3或其反...
- 花群义林彦星花群俊曹琛福杨俊兴黄超华曾少灵阮周曦张彩虹林庆燕
- 文献传递
- 一种蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法
- 本申请公开了一种同时表达蓝舌病病毒vp3和vp7蛋白的大肠杆菌以及蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法。本申请将蓝舌病病毒vp3基因和vp7基因插入到双表达载体pETDuet‑1，构建原核双表达质粒pETDuet‑VP3‑VP...
- 黄超华曹琛福花群义史卫军杨俊兴林彦星阮周曦曾少灵王潇
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型RPA恒温扩增检测方法的建立及初步应用被引量：2
- 2018年
- 利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),以猪圆环病毒2型Cap基因的保守序列为靶序列设计并筛选出一组特异性的引物和探针,建立了快速检测猪圆环病毒2型核酸的RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,猪圆环病毒1型(PCV1)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)核酸检测结果均为阴性,灵敏性高,最低可检出核酸浓度为0. 87×10-4ng/μL,简单快速,且重复性好。利用所建立的RPA方法对183份临床样品进行检测,结果与实时荧光PCR方法符合率为98. 9%。本研究为猪圆环病毒2型核酸的快速检测提供了一种新方法,尤其适合基层实验室或养猪场的快速检测。
- 黄超华张全红曹琛福王潇林彦星史卫军花群义
- 关键词：猪圆环病毒2型
- 小反刍兽疫病毒特异性IgY抗体的制备及双抗夹心ELISA检测方法的建立被引量：2
- 2019年
- 本研究制备了针对小反刍兽疫PPRV全病毒特异性卵黄抗体,利用PPRV N蛋白特异性单克隆抗体和PPRV IgY为主要材料,建立了PPRV双夹心ELISA检测方法检测小反刍兽疫病毒。用该ELISA方法分别检测小反刍兽疫病毒、蓝舌病病毒、鹿流行性出血病病毒、水泡性口炎病毒、赤羽病病毒、口蹄疫病毒,结果表明该ELISA方法可以特异性检出PPRV而与其他病毒间无交叉。用该ELISA和RT-PCR同时检测162份临床样品,结果表明ELISA的特异性和敏感性分别为99.2%和93.7%,两种方法的符合率为98.1%。该方法的建立为小反刍兽疫病毒的初筛检测及小反刍兽疫流行病学调查提供了经济、快速、有效的方法,适用于设备条件不足的基层实验室。
- 孙洁廖立珊曾绍英朱琳陶虹林庆燕黄超华花群义杨俊兴
- 关键词：小反刍兽疫卵黄抗体双夹心ELISA
- A型动物流感病毒RT-RPA检测方法的建立及初步应用被引量：9
- 2018年
- 根据A型流感病毒M基因核苷酸序列设计引物及探针,建立了一种灵敏度高、特异性强、检测迅速、操作简便的重组酶聚合酶扩增技术（RT-RPA）。选用常见动物疫病病原验证引物探针的特异性,设计多对引物及探针,筛选出最适反应体系及反应条件,并与实时荧光RT-PCR方法比较。结果显示,本研究建立的RT-RPA方法特异性强,只有A型动物流感病毒呈阳性,其他相关常见病原均为阴性;反应时间短,检测反应时间仅需20 min;灵敏度高,最低可检测到A型动物流感病毒核酸浓度为0.96×10-2g/mL。与实时荧光RT-PCR方法相比,其灵敏度稍低。本研究建立的检测A型动物流感病毒的RT-RPA方法特异性强,灵敏性高,操作简单,检测快速,适合现场检测以及在基层实验室推广应用。
- 王潇曹琛福曹琛福林彦星黄超华贾伟新
- 禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法的建立被引量：3
- 2018年
- 为了建立一种简便、快速的禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)H7亚型的检测方法,根据GenBank中禽流感病毒H7亚型的HA保守序列,并按照RPA引物探针的要求,设计多对引物及探针,通过条件的优化,建立禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法,并与实时荧光定量PCR方法进行比较。特异性试验结果显示,该方法特异性强,只有禽流感病毒H7亚型出现特异性曲线;灵敏性试验结果显示,该方法能检测到禽流感病毒H7亚型最低浓度为0.24×10-3μg/mL,与实时荧光定量PCR方法相比,灵敏性稍差,但该方法的检测快速,仅需要20min。表明所建立的禽流感病毒H7亚型RT-exoRPA检测方法简单、快速,适合用于禽流感病毒H7亚型的现场检测。
- 王潇王潇曹琛福黄超华林彦星花群义
- 水疱性口炎病毒免提取核酸荧光定量PCR鉴别检测方法的建立被引量：3
- 2018年
- 为建立可快速鉴别水疱性口炎病毒印第安纳型(VSV-IND)和新泽西型(VSV-NJ)免提核酸的荧光定量PCR检测方法,根据VSV-IND和VSV-NJ两种血清型相对保守的L基因序列,设计2对特异性引物和2条探针,探针用不同的荧光基团进行标记。经过对各反应条件的优化,建立了直接从样品中鉴别VSV-IND和VSV-NJ的荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性和敏感性进行分析。结果显示,该直扩荧光定量PCR能准确鉴别VSV-IND和VSV-NJ,两者没有交叉反应现象,对其他几种相似病原的灭活抗原,如口蹄疫病毒(FMDV)、猪水疱病病毒(SVDV)、蓝舌病病毒(BTV)、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)等检测均呈阴性。对10倍系列稀释的水疱性口炎灭活病毒液的检测敏感性可达10-5,与传统的荧光定量PCR的检测敏感性相当。该方法无需提取核酸,可在2h内完成对样品的检测,结果准确、快速、灵敏,为印第安纳型和新泽西型水疱性口炎病毒的特异性鉴别提供了一种切实可行的方法。
- 张彩虹林彦星杨俊兴曹琛福吕建强黄超华祁振强林庆燕花群义
- 关键词：水疱性口炎病毒
