任晓楠 作品数:24 被引量:27 H指数:3 供职机构: 上海市公共卫生临床中心 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市科学技术发展基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
一种肾人源化小鼠模型的构建方法 本发明属于生物医学技术领域,涉及实验动物模型的构建方法及构建的实验模型,具体涉及一种基于人源细胞构建肾人源化小鼠模型的方法及构建的肾人源化小鼠模型。本发明的构建方法包括步骤:将间充质干细胞、人脐静脉内皮细胞和从尿液中分离... 周晓辉 蒋超 王超 任晓楠 李顺 陈丽香 武斌 秦波音 杨华 彭秀华 徐春华用于肝脏疾病研究的人源化小鼠模型概述 被引量:7 2014年 肝脏疾病是危害人类健康的重要疾病之一,合适的小动物模型的缺乏在很大程度上制约了肝脏疾病的相关研究。人源化小鼠作为重要动物模型之一,在肝脏疾病的研究中有巨大的应用价值。本文对早期的uPA小鼠、FAH小鼠、TK-NOG小鼠和近年来的AFC8小鼠等几种应用较为广泛且有代表性的人源化小鼠模型及其在肝脏疾病研究中的应用进行了对比分析,阐述了它们各自的模型原理和优缺点,以期对人源化小鼠应用于人类肝脏疾病的研究具有较为直观的认识。 任晓楠 周晓辉关键词:肝脏疾病 受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型H1N1流感病毒感染小鼠记忆性CD8^+T细胞的应答 2020年 受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein kinase 3,RIPK3)是坏死复合体的关键成分之一,介导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)的发生。前期研究发现流感抗原特异性CD8^+T细胞的初次应答部分依赖于RIPK3分子,为探讨其在记忆性CD8^+T细胞应答中的作用,对初次感染后的C57BL/6小鼠在免疫记忆阶段进行了再次感染,并用流式细胞仪检测了流感病毒特异性的记忆性CD8^+T细胞的表型和功能。结果发现小鼠初次感染甲型H1N1流感病毒株A/Puerto Rico/8/34后37d,RIPK3敲除小鼠的CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的能力均显著低于野生型小鼠;在再次感染相同病毒时,RIPK3敲除小鼠流感病毒特异性CD8^+T细胞比例及分泌细胞因子IFN-γ的能力依旧显著低于野生型小鼠;而CD8^+中枢型记忆性T细胞(TCM)比例显著高于野生型小鼠,效应型记忆性T细胞(TEM)或效应性T细胞(TEff)比例却显著低于野生型小鼠。提示RIPK3分子参与调节流感病毒特异的记忆性CD8^+T细胞诱生数量和分泌细胞因子功能,并影响其TCM与TEM/TEff的比例,为深入探索病毒特异的记忆性CD8^+T细胞应答的分子机制提供了新线索。 秦波音 王超 刘洋 任晓楠 方钟 李顺 周晓辉关键词:甲型H1N1流感病毒 PCR和限制性内切酶在uPA-SCID小鼠基因型鉴定中的应用 2015年 目的 建立一种简便、快捷、准确的基因型鉴定方法用于uPA-SCID小鼠的基因型鉴定.方法 应用PCR技术与限制性内切酶相结合的方法检测uPA-SCID小鼠的基因型.结果 uPASCID小鼠的uPA基因型鉴定结果显示:uPA基因野生型在153 bp有条带,纯合子在337 bp有条带,杂合子在337bp、153bp有条带.uPA-SCID小鼠的SCID基因型鉴定结果显示:uPA-SCID小鼠SCID基因突变体在38 bp、26 bp有条带,杂合子在64 bp、38 bp、26 bp有条带,野生型在64 bp有条带.结论 建立的基因型鉴定方法简便易行、可靠,通过该方法可以确定uPA-SCID小鼠的基因型,筛选出需要的纯合子uPA-SCID小鼠. 徐春华 陈丽香 任晓楠 杨玉琴 彭秀华 蔡家麟 周晓辉 周文江关键词:基因型鉴定 限制性内切酶 HIV-1B`/C、A/E重组亚型pol基因DNA疫苗的构建及其免疫原性研究 被引量:1 2012年 目的构建表达中国BYC和A/E重组亚型HIV-1pol基因的DNA疫苗,并比较其免疫原性。方法按哺乳动物密码子使用频率对HIV-1CN54(BYC重组亚型)与AE2f(A/E重组亚型)的pol基因进行序列优化,构建DNA疫苗,通过Westernblotting验证其体外表达效率。通过肌肉注射途径免疫小鼠,然后无菌分离小鼠脾淋巴细胞并分别在ConsensusBPol和HIV-1AE2f Pol肽库刺激下,采用酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测抗原特异性IFN-γ的分泌情况,观察比较两个DNA疫苗免疫原性特征。结果DNA测序结果表明两个pol基因重组质粒构建正确,且两个DNA疫苗均能在体外有效表达。ConsensusBPol肽库刺激后,pSVAE—Pol活化的总T细胞免疫反应为(636±178)个斑点形成细胞数/10。个脾淋巴细胞,pSVCN—Pol活化的总T细胞免疫反应为(468±265)个斑点形成细胞数/10^6个脾淋巴细胞(P=0.412);HIV-1 AE2fPol肽库刺激后,pSVAE—Pol活化的总T细胞免疫反应为(1378±611)个斑点形成细胞数/10^6个脾淋巴细胞,pSVCN—Pol活化的总T细胞免疫反应为(713±61)个斑点形成细胞数/10^6个脾淋巴细胞(P=0.134)。将总T细胞反应按肽池分解后发现,pSVAE—Pol活化的特异性T细胞反应主要集中于Pol 1肽池;而pSVCN—Pol除了能够活化针对Pol1的T细胞反应之外,也可以较好地活化针对ConsensusBPol2肽池的T细胞反应。结论两个亚型PolDNA疫苗中以AE-Pol的免疫原性更强,但其所活化的T细胞表位识别谱不及CN—Pol广泛。HIV-1疫苗可能需将两者结合在一起。 万延民 任艳琴 王婧 任晓楠 胡志东 仇超 徐建青关键词:HIV T淋巴细胞 一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法 本发明属于生物医学领域,具体涉及一种乙型肝炎病毒慢性转染模型的构建方法。本发明方法基于高压水动力法,转染HBV质粒至造模实验鼠(优先采用4~8周龄雄性C3H/HeN),构建HBV慢性转染模型;本发明方法构建获得的乙型肝炎... 周晓辉 彭秀华 任晓楠 陈丽香 徐春华 方钟文献传递 人源化小鼠模型在病毒性肝炎等肝脏疾病研究中的应用 被引量:1 2019年 肝炎病毒感染相关的肝脏疾病对人类有着巨大的危害,但相关动物模型仍有各种缺陷.人源化小鼠模型因可更好地模拟人体情况,在肝脏疾病的研究中扮演着非常重要的角色.在肝脏疾病研究的历程中,用于肝脏疾病研究的人源化小鼠模型由最初的肝脏嵌合小鼠模型,发展为肝脏与免疫双嵌合小鼠模型,又在此基础上逐步建立了肝炎病毒的感染小鼠模型.迄今,人源化小鼠模型已在肝脏疾病的研究领域中发挥着不可或缺的作用.本文对在肝脏疾病中发挥重要作用的人源化小鼠模型进行了整理与阐述. 任晓楠 周晓辉关键词:肝炎病毒 药物代谢 实验动物从业人员环境健康安全管理体系中生物安全培训的重要性 被引量:10 2018年 环境健康安全(environment health and safety,EHS)管理体系是指环境、健康、安全的组织结构,以及相关责任、流程和资源等相结合的统一管理系统,而生物安全是EHS管理体系中的重要内容之一。本文从实验动物从业人员EHS管理体系的角度探讨生物安全管理及相关培训在其中的重要作用,拟从EHS管理体系,实验动物从业人员职业风险分析以及生物安全培训等方面进行简要综述。 宋志刚 刘芳 任晓楠 金玫蕾 李顺 顾明媚 佘佳磊 周晓辉Alb-cre/DTR小鼠可诱导性肝损伤模型的建立 被引量:4 2016年 目的建立Alb-cre/DTR双转基因小鼠模型并进行相关表型分析,在此基础上建立可诱导性肝损模型,用于肝脏疾病的相关研究。方法将引进的Alb-cre和DTR小鼠扩繁后,通过杂交的方式获得双转基因小鼠。提取小鼠尾部组织DNA,利用PCR方法进行基因型鉴定。在双转基因小鼠上腹腔注射白喉毒素,之后在不同时间点进行称重、采血,检测血清ALT、AST水平。结果将Alb-cre和DTR小鼠杂交、筛选后获得了Alb-cre/DTR双转基因小鼠,对该小鼠使用0.625 ng/g剂量的白喉毒素,可使小鼠血清中ALT与AST水平显著升高,解剖小鼠后观察到肝整体变白,HE染色结果显示肝细胞明显坏死。结论成功建立可诱导特异性肝损伤小鼠模型。 任晓楠 任蓉蓉 刘雪 杨华 秦波音 周晓辉关键词:转基因 小鼠 利用高压水动力法建立乙型肝炎病毒转染小鼠模型及初步评价 被引量:1 2015年 目的利用高压水动力法建立C57BL/6小鼠乙型肝炎病毒(HBV)转染模型,并对其进行初步的观察及药物评价。方法将10μg腺病毒相关病毒载体(pAAV)-HBVl.2质粒采用高压水动力法尾静脉注入C57BL/6小鼠体内,连续5周观察小鼠血清中的HBsAg、HBVDNA等表达情况,并利用该模型初步评价拉米夫定的抗病毒效果。结果pAAV-HBVl.2质粒高压水动力法注射C57BL/6小鼠后,在小鼠体内分泌HBV的抗原及病毒颗粒。尾静脉注射2周内小鼠血清中HBsAg阳性率为100%,连续观察至第5周,22.2%小鼠血清中HBsAg有持续表达。小鼠血清中HBVDNA水平在1~4周时含量明显高于≥10^3拷贝/mL(临床患者阳性标准)。肝组织病理学观察(HE染色)可见不同程度肝细胞炎性改变,肝组织免疫组化可见到HBsAg和HBcAg表达。另外,使用抗病毒药物拉米夫定干预该小鼠模型,其血清中HBVDNA水平明显下降。结论初步建立的C57BL/6小鼠HBV转染模型,是一个适用于药物筛选及疫苗研究的有效模型,为抗病毒治疗研究奠定了一定基础。 彭秀华 陈丽香 任晓楠 施碧胜 徐春华 周文江 周晓辉关键词:抗病毒药物