以来源于不动杆菌Acinetobacter sp.SM04的过氧化物酶A4-Prx的毕赤酵母工程表达菌株GS115/p PIC9K-A4-Prx为研究对象,从培养液中纯化重组过氧化物酶A4-Prx,分析其ZEA降解活力,并研究过氧化物酶A4-Prx的酶学特性。本论文首先研究了蛋白的纯化方法,通过一系列分离纯化手段得到纯的过氧化物酶A4-Prx,最终纯化倍数约为12,HPLC实验结果表明纯化后的过氧化物酶A4-Prx具有ZEA降解能力,且ZEA降解率达到63%。对过氧化物酶A4-Prx进行酶学特性研究,结果表明,p H和温度均对A4-Prx的过氧化物酶酶活有显著影响,p H 9.0和反应温度60℃时酶活最高,A4-Prx的最大酶活是204.1 U,此时过氧化氢浓度为9.7 m M。A4-Prx过氧化物酶反应受EDTA的抑制作用明显。本研究为过氧化物酶的酶学研究奠定了基础,为后续的A4-Prx降解机理研究提供先决条件,推动生物降解ZEA研究的进展。
