陆利
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学动力工程及工程热物理更多>>
- 低海拔引种栽培玛咖主要有效成分分析被引量：2
- 2016年
- 为给低海拔地区栽培玛咖的开发和推广提供参考依据,以引种栽培基地湖南省湘西自治州不同海拔样地的玛咖为材料,采用醇浸取法和高效液相色谱法,对其生物碱、玛咖酰胺和玛咖烯等主要有效成分进行了测定与分析。测定结果表明：其总生物碱含量为0.707%~2.376%;玛咖酰胺含量为0.083 8%~0.529 2%,玛咖烯含量为0.008 3%~0.070 6%,玛咖酰胺＋玛咖烯含量为0.099 7%~0.537 6%。分析结果表明：湘西低海拔地区栽培的玛咖其主要有效成分含量与秘鲁原产地的相当,说明海拔高度对玛咖有效成分含量无显著影响。文中因此认为,玛咖可以在低海拔地区大量推广栽培。
- 陆利黄瑞春王启业张超徐少东姚锐王义强
- 关键词：玛咖生物碱高效液相色谱法
- 大肠杆菌CFT073中Curli系统重要基因csgF的克隆、表达、纯化和结构分析
- 2016年
- 【目的】对大肠杆菌CFT073中Culri系统的重要蛋白CsgF进行高效表达,探索其纯化条件和三维结构,为研究Curli生物合成机制提供理论基础。【方法】以大肠杆菌CFT073基因组为模板扩增csgF基因,构建pET28a-csg F(nsp)-N-6His、pET28a-csg F(20-129)-N-6His、pET28a-csg F-C-6His和p ET28a-csg F(nsp)-C-6His等重组质粒,转化到大肠杆菌DH5α并在BL21(DE3)中诱导表达;通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定CsgF蛋白在大肠杆菌中的表达情况,用Ni-NTA His Bind Resin和凝胶排阻层析色谱纯化重组蛋白CsgF,SDS-PAGE和Western blotting方法鉴定分析;用Pull down实验研究CsgF与CsgG蛋白的相互作用,同源模建方法分析重组蛋白CsgF的三级结构。【结果】克隆了目的基因csg F,并筛选出稳定CsgF蛋白的条件:50 mmol/L Sodium acetate(pH 5.0)、150 mmol/L NaCl、5%Glyercol;CsgF与CsgG存在相互作用,CsgF三维结构模型显示为(β/α)。【结论】获得了高纯度稳定的CsgF重组蛋白及其三维结构,为进一步研究CsgF结构与功能奠定了基础。
- 陆利曹保华王义强
- 关键词：基因克隆
- 美国香柏扦插育苗研究被引量：1
- 2017年
- 为提高美国香柏在长沙地区的扦插繁殖效率,对美国香柏二年生硬枝采用不同基质配比及不同激素种类(KIBA、NAA、IBA、ABT6)、浓度(1 000、3 000、8 000、12 000 mg/L)、速蘸时间(10、20、30 s)处理的扦插效果进行了研究。结果表明,基质配比以珍珠岩:泥炭土3:1为佳,生根率可达61.1%;在8 000 mg/L KIBA速蘸处理20 s的条件下,插穗生根率高达93.33%,平均生根数8.67条/株,平均根长6.23 cm;适宜的基质配比和合适的激素种类、浓度及速蘸时间对美国香柏扦插效果均有显著影响。
- 徐少东谭益民王启业米小琴黄瑞春姚锐陆利王义强
- 关键词：扦插繁殖基质激素
- 基于杨木发酵产异丁醇大肠杆菌工程菌构建被引量：3
- 2015年
- 【目的】克隆异丁醇生物合成途径中的2个关键酶基因——乙醇脱氢酶基因(adh2)和2-酮酸脱羧酶基因(kivd),构建产异丁醇的工程大肠杆菌;进一步以杨木水解液为底物进行发酵,以期能利用木质纤维原料发酵生产异丁醇,为异丁醇的可再生生产提供研究基础。【方法】分别以酿酒酵母总DNA和乳酸乳球菌总DNA为模板,通过PCR扩增异丁醇生物合成途径关键酶基因adh2和kivd。同时构建重组质粒pSTV-29-adh2和pSTV-29-kivd,分别转化大肠杆菌DH5α,构建重组菌株E.coli DH5α-pSTV-29-adh2和E.coli DH5α-pSTV-29-kivd。进一步构建串联表达质粒pSTV-29-adh2-kivd,导入大肠杆菌DH5α中,构建重组工程菌E.coli DH5α-pSTV-29-adh2-kivd。各重组菌株经IPTG诱导表达后,采用BCA蛋白定量试剂盒测定其粗酶提取液中目的蛋白含量,并通过SDS-PAGE电泳检测重组菌株E.coli DH5α-pSTV-29-adh2,E.coli DH5α-pSTV-29-kivd和E.coli DH5α-pSTV-29-adh2-kivd中目的基因adh2和kivd的蛋白表达量。利用各重组菌E.coli DH5α分别以葡萄糖和杨木水解液为原料发酵生产异丁醇,采用气相色谱检测发酵液中异丁醇含量。【结果】重组质粒pSTV-29-adh2,pSTV-29-kivd和pSTV-29-adh2-kivd经菌液PCR、酶切及测序验证,得到的片段大小与目的基因adh2(1 067 bp)和kivd(1 667 bp)大小和质粒载体pSTV-29(2 999 bp)大小相符,adh2和kivd基因测序结果与NCBI中对应基因序列完全一致,表明表达载体pSTV-29-adh2,pSTV-29-kivd和pSTV-29-adh2-kivd构建成功。蛋白含量测定结果和SDS-PAGE电泳检测结果显示,目的基因adh2,kivd的蛋白在各重组菌中均得到表达,在电泳图谱中的对应位置40 k D(Adh2蛋白分子质量40 k D)和70 k D(Kivd蛋白分子质量70 k D)处均有明显的蛋白特征条带,且adh2基因编码的乙醇脱氢酶蛋白比kivd基因编码的2-酮酸脱羧酶蛋白表达量高,而空白对照菌株未出现任何蛋白特征条带,表明各重组菌E.coli DH5α-pSTV-29-adh2,E.coli
- 王启业王义强田宇彭牡丹陈章靖陆利
- 关键词：异丁醇重组大肠杆菌乙醇脱氢酶基因
- Curli细胞分泌途径中重要蛋白的表达纯化及结构功能分析
- 淀粉样蛋白纤维(Amyloids)是一类错误折叠引发疾病的蛋白聚集体。近年来人们在细菌、真菌、蛛形钢动物、鱼和哺乳动物中发现了功能淀粉样蛋白纤维。Curli是一种典型的功能淀粉样纤维;在生物膜形成过程中，Curli是细胞...
- 陆利
- 关键词：淀粉样蛋白蛋白纯化
- 糖丁酸梭状芽孢杆菌BAA-117利用不同碳源发酵产燃料丁醇的研究被引量：1
- 2014年
- 利用木质纤维原料替代传统粮食原料发酵可降低丁醇生产成本。先将杨木纤维进行酶解糖化,然后利用糖丁酸梭状芽胞杆菌BAA-117进行丁醇发酵。研究结果表明:BAA-117对单糖的利用率为混合糖(葡萄糖27.5 g/L,阿拉伯糖3 g/L,木糖19.5 g/L)>葡萄糖>木糖>阿拉伯糖;杨木蒸汽爆破渣通过酶解后产生的总还原糖含量为46.8 g/L,经过72 h无添加发酵,丙酮、丁醇与乙醇总溶剂含量为6.6 g/L,其中丁醇产量为4.8 g/L,ABE总溶剂的生产速率为0.089 g/(L·h);在补充培养基后,ABE总溶剂含量为9.53 g/L,其中丁醇产量为6.88g/L,ABE总溶剂的生产速率为0.13 g/(L·h);添加20 g/L的混合糖后,丁醇产量达到7.28 g/L,ABE总溶剂的生产速率为0.141 3 g/(L·h),比单杨木纤维发酵丁醇产量提高了58.8%。
- 彭牡丹王义强王启业陆利
- 关键词：酶解厌氧发酵丁醇
