孟涛
- 作品数：16 被引量：50H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丙烯酰胺对雌性Wistar大鼠学习记忆和长时程增强的影响及其可能机制被引量：8
- 2017年
- 目的研究重复sc给予丙烯酰胺(AM)28 d后对学习记忆的影响及其可能的作用机制,以及单次sc给予AM后对大鼠海马高频刺激后群峰电位(PS)幅度改变的影响。方法雌性Wistar大鼠分别sc给予AM 10,20和40 mg·kg-1(给药当天计为第1天),连续给予28 d。每周记录1次体质量。于第22~第27天进行Morris水迷宫实验,评价AM对大鼠空间定位能力的影响;分别于第29和第30天进行跳台实验,观察5 min内大鼠跳下平台的次数以及首次跳下平台的时间。取AM 40 mg·kg-1组大鼠海马组织,Western蛋白印迹法检测N-甲基-D-天冬氨酸受体(NR)2A及2B与Ⅱ型钙调蛋白激酶(Ca MKⅡ)的表达与磷酸化水平。另取Wistar雌性大鼠,单次sc给予AM 40 mg·kg-1,进行长时程增强(LTP)实验,观察高频刺激后PS的改变。结果与正常对照组相比,给予AM后,大鼠体质量增长减缓(P<0.01)。AM 20及40 mg·kg-1组大鼠找到平台的时间显著延长,但是对大鼠穿越平台的次数无显著影响。与实验首日(第29天)相比,经过电击强化学习记忆,正常对照组大鼠为躲避电击,次日(第30天)5 min内跳下平台的次数显著减少(P<0.01),且首次跳下平台的时间明显延长(P<0.01),而AM 10,20和40 mg·kg-1组5 min内的错误次数以及首次跳下平台的时间无显著改变。Western蛋白印迹结果显示,与正常对照组相比,AM 40 mg·kg-1组大鼠海马组织中NR2A及NR2B的表达与磷酸化水平显著增加,且Ca MKⅡ磷酸化水平显著升高(P<0.01)。LTP结果显示,与正常对照组相比,单次sc给予AM 40 mg·kg-1显著降低Wistar雌性大鼠海马的PS幅度(P<0.01),损伤了大鼠海马部位的突触可塑性。结论 AM可能通过改变谷氨酸的含量,增加NR的表达与活性,导致钙超载,引发神经细胞死亡,从而使LTP的PS幅度下降,影响海马神经突触的可塑性,最终影响中枢的学习记忆功能。
- 张蔓孟涛赵文锦李斌
- 关键词：丙烯酰胺跳台实验MORRIS水迷宫长时程增强
- 甲苯二异氰酸酯职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9和金属蛋白酶组织抑制剂-1水平的影响及其与肺功能的相关性分析被引量：2
- 2016年
- 目的探讨甲苯二异氰酸酯（TDI）职业暴露对血清中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-11水平的影响及其与肺功能的相关性。方法采用横断面研究设计，于2014年10月，以整群抽样方法选择我国西部地区某TDI生产厂的作业T人为暴露组，共61名，纳人工种包括装桶T、巡检T、制造T。根据各工种外暴露浓度的不同，将装桶工归为高暴露组，巡检工和操作工归为低暴露组。另根据年龄、性别匹配原则，选择该工厂内与暴露组工人工作强度相似但不接触TDI及其他致敏物质的企业管理人员作为对照组，共计58名。通过问卷调查获取调查对象性别、年龄、工龄、吸烟及饮酒情况、个人及家族过敏史、职业史及近期患病情况。用8h加权平均浓度（8h-TwA）表示TDI空气中外暴露水平。采用ELISA检测血清中MMP-9和TIMP—1的水平，采用便携式肺功能仪测定用力肺活量（FVC）、第一秒用力呼气容积（FEV1．0）。采用Spearman相关分析法分析MMP-9、TIMP-1、MMP-9／TIMP-1与FVC、FEV1．0及工龄的关系。结果暴露组调查对象作业场所空气中TDI8h．TWA的平均值为0．39mg／m3，其中，装桶工为0．76mg／m3，操作工和巡检工均为0．25mg／m3。对照组、低暴露组及高暴露组血清中MMP-9的水平分别为（807．21±347．70）、（586．91±317．50）、（388．94±312．01）ng／ml（Z2=16．69，P〈0．001）；MMP-9／TIMP-1的P50（P25-P75）分别为4．67（2．87～6．68）、2．3（1．44～3．481、1．11f0．59—1．48）（22=39．42，P〈0．001）；TIMP-1分别为（173．44±72．67）、（236．12±51．98）、（302．81±44．39）ng／ml（F=20．09，P〈0．001）。暴露组中肺功能FVC、FEV1．0和FEV1．0／FVC的P50（P25～P75）分别为92．8％（86．0％～101．8％）、85．5％（76．7％～92．8％）和112．5（108．2～118．5），均低于对照组[124．3％（107�
- 苗盼盼孟涛贾强牛勇叶萌纪玉青巨睿陈学磊邵华郑玉新戴宇飞
- 关键词：基质金属蛋白酶9金属蛋白酶1组织抑制剂生物标志物
- 原代肝细胞模型的优化及苯乙烯和氧化苯乙烯的毒性研究
- 2016年
- 目的建立具有高活力、高功能特性的原代小鼠肝细胞模型,并通过该体外模型评价受试物苯乙烯和氧化苯乙烯的急性毒性。方法以BABL/C小鼠作为肝细胞供者,在经典两步胶原酶消化法基础上进行优化,通过逆向灌流、间断灌注、限制消化时间及Percoll液离心纯化的方式获取小鼠肝细胞,并进行体外单层和夹层培养;通过细胞形态、细胞活力、胞内糖原颗粒以及上清中各指标即白蛋白（ALB）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及尿素氮（BUN）变化综合评价原代培养的肝细胞模型;以苯乙烯和氧化苯乙烯为受试物,用浓度分别为0.2、1、5、10和25μmol/L的受试物作用于夹层培养3 d的肝细胞,于染毒3、6、12、24及48 h后,采用CCK-8法和LDH法测定细胞存活率。结果改良法分离获取的小鼠肝细胞活力为（90.3±5.2）%,纯度为（95.3±4.2）%,产量达（2.4±0.9）×107;夹层培养7 d内90%以上细胞呈典型的肝细胞形态特征,培养第3 d胞浆内可见大量糖原颗粒。ALB分泌、LDH和ALT漏出、BUN合成、以及细胞活力夹层培养在8 d内、单层培养在6 d内呈波动性变化,且夹层培养法各指标明显优于单层培养法;夹层培养第3 d ALB分泌量[（1.42±0.20）g/L]和BUN合成量[（1.97±0.22）mmol/L]及细胞活力均达峰值,而LDH漏出量[（7.30±2.33）U/L]和ALT漏出量[（6.51±1.86）U/L]降到谷值,且3~7 d各指标变化相对稳定。苯乙烯和氧化苯乙烯在染毒6 h内,对肝细胞显示了较低的细胞毒性,细胞存活率在90%以上,且CCK-8和LDH两种毒性测定方法之间无显著差异;随着染毒时间的进一步延长,CCK-8法检测出的细胞存活率更低（85%以下）,与LDH法相比差异有统计学意义。用不同浓度受试物处理肝细胞24 h后,从5μmol/L开始观察到相对较高的细胞毒性,用CCK-8法检测出细胞存活率约为85%,但与LDH法相比无显著差异;随着染毒浓度的继续增加,CCK-8
- 孟涛牛勇苗盼盼纪玉青宾萍戴宇飞郑玉新
- 关键词：原代培养苯乙烯氧化苯乙烯胶原酶细胞毒性
- 甲苯二异氰酸酯职业接触对工人健康的影响被引量：6
- 2016年
- 目的研究甲苯二异氰酸酯（TDI）对职业接触工人健康的影响。方法选取某工厂TDI作业工人76名（接触组）及本厂管理工作人员64名（对照组）为研究对象。用GBZ159．2004《工作场所空气中有害物质监测的采样规范》方法对暴露现场进行定点采样，气象色谱法测定空气中TDI浓度。使用调查问卷收集个人信息，便携式肺功能仪测定肺通气功能，全自动血常规分析仪、生化分析仪测定血液学指标，用南京建成生物试剂盒测定氧化损伤及能量代谢指标。使用sPSs17．0软件包进行数据统计分析。结果TDI接触组用力肺活量（FVC）、1秒用力呼气容积（FEV10）及1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值（FEV10/FVc）均明显低于对照组，差异有统计学意义（P〈0.05）。接触组红细胞计数（RBc）、血小板体积分布宽度（PDw）、平均血小板体积（MPv）、淋巴细胞计数（LYM）及中性粒细胞计数（NEuT）细胞的数量均明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。接触组乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（S0D）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活力均显著低于对照组人员，差异有统计学意义（P〈0．01）。接触组接触工龄与外周血血清中SDH、LDH活力呈显著负相关（r=-0.319，P〈O．05；r=-0．239，P〈0．05），未发现接触组工人接触工龄与S0D活力及肺功能指标有相关关系。结论TDI可引起TDI接触工人炎性反应并致肺通气功能损伤，还可以导致氧化应激及能量代谢失衡，对接触工人健康有损害，需要加强防护。
- 巨睿贾强孟涛王翠娟陈学磊牛勇孟潇耿晓马英华贾祺祥苗盼盼戴宇飞郑玉新邵华
- 关键词：甲苯二异氰酸酯呼吸功能试验超氧化物歧化酶红细胞计数
- 纳米级炭黑颗粒的小鼠亚急性吸入毒性研究被引量：5
- 2016年
- [目的]探讨纳米级炭黑颗粒的小鼠亚急性吸入毒性效应,为纳米级炭黑危险性评价提供毒理学数据。[方法]8周龄雄性C57BL/6小鼠分为低质量浓度(后称"浓度")组(15 mg/m^3)、高浓度组(30 mg/m^3)和阴性对照组(滤过空气)。通过气溶胶发生器将纳米级炭黑吹入染毒柜中,每天染毒6 h,连续染毒28 d。染毒期间,动态监测染毒柜内炭黑颗粒的空气动力学直径、颗粒的空间分布及浓度变化。末次染毒后24 h,取静脉血进行血液学及临床生化检查;采集心、肺、肝、脾、肾等脏器组织,称重后计算脏器系数,并行组织病理学检查;支气管灌洗肺组织后,镜下对灌洗液中细胞进行分类计数并测定总蛋白浓度。[结果]染毒28 d期间,低浓度组炭黑浓度约为(15.31±3.30)mg/m^3,高浓度组为(30.05±14.20)mg/m^3。与对照组相比,各组小鼠染毒期间饲料和水的消耗量及其体重变化差异均无统计学意义。与对照组相比,各浓度组染毒小鼠血生化指标未见明显变化,而血常规指标中仅红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容在染毒组中略有增加(P<0.01或P<0.05)。高浓度组小鼠肺脏器系数高于低浓度组和对照组(P=0.016),各浓度组心、肾脏器系数降低(P=0.001,P<0.01)。病理检查可见各浓度组小鼠肺组织呈灰黑色,支气管腔、肺泡腔内均可见炭黑颗粒物沉积,肺间质可见吞噬炭黑颗粒的巨噬细胞,且高浓度组炭黑颗粒沉积更多;浓度组小鼠肺组织损伤病理评分分别为(6.63±1.13)和(9.80±0.38),明显高于对照组(1.66±0.55)。与对照组相比,低、高浓度组肺泡灌洗液中总细胞数、淋巴细胞数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数均明显增加(均P<0.01)。[结论]28 d反复吸入纳米级炭黑主要引发小鼠肺组织损伤,本结果也可为开展纳米级炭黑肺毒性研究提供较为理想的模型和可靠的分析手段。
- 杨墨孟涛牛勇鱼涛沈美丽宾萍张利平郑小美戴宇飞牛侨郑玉新
- 关键词：炭黑病理学
- 氯乙酸致人支气管上皮细胞16HBE的凋亡机制研究被引量：3
- 2016年
- [目的]探讨氯乙酸对人支气管上皮细胞16HBE氧化应激以及线粒体凋亡通路的影响。[方法]以16HBE细胞为研究对象,将实验分为对照组和0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mmol/L的氯乙酸染毒组,染毒24 h后检测细胞存活率、凋亡率及超氧化物歧化酶(SOD)活力;染毒0.25、0.5、1、8、24 h后检测细胞内活性氧(ROS)水平;染毒8、24 h后检测线粒体膜电位以及Bcl-2和Bax m RNA表达水平。用1.5、2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后,检测Bcl-2、Bax、细胞色素C、Caspase-9、Caspase-3、PARP-1凋亡相关蛋白的表达水平。[结果]随氯乙酸染毒浓度升高,染毒24 h后细胞存活率、SOD活力和线粒体膜电位呈剂量依赖性下降(r=-0.902、-0.732和-0.863,P<0.05),而细胞凋亡率呈剂量依赖性上升(r=0.914,P<0.05)。与对照组相比,1.5、2.0、2.5 mmol/L剂量组细胞存活率分别降低了12%、20%和30%,SOD活力分别降低了9%、21%和30%,线粒体膜电位分别降低了11%、18%和24%,而细胞凋亡率分别是对照组的3、4和7倍。各剂量组细胞内ROS水平呈先升高后降低的趋势,在染毒0.5 h达到峰值,与对照组相比分别增加了15%、35%、48%和55%(P<0.05),染毒1 h后反而降低。染毒各时间点染毒浓度与ROS水平均存在剂量-效应关系(r=0.756、0.893、0.735、0.667和0.653,均P<0.05);相关性分析表明染毒24 h后ROS水平与细胞凋亡率呈明显正相关(r=0.826,P<0.05)。染毒8、24 h两个时间点,染毒浓度与Bcl-2、Bax m RNA表达量存在剂量效应关系(8 h:r=-0.634和0.754,24 h:r=-0.773和0.823,P<0.05);与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度≥1.5 mmol/L时Bcl-2 m RNA和蛋白表达明显下调,而Bax m RNA和蛋白表达明显上调(P<0.05);相关性分析表明Bax m RNA表达与ROS水平具有正相关(r=0.886和0.824,P<0.05),而Bcl-2m RNA表达与ROS水平具有负相关(r=-0.862和-0.815,P<0.05)。与对照组相比,染毒24 h后染毒浓度2.5 mmol/L时细胞色素C、活化的Caspase-3和Caspase-9蛋白表达量显著增加,�
- 孟涛苗盼盼杨墨贾强戴宇飞
- 关键词：氯乙酸氧化应激活性氧凋亡线粒体通路
- 柴油机尾气暴露人群乙烯基DNA加合物与DNA甲基化水平的关系研究被引量：4
- 2017年
- 目的 探讨柴油机尾气（DEE）暴露人群乙烯基DNA加合物与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A基因（P16）、Ras相关结构域家族1A基因（RASSF1A）和O-6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因（MGMT）启动子区DNA甲基化水平的关联性.方法 采用整群抽样法于2012年选取河南省某柴油机厂124名车间试车工人为DEE暴露组,选取同地区自来水厂112名非DEE暴露工人为对照组.收集研究对象的人口学信息,并采集静脉血和班后尿液.应用高效液相色谱-质谱联用方法检测研究对象尿液中乙烯基DNA加合物的生成情况,包括N6-亚乙烯基-2＆#39;-脱氧腺苷（εdA）和3,N4-亚乙烯基-2＆#39;-脱氧胞苷（εdC）.运用焦磷酸测序方法分析P16、RASSF1A和MGMT启动子区DNA甲基化水平,以5-甲基胞嘧啶（5mC）占胞嘧啶的百分比表示（%5mC）.采用Spearman相关分析和多重线性回归分析乙烯基DNA加合物和DNA甲基化水平的关系.结果 暴露组和对照组工人尿液中 εdA浓度的P50（P25~P75）分别为230.00（98.04~470.91）、102.10（49.95~194.48）pmol/g肌酐,暴露组高于对照组（P〈0.001）.暴露组工人P16、RASSF1A和MGMT启动子区DNA甲基化水平分别为2.04＆#177;0.41、2.19（1.94~2.51）和2.22（1.94~2.46）%5mC,对照组工人分别为2.19＆#177;0.40、2.41（2.11~2.67）和2.44（2.15~2.91）%5mC,暴露组低于对照组（P值分别为0.005,0.002和〈0.001）.Spearman相关分析显示,P16、RASSF1A和MGMT启动子区DNA甲基化水平与尿液中εdA浓度呈负相关（r值分别为-0.155、-0.137和-0.198,P值均〈0.05）,与εdC浓度相关无统计学意义（P〉0.05）.多重线性回归分析显示,在非吸烟人群中,εdA与P16、RASSF1A和MGMT启动子区DNA甲基化负相关[β（95%CI）值分别为-0.068（-0.132^-0.003）、-0.082（-0.159^-0.004）和-0.048（-0.090^-0.007）,P值分别为0.039,0.039和0.024],εdC与MGMT启动子区DNA甲基化负相关[β（95%CI）值为-0.094（-0.179^-0.008）,P=0.03
- 沈美丽何志妮张笑段化伟牛勇宾萍叶萌孟涛戴宇飞余善法陈雯郑玉新
- 关键词：DNA加合物DNA甲基化柴油机尾气
- 丝裂原活化蛋白激酶信号通路在氯乙酸诱导人支气管上皮细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路在氯乙酸诱导的人正常支气管上皮细胞16HBE凋亡过程中的作用。方法用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mmol/L氯乙酸处理16HBE细胞24 h后，应用CCK-8和LDH法检测细胞存活情况，采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况，并用免疫印迹法检测MAPK信号通路蛋白p38、ERK1/2、JNK的磷酸化。用MAPK通路特异性抑制剂（SB203580、U0126、SP600125）预处理16HBE细胞1 h，再用2.5 mmol/L氯乙酸染毒24 h后，检测加入抑制剂后p-p38、p-ERK1/2、p-JNK的表达水平及细胞活力和凋亡的变化。结果随着氯乙酸染毒浓度的增加，用CCK-8法和LDH法检测的细胞存活率逐渐降低，相关系数分别为-0.902和-0.825（P〈0.05），均具有较好的剂量效应关系，且CCK-8法检测效能明显优于LDH法，差异有统计学意义（P〈0.05）。氯乙酸可诱导16HBE细胞凋亡，1.5、2.0、2.5 mmol/L氯乙酸所致细胞凋亡率分别为17.2%±4.0%、24.6%±4.2%和39.3%±5.7%，均明显高于对照组（5.6% ± 3.0%），差异有统计学意义（P〈0.05）。氯乙酸染毒组p38和ERK1/2蛋白磷酸化水平存在时间、剂量依赖性关系；与对照组比较，16、24 h组p-p38蛋白水平分别是对照的2.1和2.6倍，差异有统计学意义（P〈0.01），p-ERK1/2蛋白水平分别比对照降低了37%和52%，差异有统计学意义（P〈0.05），而p-JNK蛋白各时间点均无明显变化；染毒24 h后，2.0、2.5 mmol/L组p-p38蛋白水平分别是对照组的1.9和2.6倍，差异有统计学意义（P〈0.01），p-ERK1/2蛋白水平分别比对照组降低了40%和50%，而JNK蛋白各组未见明显磷酸化。与对照组和氯乙酸染毒组比较，抑制剂对照组和抑制剂组p-p38、p-ERK1/2及p-JNK蛋白均明显减少；与对照组比较，氯乙酸染毒组和p-38、ERK及JNK通路抑制剂组细胞活力分别下降了28%、18%、36%和26%，凋亡率分别为对照组的7、4、8和7倍，
- 孟涛杨墨李云霞贾强于功昌戴宇飞
- 关键词：氯乙酸丝裂原活化蛋白激酶上皮细胞
- 利用原代肝细胞模型检测细胞内磷酸化组蛋白H2AX表达筛选遗传毒物的方法验证
- 2016年
- 目的验证以原代小鼠肝细胞为受试细胞,以细胞内磷酸化组蛋白H2AX（γH2AX）表达改变为检测指标的体外检测化学物遗传毒性的实验方法。方法采用改良的两步胶原酶灌注法分离获取小鼠肝细胞,并运用三明治法体外培养肝细胞。选择4种已知的遗传毒物平阳霉素、苯并芘、苯乙烯和氧化苯乙烯及2种非遗传毒物硫唑嘌呤和环孢素A作为受试物,用受试物0~40μmol·L-1处理原代培养肝细胞0~24 h,CCK-8法检测细胞毒性,并用流式细胞术检测γH2AX的表达水平。结果利用所建立的方法筛选上述4种遗传毒物均获得阳性结果,2种非遗传毒物均呈阴性反应。直接遗传毒物平阳霉素和氧化苯乙烯作用3 h,间接遗传毒物苯并芘和苯乙烯作用6 h时,γH2AX表达量最高（P〈0.01）。4种遗传毒物处理组在最适时间点（直接遗传毒物：3 h;间接遗传毒物：6 h）及最适作用浓度（10μmol·L-1）诱发细胞γH2AX的表达水平依次为25.7,18.4,12.4和14.2（平均荧光强度）,分别为DMSO溶剂对照组的18,12,8和10倍（P〈0.01）,且γH2AX的表达水平与遗传毒物浓度呈显著正相关（P〈0.01）。非遗传毒物硫唑嘌呤和环孢素A处理组与DMSO溶剂和空白对照组相比,γH2AX的水平均无明显变化。结论利用原代肝细胞模型检测γH2AX表达水平可在无S9的情况下有效区分遗传毒物与非遗传毒物和直接遗传毒性与间接遗传毒性。γH2AX表达水平可作为鉴别遗传毒物与非遗传毒物的有效参考指标。
- 孟涛苗盼盼纪玉青牛勇宾萍戴宇飞郑玉新
- 关键词：遗传毒物肝细胞原代培养组蛋白类流式细胞术
- 一般人群尿中8-羟基脱氧鸟苷水平及其影响因素被引量：4
- 2016年
- [目的]探讨一般人群尿8-羟基脱氧鸟苷（8-OHd G）水平,以及可能影响因素的作用。[方法]选择华东某市的城市居民共257名作为研究对象,采用超高效液相色谱-串联质谱方法测定尿中8-OHd G水平,高效液相色谱法检测尿中肌酐的浓度,校正尿中的8-OHd G的浓度。影响因素分析采用多重线性回归分析,交互作用采用多因素方差分析模型分析。[结果]该地区一般人群尿中的8-OHd G的质量浓度M（P25～P75）为1.50（0.39～2.24）μg/L,肌酐校正后M（P25～P75）为129.82（50.79～235.58）μg/mol。经吸烟、饮酒情况和体质指数（BMI）分层后,没有发现吸烟、饮酒和BMI单独对尿中8-OHd G改变的影响。多重线性回归分析结果显示,在排除其他混杂因素的影响后,饮酒对尿中8-OHd G水平有影响（P=0.040）。进一步分析发现超重人群中随年龄升高8-OHd G水平有升高趋势（Ptrend〈0.05）。[结论]年龄与BMI的交互作用是尿中8-OHd G水平的重要影响因素,尤其是高年龄的超重者更易发生DNA氧化损伤。
- 王艳华李红丽解秋艳邢杰纪乾鹏孟涛牛勇段化伟
- 关键词：8-羟基脱氧鸟苷
