陈李李
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：徐州医学院研究生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- PEDF对大鼠缺血心脏功能的影响及相关机制的研究
- 2013年
- 目的研究色素上皮衍生因子（pigmentepithelium—derivedfactor，PEDF）基因转染对大鼠缺血心脏功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心肌梗死模型，将72只Sprague—Dawley大鼠随即分为6组（每组12只）：正常（Normal）组，转染PEDF—siRNA～LV（Infarct＋siPEDF）组，转染PEDF—LV（Infarct＋PEDF）组，载体对照（Infarct＋vector）组，溶剂对照（Infarct＋solvent）组，单纯梗死（Infarct）组。病毒转染4周后，超声心动图检测大鼠心脏功能，取各组心肌组织检测心肌局部炎症反应、心肌细胞和内皮细胞凋亡指数。结果超声心动图检测显示：模型建立4周时，与Infarct＋vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比，Infarct＋siPEDF组左心室射血分数（1eftventricularejectionfraction，LVEF）显著降低，Infarct＋PEDF组LVEF显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。苏木精～伊红（H—E）染色检测局部炎症反应显示：与Infarct十vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比，Infarct＋siPEDF组炎症细胞浸润显著增多，TNF—1α及TNFR1表达量显著增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；Infarct＋PEDF组炎症细胞浸润显著减少，TNF-α表达量显著减少，差异有统计学意义（P〈0．05），而TNFRl表达无显著变化。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（terminaldexynucleotidyltransferase（TdT）-mediateddUTPnickendlabeling，TUNEL）检测细胞凋亡显示：与各对照组相比，Infarct＋siPEDF组内皮细胞凋亡显著减少，心肌细胞凋亡显著增加；Infarct＋PEDF组内皮细胞凋亡数量显著增加，而心肌细胞凋亡数量显著减少，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论PEDF可通过降低局部炎症和保护心肌细胞而改善缺血心脏功能。
- 徐磊冯守界陈李李石合现张中明董红燕
- 关键词：色素上皮衍生因子心脏功能炎症反应细胞凋亡
- hVEGF165/Ang-1联合转染对兔缺血心肌血管再生的影响
- 2012年
- 目的 探讨VEGF/Ang-1基因联合转染对缺血心肌区域血管再生及血管成熟的影响.方法 建立兔心肌缺血模型,实验动物随机分为5组（每组5只）：hVEGF165/Ang-1双基因联合转染组（A组）,hVEGF165单基因转染组（B组）,Ang-1单基因转染组（C组）,单纯梗死组（D组）,正常对照组（E组）.冠状动脉左前降支（LAD）结扎后在缺血心肌区域直接注射的方法转染 rAAV-9HRE-hVEGF165和（或）rAAV-TRE-Tight-Ang-1;Fitc-lectin和α-SMA免疫荧光染色,观察缺血心肌区域血管新生及成熟情况.结果 与B、C、D组相比,A组Fitc-lectin和α-SMA阳性血管数量显著增多（P〈0.05）.结论 与单一促血管生成基因转染比较,hVEGF165/Ang-1双基因联合转染可改善兔心肌梗死区域血管再生.
- 陈李李袁延亮董红燕张中明张昊王正
- 关键词：心肌缺血基因治疗血管再生
- 大鼠PEDF基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 构建针对大鼠PEDF 基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体并进行鉴定,探讨PEDF基因对缺血心肌血管新生的影响.方法 构建PEDF基因过表达质粒,测序鉴定.针对PEDF基因不同干扰靶点构建4种RNAi 病毒载体质粒pGCsi-U6/Neo/GFP/shRNA,测序鉴定.过表达质粒和RNAi质粒共转染293T细胞后应用Western blot方法进行外源筛靶确定PEDF基因RNAi 有效靶序列.有效RNAi 病毒质粒和其他3种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h后, 收集细胞培养上清液,将其浓缩后用孔稀释法测定病毒滴度.结果 过表达质粒及4种RNAi质粒构建成功.Western blot外源筛靶显示2个靶点能有效敲减目的基因的表达.PEDF shRNA慢病毒表达载体Serpinf1-RNAi-LV经293T细胞包装成功,收集293T细胞分泌的病毒上清测定浓缩病毒悬液的滴度为2×1012Tu/L.结论 成功构建了PEDF基因的RNAi慢病毒载体,为研究PEDF基因对缺血心肌血管新生的影响打下基础.
- 王正董红燕张中明张昊袁延亮陈李李石合现
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体
