石合现
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：徐州医学院研究生学院更多>>
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- PEDF对大鼠缺血心脏功能的影响及相关机制的研究
- 2013年
- 目的研究色素上皮衍生因子（pigmentepithelium—derivedfactor，PEDF）基因转染对大鼠缺血心脏功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立大鼠心肌梗死模型，将72只Sprague—Dawley大鼠随即分为6组（每组12只）：正常（Normal）组，转染PEDF—siRNA～LV（Infarct＋siPEDF）组，转染PEDF—LV（Infarct＋PEDF）组，载体对照（Infarct＋vector）组，溶剂对照（Infarct＋solvent）组，单纯梗死（Infarct）组。病毒转染4周后，超声心动图检测大鼠心脏功能，取各组心肌组织检测心肌局部炎症反应、心肌细胞和内皮细胞凋亡指数。结果超声心动图检测显示：模型建立4周时，与Infarct＋vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比，Infarct＋siPEDF组左心室射血分数（1eftventricularejectionfraction，LVEF）显著降低，Infarct＋PEDF组LVEF显著升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。苏木精～伊红（H—E）染色检测局部炎症反应显示：与Infarct十vector组、Infarct＋solvent组及Infarct组相比，Infarct＋siPEDF组炎症细胞浸润显著增多，TNF—1α及TNFR1表达量显著增加，差异有统计学意义（P〈0．05）；Infarct＋PEDF组炎症细胞浸润显著减少，TNF-α表达量显著减少，差异有统计学意义（P〈0．05），而TNFRl表达无显著变化。末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法（terminaldexynucleotidyltransferase（TdT）-mediateddUTPnickendlabeling，TUNEL）检测细胞凋亡显示：与各对照组相比，Infarct＋siPEDF组内皮细胞凋亡显著减少，心肌细胞凋亡显著增加；Infarct＋PEDF组内皮细胞凋亡数量显著增加，而心肌细胞凋亡数量显著减少，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论PEDF可通过降低局部炎症和保护心肌细胞而改善缺血心脏功能。
- 徐磊冯守界陈李李石合现张中明董红燕
- 关键词：色素上皮衍生因子心脏功能炎症反应细胞凋亡
- 大鼠PEDF基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 构建针对大鼠PEDF 基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体并进行鉴定,探讨PEDF基因对缺血心肌血管新生的影响.方法 构建PEDF基因过表达质粒,测序鉴定.针对PEDF基因不同干扰靶点构建4种RNAi 病毒载体质粒pGCsi-U6/Neo/GFP/shRNA,测序鉴定.过表达质粒和RNAi质粒共转染293T细胞后应用Western blot方法进行外源筛靶确定PEDF基因RNAi 有效靶序列.有效RNAi 病毒质粒和其他3种辅助包装原件载体质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h后, 收集细胞培养上清液,将其浓缩后用孔稀释法测定病毒滴度.结果 过表达质粒及4种RNAi质粒构建成功.Western blot外源筛靶显示2个靶点能有效敲减目的基因的表达.PEDF shRNA慢病毒表达载体Serpinf1-RNAi-LV经293T细胞包装成功,收集293T细胞分泌的病毒上清测定浓缩病毒悬液的滴度为2×1012Tu/L.结论 成功构建了PEDF基因的RNAi慢病毒载体,为研究PEDF基因对缺血心肌血管新生的影响打下基础.
- 王正董红燕张中明张昊袁延亮陈李李石合现
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体
- VEGF和Ang-1联合转染对兔心肌梗死再生血管分支和管径的影响
- 2012年
- 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素-1（Ang-1）基因联合转染对兔心肌梗死部位再生血管分支数量和毛细血管管径大小的影响.方法 将75只日本大耳白兔随机分为5组（每组n=15）,采用冠状动脉左前降支结扎法建立兔心肌梗死模型.单纯梗死组,仅行冠状动脉左前降支结扎术;VEGF组,向心肌梗死边缘部位注射2型重组腺相关病毒携带的VEGF165基因; Ang-1组,向心肌梗死边缘部位注射2型重组腺相关病毒携带的Ang-1基因;VEGF＋Ang-1组,向心肌梗死边缘部位注射2型重组腺相关病毒携带的VEGF165基因和2型重组腺相关病毒携带的Ang-1基因混合液（混合比例为1：1）;载体组,向心肌梗死边缘部位注射不携带VEGF165和Ang-1基因的2型重组腺相关病毒载体溶液.8周后取材,植物凝集素B4（Lectin B4）灌注染色检测心肌梗死边缘再生血管分支数量,CD31免疫组化检测毛细血管直径.结果 与单纯梗死组、Ang-1组和载体组相比,VEGF组和VEGF＋Ang-1组再生血管分支增多（P〈0.01）;与其他各组相比,Ang-1组再生血管分支显著减少（P〈0.01）.与单纯梗死组、VEGF组和载体组相比,Ang-1组和VEGF＋Ang-1组梗死边缘区毛细血管直径显著增加（P〈0.01）;与其他各组相比,VEGF组梗死边缘区毛细血管直径减小（P〈0.01）.结论 VEGF和Ang-1联合转染可以促进心肌梗死边缘部位再生血管分支增多和毛细血管管径增大.
- 石合现王正袁延亮张昊董红燕张中明
- 关键词：心肌梗死血管生成素-1
