陈兴龙
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：江西科技师范学院生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程理学生物学更多>>
- 丝状噬菌体pⅧ展示系统表达赭曲霉毒素A模拟表位及应用研究被引量：1
- 2012年
- 目的传统赭曲霉毒素A(OTA)竞争抗原毒性强、成本高、制备难度大。将OTA模拟表位展示于丝状噬菌体pⅧ表面,获得无毒、易于制备的OTA竞争抗原替代物。方法构建带有OTA模拟表位的重组噬菌粒pC89-COTA,为了提高OTA模拟表位与抗体的结合率,在OTA模拟表位序列5'端引入了肠激酶酶切位点。噬菌粒转化进大肠杆菌XL1-blue后再经野生KM13噬菌体感染,获得带有OTA模拟表位的重组噬菌体。用该噬菌体代替竞争抗原建立OTA的无毒ELISA分析方法。结果成功表达出带有OTA模拟表位的重组噬菌体,经肠激酶酶切的OTA模拟表位噬菌体与OTA抗体的结合效率显著高于未酶切的噬菌体。利用酶切后的噬菌体建立OTA的无毒ELISA分析方法,其最低检出限为100pg/ml,线性范围为250pg/ml～1000pg/ml。进行加标回收实验,回收率为99.8%～112.3%,相对标准偏差为8.19%～11.64%,测试16份市售样品,阳性率为31.25%。结论成功表达了OTA模拟表位噬菌体,建立了OTA的无毒ELISA检测方法。
- 陈兴龙徐玲刘仁荣裘雪梅朱立鑫
- 关键词：噬菌体展示赭曲霉毒素A酶联免疫吸附测定
- 黄曲霉毒素B_1抗原模拟表位高效表达
- 2013年
- 目的构建黄曲霉毒素B1(AFB1)模拟表位pⅧ噬菌体展示载体,为建立无毒害免疫学检测方法提供依据。方法构建呈现AFB1抗原模拟表位的噬菌体载体,并引入肠激酶酶切位点,诱导表达,肠激酶处理重组噬菌体颗粒,酶联免疫吸附法鉴定反应原性。结果重组质粒酶切谱、PCR扩增结果及测序结果均与设计一致,在pC89载体中插入了GACGACGACGACAAGCATCCTAGTGATCCGCGTCATGGG序列,肠激酶处理后的重组噬菌体颗粒可与AFB1抗体特异性结合,吸光度(A)值可达2.112。结论成功构建了包含肠激酶酶切位点的AFB1抗原模拟表位pⅧ噬菌体表达载体,重组噬菌体颗粒经初步表达有一定反应原性。
- 徐玲黄凤丹彭思璐刘仁荣裘雪梅陈兴龙
- 关键词：模拟表位肠激酶
- 一株猪源拟杆菌的分离与发酵条件的优化被引量：2
- 2009年
- 从新鲜猪粪便中分离得到一株猪源拟杆菌,利用统计学的单因素试验与正交试验,对该菌株的发酵培养基及发酵条件进行优化。实验结果表明该菌发酵最适培养基为AN培养基,确定了促生长因子吐温-80、1%氯化血红素、1%维生素Kl的最佳浓度,并确定了最佳发酵条件,最佳培养温度为37℃、分批发酵时间周期18 h。
- 韩晓云邓红蔡艳付金衡余宙刘博陈兴龙
- 关键词：发酵
- 基于赭曲霉毒素A模拟表位的无毒素ELISA方法被引量：7
- 2010年
- 以抗赭曲霉毒素A的单克隆抗体亲和筛选随机7肽库,ELISA方法鉴定阳性克隆,DNA测序推导出赭曲霉毒素A的模拟表位肽,共获得了11个模拟表位肽,共有序列为IRPMV。将化学合成的模拟表位肽与载体BSA偶联后,以之建立无毒素的竞争酶联免疫检测方法,并与常规酶联免疫吸附检测方法及高效液相色谱比较。结果表明:以赭曲霉毒素A模拟表位建立的竞争ELISA方法的线性范围和检测下限都与常规竞争ELISA方法结果相近,样品测试结果与常规竞争ELISA方法及高效液相色谱一致,显示良好的应用前景。
- 刘仁荣徐玲裘雪梅陈兴龙朱立鑫
- 关键词：噬菌体展示肽库赭曲霉毒素A
- 基于噬菌体展示技术的赭曲霉毒素A高密度模拟表位的表达研究被引量：2
- 2012年
- 通过噬菌体展示技术展示赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)模拟表位。将带有OTA模拟表位序列的寡核苷酸双链克隆至载体pC89-COTA。利用噬菌体展示技术,通过优化辅助噬菌体感染复数、IPTG加入的时间与剂量等培养条件获得表达有高密度OTA模拟表位的噬菌体。再通过酶联免疫吸附检测(ELISA)方法比较不同的条件下的表达效果,探索最优表达条件。结果表明:成功获得高密度表达OTA模拟表位的噬菌体,辅助噬菌体感染复数与IPTG加入量对模拟表位表达量影响不大,IPTG加入时间对模拟表位表达量有较大影响,优化后模拟表位表达量大大高于优化前。
- 陈兴龙徐玲刘仁荣裘雪梅朱立鑫
- 关键词：噬菌体展示赭曲霉毒素A
- 苏丹红Ⅰ免疫亲和柱的研制与鉴定被引量：1
- 2012年
- 以羧基化的琼脂糖凝胶4FF为载体,采用碳化二亚胺法偶联抗苏丹红Ⅰ(SudanⅠ)单克隆抗体,制备苏丹红Ⅰ免疫亲和柱(IAC)。将SudanⅠ样品过免疫亲和柱,乙腈洗脱后以高效液相色谱法(HPLC)检测,紫外检测波长为478nm,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈-0.1%甲酸乙腈溶液-丙酮(体积比为21.25:3.75:60:15)。抗SudanⅠ单克隆抗体免疫亲和柱以0.3g带羧基的琼脂糖凝胶4FF与1mg SudanⅠ单抗偶联,柱容量为1.6μg。辣椒粉以0.25～3mg/kg水平添加SudanⅠ标准品,平均回收率为44.52%～77.40%,相对标准偏差为4.6%～8.3%。信噪比(RSN)为3:1时的最低检测限为15ng/mL。本实验成功制备出苏丹红免疫亲和柱。
- 朱立鑫裘雪梅陈兴龙刘仁荣徐玲徐富勇
- 关键词：苏丹红免疫亲和柱高效液相色谱
- 高密度赭曲霉毒素A模拟表位噬菌体的构建及其ELISA应用研究
- 赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)模拟表位是能够良好模拟OTA分子抗原.决定簇空间结构的短肽,其能够与OTA抗体特异性结合,有望以其无毒、廉价的特点成为免疫学研究中天然OTA的替代物。本研究以带有OTA模拟...
- 陈兴龙
- 关键词：赭曲霉毒素A噬菌体展示模拟表位
