郑晨宏
- 作品数：6 被引量：16H指数：3
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人HCT116结肠癌细胞系中CD133^+结肠癌干细胞分离及鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的从人结肠癌细胞系(HCT116)中分离鉴定结肠癌干细胞,并观察其体外生物学特性。方法利用RT-PCR、免疫荧光、流式细胞等技术检测HCT116细胞中CD133的表达情况;利用免疫磁珠分选技术分选CD133+细胞;采用无血清培养基培养分选后的CD133+细胞鉴定其体外增殖特性;采用含血清培养基诱导干细胞克隆球分化并采用免疫组化检测CK20表达情况鉴定其分化特性。结果HCT116细胞系中存在CD133+细胞,免疫磁珠能有效的分选CD133+细胞,分选后的阳性含量为91.92%,分选后的阳性细胞具有典型干细胞的体外增殖、分化特性。结论CD133+结肠癌干细胞在体外具有和普通干细胞类似的无限增殖、自我更新和分化能力,同时它们也表达ABCG2等耐药相关蛋白。
- 陈克力梁后杰江恒陈建芳裴莉郑晨宏
- 关键词：HCT116结肠癌干细胞CD133
- 体外三维培养的结肠癌细胞整合素αⅤ β3表达变化及其与化疗敏感性的关系被引量：3
- 2008年
- 目的:用三维培养方法在体外模拟体内实体瘤生长情况,探讨结肠癌细胞群集耐药与细胞黏附分子整合素αⅤ(integrin αⅤ)和整合素β3(integrin β3)过度表达的关系。方法:运用三维培养法获得人结肠癌细胞HT29多细胞球体(multicellular spheroids,MCS)模型,采用RT-PCR法及免疫荧光法比较单层细胞(monolayer cells,MC)及MCS细胞中基质间黏附分子integrin αⅤ和integrin β3 mRNA及蛋白表达水平变化,用FCM法检测5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)作用48h后细胞的生存率和凋亡率。结果:HT29 MCS与HT29 MC经比较,integrin αⅤ和integrin β3 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P<0.01),对5-FU的药物敏感性显著下降(P<0.05),5-FU诱导的细胞凋亡率显著下降(0.346±0.035vs0.235±0.024),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:细胞黏附分子integrin αⅤ和integrin β3表达水平增高可能增加结肠癌细胞群集的耐药性。
- 郑晨宏梁后杰周琪杨凤武彭秋平边志衡
- 关键词：细胞培养技术整合素ΑV整合素Β3
- 基于TEM-8新型颗粒性疫苗对结肠癌小鼠模型免疫治疗的作用
- 2010年
- 目的:用基于TEM-8(tumor endothelialmarker-8)真核表达的颗粒性疫苗免疫荷结肠癌小鼠,探讨该疫苗的免疫治疗作用。方法:用阳离子肽[K]16-tat49-57与带有负电荷的真核表达质粒结合成颗粒性疫苗,用透射电镜和免疫印迹法鉴定,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测疫苗所诱导的特异性CTL分泌IFN-γ,并对荷瘤Balb/c小鼠进行免疫治疗后,观察荷瘤体积和小鼠生存率,用免疫组化方法(抗CD31)观察肿瘤组织血管生长情况,并计算肿瘤微血管密度。结果:在电荷比为r=2的制备条件下,所构建的颗粒性疫苗进行电镜扫描,显示疫苗能形成颗粒,转染COS-7细胞后可有效介导TEM-8蛋白表达。ELISPOT检测显示在体内疫苗能有效激发抗原特异性CTL效应,可诱导CTL产生IFN-γ等细胞因子,肿瘤治疗实验证实,颗粒性疫苗能有效抑制肿瘤的生长速度,提高荷瘤小鼠的生存率,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。结论:基于TEM-8的新型抗肿瘤血管生成疫苗能有效激发出特异性CTL应答,并在荷瘤小鼠模型中有效抑制肿瘤血管生成,提高荷瘤小鼠的生存率,为新型结肠癌治疗性疫苗的设计提供了新思路。
- 阮志华刘平郑晨宏童晶涛欧娟娟谢赣丰何金霞耿培亮萨日娜边志衡梁后杰
- 关键词：TEM-8结肠肿瘤免疫治疗血管生成
- Semaphorin3F下调整合素αvβ3表达逆转结肠癌细胞多细胞耐药的实验研究
- 背景与目的 当肿瘤细胞作为一个细胞群集体(多细胞球球体)存在时,其产生的耐药现象称之为“多细胞耐药或群集耐药(MCR)”。多细胞耐药或群集耐药的产生有赖于体内实体瘤三维立体的空间结构,可以通过建立体外三维培养模型被很好的...
- 郑晨宏
- 关键词：多细胞耐药整合素ΑVΒ3化学治疗
- 文献传递
- 基于TEM-8新型颗粒性疫苗的制备、鉴定和体外激发CTL杀伤活性的研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备、鉴定基于肿瘤抗原TEM-8(tumor endothelial marker-8)的复合颗粒性疫苗,研究其在体外激发CTL杀伤活性。方法在特定的条件下将阳离子肽和DNA制备成复合颗粒性的结构,以透射电镜、DNA阻滞试验、DNa-seI保护试验、Westernblot等对该疫苗进行制备和鉴定,同时进行体外激发CTL杀伤活性的标准51Cr释放实验。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L、电荷比为2的制备条件下,电镜扫描结果显示该疫苗能形成颗粒;Westernblot鉴定其可有效介导TEM-8蛋白表达;该疫苗有明显的杀伤毒性,杀伤率为59.7%,与对照组性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备了基于肿瘤抗原TEM-8的复合颗粒性疫苗,其在体外能够有效激发出特异性CTL应答。
- 刘平梁后杰阮志华郑晨宏欧娟娟童晶涛谢赣丰耿培亮边志衡
- 关键词：TEM-8疫苗制备T淋巴细胞
- 黏附分子在肿瘤多细胞耐药中的研究进展被引量：8
- 2008年
- 肿瘤细胞耐药是影响化疗敏感的主要原因之一。细胞黏附分子(cell adhesion molecules,CAMs)是细胞黏附功能的执行者,与"细胞-细胞"或"细胞-基质"相互作用所致整个细胞群体的耐药表型改变有关。此现象被称之为"多细胞耐药(multicellular resistance,MR)"或"群集耐药"。细胞黏附分子介导的多细胞耐药(或群集耐药)是目前细胞耐药领域研究的热点。大量实验研究表明,多种细胞黏附分子参与肿瘤多细胞耐药,为逆转肿瘤细胞耐药开辟了新的药物靶点。本文就细胞黏附分子在实体肿瘤中多细胞耐药的研究进展做一综述。
- 郑晨宏梁后杰周琪
- 关键词：肿瘤抗药性肿瘤细胞黏附分子
