耿培亮
- 作品数：15 被引量：33H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金湖北省教育科学“十二五”规划课题更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 基于TEM-8新型颗粒性疫苗的制备、鉴定和体外激发CTL杀伤活性的研究被引量：1
- 2009年
- 目的制备、鉴定基于肿瘤抗原TEM-8(tumor endothelial marker-8)的复合颗粒性疫苗,研究其在体外激发CTL杀伤活性。方法在特定的条件下将阳离子肽和DNA制备成复合颗粒性的结构,以透射电镜、DNA阻滞试验、DNa-seI保护试验、Westernblot等对该疫苗进行制备和鉴定,同时进行体外激发CTL杀伤活性的标准51Cr释放实验。结果在NaCl浓度为87.5mmol/L、电荷比为2的制备条件下,电镜扫描结果显示该疫苗能形成颗粒;Westernblot鉴定其可有效介导TEM-8蛋白表达;该疫苗有明显的杀伤毒性,杀伤率为59.7%,与对照组性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备了基于肿瘤抗原TEM-8的复合颗粒性疫苗,其在体外能够有效激发出特异性CTL应答。
- 刘平梁后杰阮志华郑晨宏欧娟娟童晶涛谢赣丰耿培亮边志衡
- 关键词：TEM-8疫苗制备T淋巴细胞
- 上皮-间质转化在人结肠癌细胞系SW480对西妥昔单抗及氟尿嘧啶耐药中的作用被引量：2
- 2011年
- 目的探讨人结肠癌细胞系SW480上皮-间质转化现象与其在化疗药物及靶向药物耐药中的作用。方法西妥昔单抗(cetuximab,C225)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)以及二者联合处理人结肠癌细胞系SW480,观察细胞形态,免疫荧光化学方法检测处理前后SW480细胞骨架改变以及E-钙粘素(E-cardherin)、波形蛋白(vinmentin)表达差异,Western blot方法检测实验组与对照组SW480细胞E-cardherin、Vinmentin以及多药耐药蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异;体外药物敏感试验(cell Counting Kit-8,CCK-8比色法)分别检测实验组与对照组SW480细胞存活能力。结果 SW480细胞经C225、5-Fu以及二者联合处理后细胞形态由上皮细胞向间质细胞转化;细胞免疫荧光显示处理前后SW480细胞骨架改变,微丝蛋白排列极性增强,E-cardherin表达下降,Vinmentin表达升高,同时伴随MRP、P-gp表达增高。SW480细胞经C225与5-Fu联合处理较单独应用2个药物细胞存活率明显降低(P<0.05)。结论 SW480细胞经单独使用靶向药物或化疗药物以及两者联合应用可诱导细胞发生EMT,且此EMT对肿瘤细胞耐药有影响。
- 萨日娜欧娟娟耿培亮何金霞向丽莎梁后杰
- 关键词：上皮-间质转化西妥昔单抗5-氟尿嘧啶结肠肿瘤
- 上皮钙粘素（E-cadherin）基因多态性与结直肠癌易感性关系的Meta分析
- ＜正＞～～
- 耿培亮
- 文献传递
- 纤维粘连蛋白EDA片段调控结肠癌SW480细胞的增殖、凋亡被引量：2
- 2011年
- 目的研究纤维粘连蛋白EDA片段对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡的影响。方法慢病毒感染结肠癌SW480细胞干扰纤维粘连蛋白EDA片段表达,建立纤维粘连蛋白EDA片段低表达的SW480细胞。利用MTT检测干扰前后细胞增殖的变化,并采用流式细胞术检测干扰前后细胞凋亡的变化。同时使用Western blot分别检测干扰前后凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达变化。结果慢病毒感染结肠癌SW480细胞后,纤维粘连蛋白EDA片段持续低表达。MTT法结果显示,干扰纤维粘连蛋白EDA片段24、48、72、96 h后细胞生长速度明显降低。转染组与未转染组及空载体组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示未转染组、空载体组及转染组的细胞凋亡率分别为(3.09±1.13)%、(3.71±0.42)%、(47.76±1.51)%,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot的结果显示干扰纤维粘连蛋白EDA片段后促凋亡因子Bax表达上调,同时,凋亡抑制因子Bcl-2表达降低。结论纤维粘连蛋白EDA片段对结肠癌SW480细胞具有促增殖、抗凋亡作用。
- 耿培亮欧娟娟萨日娜何金霞谢赣丰刘平梁后杰
- 关键词：纤维粘连蛋白RNAI结肠癌增殖凋亡
- HIF-2α启动子上游长链非编码RNA-HIF2PUT在结直肠癌中的表达及与肿瘤干细胞相关的功能研究
- 【目的】 初步研究HIF-2α启动子上游lncRNA-HIF2PUT在结直肠癌及癌旁组织中的表达情况。在此基础上明确lncRNA-HIF2PUT和HIF-2α表达的相关性及调控关系。初步探讨lncRNA-HIF2PUT在...
- 耿培亮
- 关键词：结直肠癌长链非编码RNA肿瘤干细胞
- 纤维粘连蛋白EDA片段调控结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和糖酵解及其机制研究
- 目的结直肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率占胃肠道肿瘤的第3位。肿瘤间质成分及其分泌的生长因子等构成的肿瘤微环境在恶性肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。近年的研究表明,肿瘤微环境与恶性肿瘤的能量代谢密切相关。纤维粘连蛋白（Fi...
- 耿培亮姚杰沈蕾陈杨李懿
- 关键词：结肠癌纤维粘连蛋白葡萄糖转运蛋白RNAI
- 文献传递
- 纤维粘连蛋白EDA片段调控结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和糖酵解及其机制研究
- 背景与目的 结直肠癌是常见的恶性肿瘤,其发病率占胃肠道肿瘤的第3位。尽管肿瘤的早期诊断和临床治疗取得了很大进步,但是每年全世界仍有超过50 000结肠癌患者死亡,占全部肿瘤死亡人数的10%。在我国,随着饮食习惯的改变,其...
- 耿培亮
- 关键词：结肠癌纤维粘连蛋白葡萄糖转运蛋白RNAI
- 文献传递
- 基于TEM-8新型颗粒性疫苗对结肠癌小鼠模型免疫治疗的作用
- 2010年
- 目的:用基于TEM-8(tumor endothelialmarker-8)真核表达的颗粒性疫苗免疫荷结肠癌小鼠,探讨该疫苗的免疫治疗作用。方法:用阳离子肽[K]16-tat49-57与带有负电荷的真核表达质粒结合成颗粒性疫苗,用透射电镜和免疫印迹法鉴定,酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测疫苗所诱导的特异性CTL分泌IFN-γ,并对荷瘤Balb/c小鼠进行免疫治疗后,观察荷瘤体积和小鼠生存率,用免疫组化方法(抗CD31)观察肿瘤组织血管生长情况,并计算肿瘤微血管密度。结果:在电荷比为r=2的制备条件下,所构建的颗粒性疫苗进行电镜扫描,显示疫苗能形成颗粒,转染COS-7细胞后可有效介导TEM-8蛋白表达。ELISPOT检测显示在体内疫苗能有效激发抗原特异性CTL效应,可诱导CTL产生IFN-γ等细胞因子,肿瘤治疗实验证实,颗粒性疫苗能有效抑制肿瘤的生长速度,提高荷瘤小鼠的生存率,与对照组相比差异有统计学意义,P<0.05。结论:基于TEM-8的新型抗肿瘤血管生成疫苗能有效激发出特异性CTL应答,并在荷瘤小鼠模型中有效抑制肿瘤血管生成,提高荷瘤小鼠的生存率,为新型结肠癌治疗性疫苗的设计提供了新思路。
- 阮志华刘平郑晨宏童晶涛欧娟娟谢赣丰何金霞耿培亮萨日娜边志衡梁后杰
- 关键词：TEM-8结肠肿瘤免疫治疗血管生成
- 重组人血管内皮抑素对人结肠癌淋巴管内皮细胞成管抑制作用机制的探讨被引量：5
- 2010年
- 目的:研究重组人血管内皮抑素(商名品:恩度)是否可通过抑制结肠癌细胞EDA表达从而影响结肠癌淋巴管生成。方法:分别用单纯培养和经重组人血管内皮抑素处理的SW480细胞培养上清液处理人淋巴管内皮细胞(hLECs),三维培养观察hLECs体外成管能力的差异,蛋白质印迹法检测hLECs中integrinα9的表达差异。结果:SW480细胞高表达EDA蛋白片断,重组人血管内皮抑素呈浓度依赖性地抑制EDA片断在SW480中的表达。单纯培养的SW480培养上清液(条件培养基Ⅰ)可促进hLECs体外成管,SW480经重组人血管内皮抑素处理后其培养上清液(条件培养基Ⅱ)促hLECs体外成管的效应被削弱,hLECs小管形成数量明显减少,各实验组小管形成数量差异有统计学意义,P<0.01。与之对应地,条件培养基Ⅱ处理组中hLECsEDA受体integrinα9的表达水平较条件培养基Ⅰ中hLECs下降(P<0.05)。结论:EDA在肿瘤淋巴管生成中具有重要作用,重组人血管内皮抑素可通过EDA-integrinα9途径有效抑制hLECs体外成管能力。
- 欧娟娟耿培亮李建军萨日娜童晶涛梁后杰
- 关键词：重组人血管内皮抑素淋巴管内皮细胞纤维粘连蛋白结肠肿瘤淋巴管生成
- 内源性一氧化氮合酶基因多态性(T-786C)与缺血性卒中易感性、一项Meta分析
- 刘若卓耿培亮于生元王晓琳张威邸海
- 关键词：缺血性卒中META分析
