邢智峰 作品数:15 被引量:130 H指数:5 供职机构: 焦作师范高等专科学校生物系 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 河南省教育厅自然科学基金 河南省高校青年骨干教师资助项目 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 化学工程 更多>>
苔藓植物SRAP反应体系的优化 被引量:3 2009年 以黄灰藓总DNA为材料,对影响SRAP-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素进行了优化,分析了各因素对SRAP-PCR扩增结果的影响。结果表明,在25μLSRAP-PCR反应体系中,最佳反应条件为:模板DNA40ng;Mg2+浓度2.0mmol/L;dNTP浓度0.2mmol/L;正反引物15pmol;TaqDNA聚合酶2.0U。在此条件下,引物组合Me5/em7对13种苔藓植物扩增的条带清晰、多态性好,表明此反应条件适合于苔藓植物的SRAP-PCR反应体系。 张安世 邢智峰 韦慧彦 张为民 刘永英关键词:苔藓 苔藓植物DNA不同提取方法的比较分析 被引量:44 2009年 以苔藓植物为材料,比较快速提取法、SDS法和改良CTAB法(自行设计)提取苔藓植物总DNA的效果.结果表明:改良CTAB法提取的基因组DNA质量最好(A260/A280为1.83~1.86;A260/A230为2.05~2.50),快速提取法次之(A260/A280为1.64~1.73;A260/A230为1.68~1.77),SDS法较差(A260/A280为1.51~1.61;A260/A230为1.56~1.76).改良CTAB法提取的苔藓植物的DNA适合于作为PCR的模板,并成功地进行了RAPD扩增. 张安世 邢智峰 刘永英 张为民关键词:苔藓植物 DNA提取 SDS法 CTAB法 RAPD扩增 SRAP体系中苔藓植物遗传多样性分析中的正交优化及初步应用 2010年 以黄灰藓为材料,通过正交法优化SRAP-PCR反应条件,并在此基础上对11种苔藓植物进行遗传多样性分析。结果表明:苔藓植物SRAP反应(25μL体系)的最佳条件为:40 ng DNA模板,2.5 mmol/LMg^(2+),0.3 mmol/L dNTP,15 pmol引物,1.5 U Taq酶。用30对引物组合进行筛选,有5对引物组合扩增条带清晰,重复性好,共扩增出65条带,其中多态性条带63条,多态性比率为96.9%。通过SPSS11.5分析软件对扩增结果进行聚类分析,结果与形态学分类基本一致,说明SRAP技术可用于苔藓植物的遗传多样性研究。 张安世 张为民 邢智峰 刘永英 辛泽华关键词:苔藓 SRAP 正交设计 亲缘关系 RAPD和SRAP标记技术在苔藓植物亲缘关系研究中的比较分析 被引量:2 2010年 利用RAPD和SRAP标记技术研究11种苔藓植物的亲缘关系,并进行比较分析。结果表明:RAPD扩增的多态性比率达100%,SRAP扩增的多态性比率达96.9%,2种标记结果均显示了很高的多态性比率。利用SPSS11.5软件对RAPD和SRAP扩增结果进行了聚类分析,两者均与形态学分类基本一致,但与形态学结果也有一定的差异,这种差异主要表现在科以上植物种类之间。同时,2种分子标记的聚类结果之间也存在一定的差异,主要是对大叶凤尾藓和小牛舌藓全缘亚种的划分。因此,RAPD和SRAP都有一定局限性,需要多种标记方法相互结合、相互印证,才能得出客观的结果。 张安世 张为民 邢智峰 刘永英 韦慧彦 辛泽华关键词:苔藓 RAPD 亲缘关系 毛白杨4CL基因启动子的克隆及初步功能分析 被引量:6 2007年 4CL(4-coumarate:CoA ligase,4-香豆酸:辅酶A连接酶)在植物木质素合成途径中催化羟基香豆酸生成羟基肉桂酰CoA,主要在木质部中表达,对植物木质素生物合成具重要调控作用.为研究4CL基因启动子在转基因植物中的表达特性,探索其在植物基因工程研究中的潜在应用价值,利用PCR方法从毛白杨基因组DNA中扩增得到了4CL启动子片段.序列分析表明与美洲山杨(P.tremuloids)的4CL启动子同源性为95%.采用生物信息学方法对该序列进行分析.与GUS基因融合构建双元表达载体,转化烟草的瞬时表达检测可见明显GUS活性. 邢智峰 张安世 徐存栓 魏建华关键词:毛白杨 GUS基因 水稻RAPD反应体系的正交优化 被引量:7 2009年 以焦旱1号总DNA为材料,首先对影响RAPD-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素进行了初步优化,分析了各因素对RAPD-PCR扩增结果的影响。在此基础上对影响RAPD-PCR反应的Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等4个主要因素进行正交优化,研究结果表明:在25μlRAPD-PCR反应体系中,模板DNA20ng;Mg2+浓度1.5mmol/L;dNTP的浓度0.2mmol/L;引物量15pmol;TaqDNA聚合酶1.0U。在此最佳条件下,利用引物B8对18个北方粳稻品种进行了成功的扩增。 张安世 邢智峰 徐九文 张利民 韦慧彦关键词:PCR 北方粳稻品种类群划分及亲缘关系的RAPD分析 被引量:1 2009年 鉴于国内粳稻的类群划分及亲缘关系还鲜有RAPD分析的相关研究报道,本研究利用RAPD分子标记技术对18个北方粳稻品种进行了分类和亲缘关系研究,从80个随机引物中筛选出了21个引物用于PCR反应,共在146个位点上扩增出条带,平均每个引物扩增的位点数为6.95个,多态性位点104个,多态性比率为71.23%,显示了较高的多态性。其中,有15个引物具有单一标记条带或特异缺失条带,共可鉴别10个品种。应用SPSS11.5分析软件对18种供试材料进行了聚类分析,实验结果显示:18种粳稻品种可明显分为3类,第Ⅰ类的10个粳稻品种有8个品种与系谱分析结果相符,第Ⅱ类和第Ⅲ类中的粳稻品种都分别具有血缘关系,与系谱分析结果基本吻合。综上所述,RAPD技术在北方粳稻品种类群划分及亲缘关系研究中的应用是可行的。但两者的分析结果也存在一定的差异,我们建议在实际工作中应将分子标记法和系谱法有机结合、相互印证,减少亲本选择的盲目性,提高育种工作的可预见性。 张安世 徐九文 张利民 邢智峰 韦慧彦关键词:粳稻 RAPD分析 系谱分析 类群划分 亲缘关系 溶血磷脂的应用 被引量:1 2007年 溶血磷脂是磷脂在磷脂酶A2作用下失去一分子脂肪酸而成,因其非极性基团的减少而极大地增强了亲水性能,因而具有优良的乳化稳定性。着重研究了溶血磷脂在饲料、化妆品、食品、医药等方面的应用,并讨论了溶血磷脂的安全性问题。 邢智峰 张安世关键词:磷脂 溶血磷脂 磷脂酶A2 高温与低剂量香烟联合致仔鼠的神经行为异常(英文) 被引量:2 2005年 背景:神经行为是评价中枢神经发育异常的最敏感指标,导致其发育畸形的影响因素较多。为此,探讨高温与香烟联合环境下对神经行为发育的影响。目的:探讨高温与香烟联合对仔鼠神经行为发育的影响。设计:以动物为观察对象的随机对照实验。单位:新乡医学院第三附属医院妇产科和新乡医学院的细胞生物学教研室。材料:健康未生育的SD大鼠270只,雌性大鼠180只,体质量190~210g,雄性大鼠90只,体质量225~275g,鼠颗粒饲料喂养,常规饮水,自然光照,室温25℃。将动情期的雌雄大鼠按2:1合笼过夜,次日晨检到阴栓为妊娠第0d,共获孕鼠160只,随机分成16组,暴露于高温、香烟及高温联合香烟的条件下,孕鼠自然分娩,观察仔鼠的早期反射和学习记忆。干预:160只孕鼠从妊娠第2d开始,37℃,41℃,42℃高温联合香烟组大鼠每只隔日皮下注射相当于1.0支香烟水溶物,25℃对照组和37℃,41℃,42℃单独高温组每日注射2.0mL的双蒸水,共7次。于孕第10d将孕鼠置于温箱中,37℃,41℃,42℃单独高温组肛温分别保持在(37+0.5)℃,(41+0.5)℃,(42+0.5)℃,持续2.0min;37℃,41℃,42℃高温联合香烟组肛温保持同单独高温组,每组均分别持续0.5,1.0,1.5,2.0min;25℃对照组不做高温处理。受孕18d后单笼饲养待其自然分娩。记录妊娠天数、仔鼠数、死胎数。 任太芳 邢智峰 丰慧根 李延兰 杨保胜关键词:记忆 北方粳稻SRAP反应体系的建立与优化 被引量:2 2010年 以粳型旱稻品种焦旱1号总DNA为材料,首先对影响北方粳稻SRAP-PCR反应的模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等因素进行了初步优化,分析了各因素对SRAP-PCR扩增结果的影响。在此基础上对影响SRAP-PCR反应的Mg2+、dNTP、引物和TaqDNA聚合酶浓度等4个主要因素进行了正交优化。研究结果表明,利用引物组合Me6/em7对18个北方粳稻品种进行了成功扩增,最佳条件为:25μL SRAP-PCR反应体系中,模板DNA为20 ng;Mg2+为2.0 mmol/L;dNTP为0.3 mmol/L;正反引物为15 pmol;TaqDNA聚合酶为1.5 U。 张安世 刘莹 徐九文 张利民 邢智峰关键词:水稻 SRAP