赵森
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
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- RT-PCR检测CPIV方法的建立与应用被引量：3
- 2011年
- 【目的】建立CPIV的RT-PCR检测方法。【方法】从临床上疑似犬副流感(CPI)的犬鼻腔分泌物中提取CPIV总RNA。根据Genebank中收录的CPIV(序列号AY581307)中NP基因保守序列,设计一对特异性引物,扩增出667 bp片段,以此建立CPIV的RT-PCR检测方法。【结果】特异性试验表明该引物不能扩增犬其它常见的传染病病毒基因。敏感性试验表明该引物能检测到10^(-6)的CPIV总RNA量。重复性试验表明该引物具有良好的稳定性和重复性。对临床采集的32份样品进行RT-PCR检测时,阳性率为53.12%。【结论】实验建立了CPI的RT-PCR检测方法,可适合于临床CPIV的早期快速诊断和小规模的分子流行病学调查。
- 简子健马素贞刘腾飞翟少华赵森
- 关键词：犬副流感病毒NP基因反转录聚合酶链反应早期快速诊断
- 犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒的构建与瞬时表达
- 2012年
- 【目的】构建犬细小病毒(CPV)VP2基因真核表达质粒,为研究核酸疫苗奠定基础。【方法】参考GenBank中发表的CDV N蛋白基因序列设计引物,采用RT-PCR方法从疑似犬瘟热病犬全血样品中扩增CDV N蛋白基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)。经测序验证后,小白鼠尾静脉注射瞬时表达CDV N蛋白基因,8 h取其肝脏提取总RNA,进行RT-PCR方法扩增。【结果】在病犬的全血样品中扩增得到1 572 bp的CDV N蛋白基因片段,并构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CDV N,从瞬时表达的小白鼠肝脏总RNA中可扩增到目的条带。【结论】构建了犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达质粒,并在小白鼠体内进行了瞬时表达。
- 简子健马素贞申卫红翟少华赵森
- 关键词：犬瘟热病毒N蛋白基因真核表达载体
- 犬细小病毒VP2基因真核表达质粒的构建与瞬时表达
- 2011年
- 【目的】构建犬细小病毒(CPV)VP2基因真核表达质粒,为研究核酸疫苗奠定基础。【方法】根据CPVVP2基因序列设计特殊引物,采用PCR方法从疑似"犬细小病毒"的患犬粪便基因组中扩增VP2基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后,小白鼠尾静脉注射瞬时表达VP2基因,8 h后取小白鼠肝脏提取总RNA,进行RT-PCR扩增。【结果】在病犬粪便基因组中扩增得到1 755 bp的VP2基因片段,并构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-VP2,从瞬时表达的小白鼠肝脏总RNA中可扩增到目的条带。【结论】成功构建了犬细小病毒VP2基因真核表达重组质粒,并在小白鼠体内进行了瞬时表达。
- 简子健马素贞陈胜男翟少华赵森
- 关键词：犬细小病毒VP2基因真核表达载体
- 中药制剂“毒瘟清”对白羽肉鸡和海兰褐壳蛋鸡生产性能及免疫功能的影响
- 中药制剂毒瘟清在不同生长阶段的猪群中的应用取得了较好的效果,有清热解毒、扶正祛邪,活化免疫系统,提高生产性能等功效,但对白羽肉鸡或海兰褐蛋鸡的生产性能及免疫功能的影响有待进一步研究。本文使用中药制剂毒瘟清对白羽肉鸡和海兰...
- 赵森
- 关键词：中药制剂白羽肉鸡海兰褐壳蛋鸡免疫功能
- 文献传递
- 犬细小病毒巢式PCR诊断方法的建立及应用被引量：2
- 2012年
- 【目的】以期建立犬细小病毒巢式PCR诊断方法。【方法】根据基因库已发表的CPV VP2基因序列设计二对巢式引物,以临床上疑似CPV感染的犬粪样品中提取的总DNA作为模板,用巢式PCR方法扩增出CPV VP2基因的目的条带。【结果】扩增出的目的基因与国际标准序列的同源性为99.3%～100%。特异性试验发现该引物不能启动犬其它常见病毒基因的扩增。敏感性试验表明该引物能检测到10-9的CPV总RNA量。重复性试验显示该引物具有良好的稳定性。对采集的26份样品进行CPV巢式PCR检测,20份样品为阳性,阳性率为76.9%。【结论】建立的CPV的RT-PCR检测方法可于临床CPV的快速诊断和小规模的分子流行病学调查。
- 简子健马素贞陈胜男翟少华赵森
- 关键词：犬细小病毒巢式PCR
- 狂犬病病毒rSRV_9减毒株与亲本SRV_9毒株的病毒毒力比较
- 2012年
- 通过半数荧光灶形成量(FFD50)试验、小鼠半数致死量(LD50)试验、免疫组织化学试验,对10个培养代次的狂犬病病毒SRV9亲本毒株和rSRV9减毒株的病毒滴度、毒力及其致病性等病毒生物学特性进行检测,以鉴定拯救狂犬病rSRV9减毒株与亲本SRV9毒株病毒滴度及毒力的差异性。试验结果显示,10个培养代次的狂犬病病毒rSRV9减毒株FFD50值为5.44～7.46logFFD50/0.1mL,LD50值为2.47～2.68logLD50/0.03mL;亲本SRV9毒株FFD50值为6.36～6.79logFFD50/0.1mL;LD50值为5.56～5.79logLD50/0.03mL,通过免疫组织化学试验,检测出脑内注射SRV9毒株和rSRV9减毒株死亡小鼠脑神经细胞内的狂犬病病毒。
- 翟少华马素珍赵森高攀夏婷婷苏晓慧易忠魏玉荣简子健
- 关键词：狂犬病病毒
- 犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白原核表达条件的优化与蛋白纯化被引量：1
- 2012年
- 【目的】提高犬瘟热病毒N蛋白基因在大肠杆菌中表达可溶性GST融合蛋白的含量。【方法】研究诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件对GST-CDV N融合蛋白表达的影响,获得在大肠杆菌中的最佳的表达条件,然后再在最佳条件下大量的表达,用GST-Sepharose 4B亲和层析柱对GST-CDV N融合蛋白进行纯化,得到最大量的可溶性融合蛋白,并对蛋白含量进行测定。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)转化菌在37℃培养3.5 h(OD600=1.314)时,加入IPTG使终浓度为1 mmol/L,然后在27℃诱导8 h,GST-CDV N融合蛋白可溶性表达量最高,达到0.862 mg/mL。【结论】确定了犬瘟热病毒N蛋白基因的优化表达条件,为犬瘟热病毒分子免疫学诊断和亚单位疫苗的研制奠定了基础。
- 简子健马素贞申卫红翟少华赵森
- 关键词：犬瘟热病毒N蛋白基因融合蛋白纯化
- 犬传染性肝炎病毒Hexon基因原核表达条件的优化与表达蛋白的活性被引量：1
- 2011年
- 【目的】为了提高犬传染性肝炎Hexon蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,研究Hexon基因蛋白的最佳表达条件和表达蛋白的活性。【方法】在大肠杆菌菌株BL21(DE3)培养过程中,选择诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件观察对Hexon融合蛋白表达的影响,以确定最佳表达条件,并用Western-blot检测重组蛋白的生物活性。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)在37℃培养2.25 h后,添加终浓度为2.0 mmol/L的IPTG,27℃培养8 h,Hexon重组蛋白表达量最高(1.67 mg/mL),所表达的重组蛋白能与犬传染性肝炎阳性血清相结合。【结论】在高浓度IPTG诱导和冷培养条件下,Hexon蛋白基因的表达量最高,表达出的重组蛋白具有很好的反应原性,为进一步研究六邻体蛋白的作用机理及亚单位疫苗的研究提供了实验基础。
- 简子健马素贞陶玉成翟少华赵森
- 关键词：原核表达表达条件优化重组蛋白生物活性
- 中药制剂毒瘟清对白羽肉鸡生产性能和免疫功能的影响被引量：2
- 2013年
- 【目的】研究中药制剂毒瘟清对白羽肉鸡增重和免疫器官发育及其功能的影响。【方法】将9000只体重相近健康的1日龄白羽肉鸡(混雏)随机分为3个组,每个组3次重复,每次重复1000只。对照组为基础日粮饲喂组,其余2组为实验组。实验组1、2分别在基础日粮中添加500 g/600 kg,500 g/400 kg的毒瘟清,对肉鸡的日增重、料重比、免疫器官质量及指数、新城疫抗体效价、淋巴细胞转化率等几个指标进行定期测定。【结果】添加毒瘟清能显著提高肉鸡外周血淋巴细胞的转化率,增强其对新城疫疫苗的免疫应答,提高脾脏指数,提高日增重,降低料重比。【结论】毒瘟清能提高肉鸡免疫能力和生产性能,为中药制剂代替部分化学兽药提升生产性能提供理论依据,在肉鸡产业中有广阔的应用前景。在生产中应以500 g毒瘟清/600 kg饲料为最佳添加剂量。
- 赵森翟少华高攀夏婷婷苏晓慧简子健
- 关键词：中草药免疫增强剂白羽肉鸡免疫性能
- 狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备及理化性质的检测被引量：2
- 2013年
- 【目的】分析研发的狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的脂质体形态、粒径分布状态、疫苗抗原包封率,确定狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的制备工艺。【方法】(1)以大豆卵磷脂、胆固醇、十八胺、VE等物质为原料,采用薄膜分散法制备空白脂质体,采用电子显微镜和激光粒径分布仪测定空白脂质体的形态与粒径分布;(2)采用冷冻干燥方法将狂犬病rSRV9减毒株与空白脂质体等体积混合后冻干,制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗;(3)采用BCA蛋白定量法检测狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗的抗原包封率。【结果】制备空白脂质体形态为大单室脂质体;平均粒径为378 nm;疫苗包封率为71.19%。【结论】薄膜分散-冻干方法制备狂犬病减毒脂质体口服冻干活疫苗,抗原包封率高、性状稳定。
- 翟少华骆建敏赵森马素贞高攀苏晓慧夏婷婷张美玲李建飞简子健
- 关键词：脂质体口服活疫苗
