翟少华 作品数:91 被引量:126 H指数:5 供职机构: 新疆农业大学动物医学学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 新疆维吾尔自治区自然科学基金 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 文化科学 生物学 更多>>
犬传染性肝炎病毒Hexon基因原核表达条件的优化与表达蛋白的活性 被引量:1 2011年 【目的】为了提高犬传染性肝炎Hexon蛋白基因在大肠杆菌中的表达量,研究Hexon基因蛋白的最佳表达条件和表达蛋白的活性。【方法】在大肠杆菌菌株BL21(DE3)培养过程中,选择诱导剂(IPTG)的最佳加入时间、诱导剂(IPTG)浓度、诱导时间以及不同温度条件观察对Hexon融合蛋白表达的影响,以确定最佳表达条件,并用Western-blot检测重组蛋白的生物活性。【结果】大肠杆菌BL21(DE3)在37℃培养2.25 h后,添加终浓度为2.0 mmol/L的IPTG,27℃培养8 h,Hexon重组蛋白表达量最高(1.67 mg/mL),所表达的重组蛋白能与犬传染性肝炎阳性血清相结合。【结论】在高浓度IPTG诱导和冷培养条件下,Hexon蛋白基因的表达量最高,表达出的重组蛋白具有很好的反应原性,为进一步研究六邻体蛋白的作用机理及亚单位疫苗的研究提供了实验基础。 简子健 马素贞 陶玉成 翟少华 赵森关键词:原核表达 表达条件优化 重组蛋白 生物活性 牛蛙皮肤显微及超微结构研究 被引量:1 2018年 依次采用了苏木紫-伊红(HE)染色法、Masson氏三色法,Mallory磷钨酸苏木紫染色法对牛蛙的皮肤组织结构进行研究;并通过透射电镜技术,观察不同部位皮肤的超微结构差异。通过研究结果显示,牛蛙皮肤的表皮结构从内到外依次为基底层、棘细胞层、颗粒层、角质层。牛蛙的真皮层有大量的腺体,主要为黏液腺和颗粒腺,此外还有大量的黑色素散布于真皮层中。通过牛蛙皮肤各部位测量数据分析显示,牛蛙皮肤不同部位间存在显著差异。通过对牛蛙的皮肤组织形态学研究,可以为皮肤及皮下组织细胞间形态学的研究提供研究基础。 翟少华 贾钦瑞 李淑娴 姚刚关键词:牛蛙 皮肤 eGFP标记狂犬病病毒G基因与EgM123基因重组融合蛋白的表达与鉴定 2022年 【目的】反向遗传学技术构建EgM123基因重组狂犬病SRV_(9)病毒疫苗株,研究狂犬病病毒G基因、细粒棘球绦虫EgM123基因、eGFP基因重组质粒在真核细胞中的蛋白表达效果与蛋白免疫原性,为通过反向遗传学拯救eGFP标记EgM123基因重组狂犬病病毒,制备狂犬病-包虫病二联基因重组疫苗提供研究基础。【方法】将已构建的携带eGFP增强型绿色荧光蛋白的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒(3033 bp)利用脂质体转染方法转染BHK-21细胞,使其在BHK-21细胞中表达出融合蛋白,并通过荧光显微镜观察、SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳、Western blotting试验鉴定融合蛋白的荧光蛋白表达、融合蛋白分子量,鉴定其免疫原性。【结果】在转然后48 h可见绿色荧光蛋白的表达;通过SDS-PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳结果显示,重组质粒在BHK-21细胞中表达获得分子量约为120KDa的融合蛋白;Western blotting结果显示,将蛋白凝胶转移PVDF膜分别经狂犬病病毒G蛋白单克隆抗体、EgM123多克隆抗体、GFP单克隆抗体分别孵育,均在120KDa处可见抗原抗体结合条带。【结论】eGFP标记的狂犬病病毒G基因重组细粒棘球绦虫EgM123基因重组质粒在真核细胞中成功表达出融合性蛋白,且具有免疫原性。 阿尔祖古丽·阿卜力孜 胡美荷 王楠 刘来珍 古丽妮尕尔·阿力普江 翟少华关键词:EGFP基因 融合蛋白 3例圈养长颈鹿最急性死亡症候群的病理学诊断 被引量:1 2018年 圈养长颈鹿最急性死亡症候群是一种由于长期的营养不平衡和环境应激因素而出现的以心脏浆液性脂肪萎缩、肠胃道症状、肌肉变性、水肿和肺炎为主要病理变化,最终导致圈养长颈鹿无明显临床而突然死亡的疾病。本文作者于2015年在台湾大学访学期间,参与诊断新竹六福村野生动物园2例和台北市立动物园发生1例圈养长颈鹿最急性死亡病例。经尸体剖检发现3个病例均出现尸体消瘦,心脏浆液性脂肪萎缩,瘤胃鼓胀,皱胃有少量捻转胃虫寄生;此外,出現腹腔腹水增加,肠系膜间脂肪和肾盂部呈现浆液性萎缩,舌体部背侧溃疡,膀胱内膜点状出血等病理变化。根据临床表现和病理学变化将其诊断为圈养长颈鹿最急性死亡症候群。 翟少华 金天纵 张品御 叶子宁 金仕谦 张志华 刘振轩关键词:长颈鹿 细粒棘球绦虫EgM123基因序列分析及EgM家族基因在虫体不同发育阶段的差异表达分析 被引量:5 2017年 对细粒棘球绦虫EgM123基因进行分子克隆和生物信息学分析,同时对EgM家族基因在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平进行初步研究。采集绵羊肝脏包囊中原头蚴,提取总RNA,通过RT-PCR获取EgM123纯化的PCR产物,克隆到pGEM-T载体并测序,对测序结果进行结构和功能的预测分析。以Actin基因为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR技术,对不同发育阶段,即其原头蚴和成虫的EgM4、EgM9、EgM123的表达量进行检测。结果表明,EgM123基因ORF为594bp,编码197个氨基酸,蛋白分子质量为21.959ku,等电点为7.94。EgM123蛋白无信号肽、跨膜螺旋区和卷曲螺旋结构,是一种亲水性的可溶性蛋白质,存在23个磷酸化位点。根据亚细胞定位预测显示,EgM123蛋白主要位于细胞核内。二级结构预测含α-螺旋9.64%、β-折叠22.84%、无规则卷曲62.94%。EgM123氨基酸序列中有6个潜在的抗原表位。RT-qPCR结果显示,成虫阶段EgM家族基因表达量极显著高于原头蚴阶段。在发育的同一阶段,EgM123基因极显著高于EgM4、EgM9基因的表达量。通过EgM家族基因在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平,EgM123基因在虫体成虫阶段高表达,以期为筛选细粒棘球绦虫终末宿主疫苗候选基因提供理论依据。 毛丽萍 王正荣 王伟 魏玉圆 翟少华 甘尚权 简子健关键词:细粒棘球绦虫 抗原基因 乌鲁木齐市宠物福利状况的调查 被引量:1 2019年 随着人民生活水平的提高,猫、狗等伴侣动物逐渐进入了千家万户,为人们的休闲生活增添了不少乐趣。但对于大多数民众来说,宠物福利依然是一个相对陌生的名词且少有人关注。目前,我国犬猫被遗弃数量明显增多,在大街小巷随处可见它们的身影,严重影响市容,影响人们的正常生活,虐待现象越发频繁,如“活熊取胆”“硫酸泼熊”“活猪注水”以及“虐猫事件”等并通过网络传播获得大量关注引起热议,这些均已成为影响当今社会生活的重要问题。为了更好地了解乌鲁木齐市宠物饲养水平、宠物健康状况、宠物关爱程度和动保意识,对全市部分社区、宠物医院进行了问卷调查,以阐释现代都市宠物的饲养和关爱水平,并呼吁大家关注动物身心健康,关注动物福利,严禁抛弃行为。 郭雪萍 阿尔祖古丽·阿卜力孜 吕芬芬 翟少华关键词:乌鲁木齐 昆明小鼠心源性肺水肿肺脏组织超微结构病理变化的研究 本次实验以昆明小鼠为模型动物,通过腹腔注射不同剂量肾上腺素,导致小鼠产生心脏和呼吸系统血液循环障碍,从而模拟心源性肺水肿的发生机制。通过病理解剖学、病理组织学和超微病理学的检测方法对实验小鼠组织结构进行观察,以确定心源性... 王金泉 翟少华 王栋 韩玉 姚刚关键词:小鼠 肺水肿 超微结构 病理变化 文献传递 乌鲁木齐市冬春两季宠物源葡萄球菌的耐药性及耐药基因比较 被引量:2 2019年 采用琼脂稀释法,检测从乌鲁木齐市部分宠物医院冬季和春季分离鉴定的154株宠物源葡萄球菌(冬季75株、春季79株)对临床常用的12种抗菌药物(阿米卡星、克林霉素、硫酸庆大霉素、氟苯尼考、四环素、利福平、恩诺沙星、青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、左氧氟沙星)的耐药性;通过卡方检验,比较供试菌耐药性差异;采用PCR方法,检测葡萄球菌的5类9种耐药基因。对抗菌药物的耐药结果显示:冬季葡萄球菌对苯唑西林和青霉素的耐药率高于90.0%,对头孢噻呋和四环素的耐药率高于50.0%;春季葡萄球菌对左氧氟沙星耐药率达92.4%,对苯唑西林和氟苯尼考耐药率高于80.0%。卡方检验结果显示:冬季葡萄球菌仅对苯唑西林的耐药率显著高于春季葡萄球菌(P<0.05);春季葡萄球菌对氟苯尼考、利福平、左氧氟沙星、恩诺沙星和阿莫西林/克拉维酸的耐药率均显著高于冬季葡萄球菌(P<0.05)。多药耐药差异性结果显示:冬季葡萄球菌多药耐药集中在1~3耐;春季葡萄球菌多药耐药集中在4、6、9耐。基因检测结果显示:冬季葡萄球菌主要检出的基因有ermB(40.0%,30/75)和fexA(22.7%,17/75);春季葡萄球菌主要检出的基因有fexA(39.3%,31/79)和femA(20.3%,16/79),冬、春季葡萄球菌均未检出cfr、fexB和tetA基因。 轩慧勇 苏战强 翟少华 姚晓慧 夏利宁关键词:耐药性 耐药基因 运输应激对马血细胞和血液生化指标的影响 2021年 为了调查运输应激对伊犁马血细胞和血液生化指标的影响,试验选取6匹伊犁母马,进行400 km里程的运输,总运输时间为8 h,分别在运输0、4、8 h和落地12 h后,测定马血清急性期蛋白(APPs)、皮质醇(Cor)、热休克蛋白(HSPs)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量以及血液常规指标。结果显示,与运输0 h相比,运输8 h马触珠蛋白(HP)含量显著上升(P<0.05),运输4、8 h和落地12 h后马血清Cor含量均极显著上升(P<0.01);落地12 h后马血清HSP90含量极显著下降(P<0.01);运输对马血清IFN-γ和TNF-α含量均无显著影响(P>0.05);运输4、8 h和落地12 h后血液红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、血小板分布宽度(PDW)、血小板大细胞比率(P-LCR)、粒细胞(GRAN)和粒细胞比率(GRAN%)均显著上升(P<0.05),中间细胞比率(MID%)、中间细胞(MID)、血红蛋白浓度(MCHC)均显著下降(P<0.05)。综上所述,运输应激对马血清HP、Cor、HSP90浓度、血液RDW-SD、PDW、P-LCR、GRAN%、GRAN、MID%、MID和MCHC均产生显著影响,这些指标可用于评价马对运输应激的敏感性。 唐安琪§ 屈瑞§ 买占海 翟少华 孙亚伟 曹冬梅 侯建军 刘斌 朱义忠 王金泉关键词:运输应激 伊犁马 新疆一起驴腺疫的诊断与治疗 被引量:3 2019年 2018年5月中旬,新疆和田地区某驴养殖场刚引进的8000余头肉驴陆续出现一种急性、高热性群发疾病,平均日死亡数高达20余头。发病驴临诊表现为体温升高(40~43℃)、心跳加快、腹式呼吸、食欲废绝以及分泌灰黄色浓稠鼻液等。剖检病死驴可见,肝脏肿大、淤血,肺脏充血、出血,气管内聚集大量暗红色液体,脾脏暗黑且极度肿大,有些死驴有胃破裂现象,腹腔内充满胃内容物,其他脏器未见明显病理变化。无菌采集驴心血、肺脏、肝脏、脾脏和肾脏样本,进行细菌分离鉴定和药敏试验,通过触片镜检、分离培养、16S鉴定、生化试验等,鉴定分离菌为马链球菌马亚种。药敏试验显示,该分离菌株对β-内酰胺类药物敏感,对氨基糖苷类药物和四环素类药物敏感性低。根据药敏试验结果迅速选择合适药物进行治疗,驴群病情很快得到控制。结合临床症状、剖检病理变化、实验室诊断、干预治疗等,最终确诊该驴场发生的疫病是由马链球菌马亚种引起的驴腺疫。 苏战强 孙雪 翟少华 张毅 佟盼盼 阿不力米提·沙吾提