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何首乌cDNA文库的构建及分析被引量：2: 2008年; 目的为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了三年生何首乌叶cDNA文库。方法以何首乌成熟叶片为材料提取其总RNA;纯化出mRNA;反转录合成双链cDNA;钝化cDNA末端;连接上EcoR接头;经Xho酶切后,使用Sepharose CL-2B凝胶介质滤过,收集400bp以上的片段与Uni-ZAP XR载体连接,经包装蛋白包装成cDNA文库。Uni-ZAPXR载体可以在辅助噬菌体ExAssist helper phage的共感染下,快速释放出pBluescript SK-噬菌粒,经转染E.coliSOLR后,铺于氨苄青霉素抗性平板,分别利用PCR和双酶切的方法鉴定插入片段的大小。结果测定该初始文库的滴度为1.07×106pfu/mL,含有5.4×105个重组子,插入片断长度为0.5～2.0kb;扩增文库的重组子为4.25×1011个,重组率为98.5%。结论经检测所构建的文库库容量满足基因筛选要求,为进行中药材相关功能基因调控研究奠定基础。; 谭雪梅申彦晶严萍郑传进赵树进; 关键词：CDNA文库何首乌次生代谢产物

何首乌总RNA提取方法的比较及改进被引量：4: 2008年; 目的:探讨不同提取方法对提取何首乌总RNA的质量影响,寻找适于何首乌成熟叶组织RNA的提取方法。方法:以何首乌成熟叶组织为材料,采用SDS/酸酚法、常规CTAB法及改良的TRIzol试剂法分别进行实验,并对所提取RNA的质量进行验证。结果:采用3种方法都能提取出RNA,但质量差异较大。其中改良的TRIzol试剂法能有效抑制次生物质的影响,提取的RNA产量可达70～110μg/g,纯度高于其他2种方法,D260nm/D280nm值为1.85～1.97。结论:改良的TRIzol试剂法操作简便,提取的RNA完整性和纯度较高,可以满足下一步实验的要求。; 谭雪梅申彦晶严萍赵树进; 关键词：何首乌 RNA提取次生物质 RT-PCR

何首乌叶cDNA文库的构建及EST分析: 为进行药用植物次生代谢产物的生物合成基因调控研究,构建了何首乌cDNA文库。摘取三年生何首乌成熟叶片,提取其总RNA,纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,削平cDNA末端,连接EcoR I接头子,磷酸化EcoR I接头...; 谭雪梅申彦晶严萍郑传进赵树进; 关键词：何首乌 CDNA文库功能基因表达序列标签; 文献传递

药用植物功能基因组及EST分析: 为了进行传统中草药的基因组学研究,以期加深对有效成分的形成具有重要价值的功能基因的理解。本人综合前人研究,就目前药用植物功能基因组学、EST(Express Sequence Tag,EST)工程等有关研究背景和进展情况...; 谭雪梅赵树进; 关键词：植物功能基因组药用植物 EST; 文献传递

提取何首乌不同组织总RNA的一种有效方法被引量：5: 2008年; 通过优化何首乌不同组织总RNA的提取条件,将去污剂CTAB结合酸性酚的作用,可以有效防止基因组DNA的污染;利用不同的盐浓度下,RNA与多糖在溶解度上存在差异的特点,从而溶解RNA沉淀中残留的多糖,使后者留在上清液中;碱性裂解液(pH值8.0)和高浓度巯基乙醇的作用,PVP能有效结合多酚物质。这种改进方法经济且易于控制,得到的总RNA质量较高,可直接用于随后的分子生物学操作。; 谭雪梅申彦晶赵树进; 关键词：何首乌 RNA提取

我国不同地区白木香核糖体DNA内转录间隔区碱基序列分析被引量：12: 2009年; 目的:研究我国不同地区白木香核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)碱基序列的差异。方法:运用PCR法对白木香的ITS(包括ITS1,5.8S,ITS2)序列扩增后直接测序,用软件CLUSTALX和MEGA分析测序结果。结果:白木香ITS区总长度为680bp,其中ITS1为246bp,5.8S为163bp,ITS2为271bp。ITS序列在白木香种内的变异很小,只有6个变异位点,种内遗传距离为0.0%-1.1%。结论:ITS序列的差异为鉴别不同产区白木香及其近缘种提供了依据。; 申彦晶谭雪梅赵翾庞启华赵树进; 关键词：白木香 INTERNAL 分子鉴别

生物信息学在EST研究中的应用: 生物信息学已成为整个生命科学发展的重要组成部分,是生命科学研究的前沿领域。本文主要介绍生物信息学研究对象、技术、数据库、研究现状等,并对生物信息学在表达序列标,简称EST(Expressed Sequence Tags,...; 谭雪梅赵树进; 关键词：生物信息学 EST 数据库; 文献传递

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谭雪梅