胡皓
- 作品数：6 被引量：19H指数：2
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技统筹创新工程计划项目卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种同时分离培养大鼠肝细胞及肝枯否细胞技术的建立被引量：2
- 2013年
- 目的:建立简便、经济的同步分离培养肝细胞及kupffer细胞的方法。方法:采用肝脏原位灌洗结合离体胶原酶灌注消化的方法获得总细胞悬液,差速离心分离肝细胞及肝非实质细胞,经多次低速离心可分离肝细胞,经percoll密度梯度离心以及选择性贴壁法得到纯化的kupffer细胞。台盼蓝染色鉴定细胞活力。使用倒置相差显微镜、HE染色、PAS染色及白蛋白免疫组织化学染色对培养肝细胞的形态及功能进行检测。使用光学显微镜、荧光显微镜及CD68免疫荧光染色鉴定分离的kupffer细胞。结果:体外成功的同步分离培养了肝细胞及kupffer细胞,肝细胞产率为1.37±0.53×108/大鼠,kupffer得率为3.45±0.41×106/g肝脏。细胞存活率及纯度都可达90%。肝细胞培养24 h后呈典型肝细胞形态,7天后仍具有糖原合成和白蛋白合成能力。贴壁后的kupffer细胞呈典型的星型或三角形,且其标志分子CD68免疫荧光染色阳性。结论:应用改良的原位灌注方法可以很好的同时分离具有活性及功能的肝细胞和kupffer细胞。
- 王敏兰亚胡皓时永全韩英周新民
- 关键词：肝细胞枯否细胞
- 胃癌血管靶向肽GX2对胃癌血管内皮细胞靶向性的鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的:证明胃癌血管靶向肽GX2能够与胃癌血管内皮细胞特异性结合,在体内对胃癌血管具有靶向性。方法:体外实验,合成GX2与FITC的复合物FITC-GX2,分离原代人脐静脉内皮细胞HUVEC,将HUVEC与人胃癌细胞系SGC7901共培养,建立共培养血管内皮细胞模型来模拟胃癌血管,利用免疫荧光的方法观察GX2与共培养内皮细胞Co-HUVEC的结合情况;体内实验,构建99mTc标记的GX2分子示踪探针,SPECT显像观察GX2的胃癌血管靶向性。结果:免疫荧光结果显示GX2能与Co-HUVEC特异性结合,而与人胃癌细胞SGC7901不结合;SPECT显像结果证明了GX2在荷瘤裸鼠体内能够浓集到肿瘤部位,具有良好的靶向性。结论:GX2能与胃癌血管内皮细胞特异性结合,且具有在体靶向到胃癌血管的能力;GX2具有胃癌诊断的潜在价值,并能应用于胃癌血管抑制治疗。
- 殷继鹏窦维佳李明惠晓丽胡皓幺立萍聂勇战吴开春
- 关键词：肿瘤靶向胃癌人脐静脉内皮细胞
- TNF-α/ROS/HIF-1诱导FoxM1过表达促进肝细胞癌增殖以及增强抵抗凋亡被引量：1
- 2013年
- 转录因子FoxM1（ForkheadboxM1）对肿瘤细胞的生长和存活有重要的调节作用，从而在肝细胞癌的发生发展中扮演着重要的角色。然而，上调FoxM1表达的确切分子机制仍然不甚明了。本研究中我们发现，肿瘤坏死因子α （tumornecrosisfactor α，TNF-α）可以转录激活FoxM1，上调其表达。
- 夏丽敏莫萍黄文杰张琳王颖朱鸿武田德安刘剑陈章乾张永国陈峥胡皓樊代明聂勇战吴开春
- 关键词：TNF-Α肝细胞癌过表达ROS增殖
- 朊蛋白在结肠癌及结肠炎组织中的表达及其临床意义被引量：4
- 2014年
- 目的:观察朊蛋白(PrPc)在正常结肠粘膜、结肠炎及结肠癌组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:采用免疫组织化学法分别检测PrPc在正常结肠组织、结肠炎及结肠癌组织(各40例)中的表达,并分析其在结肠癌及结肠炎组织中的表达与患者性别、分化程度、TNM分期、淋巴结转移及炎症程度等临床特征间的关系。结果:PrPc在正常结肠及结肠癌组织中均有表达,在结肠炎中表达较低,在结肠癌组织中阳性表达率为60%(24/40),明显高于正常结肠组织的35%(14/40)及结肠炎组织的30%(12/40)(P<0.05)。轻度结肠炎中PrPc的阳性表达率明显高于重度结肠炎,结肠癌中PrPc的表达与患者的肿瘤分级、分期显著相关(P<0.05)。结论:PrPc在结肠癌中的表达增高,在结肠炎中表达较低,可作为临床判断结肠癌恶性程度及结肠炎炎症程度的重要参考指标。
- 梁聪胡皓方诚梁洁吴开春聂勇战
- 关键词：朊蛋白结肠癌结肠炎
- 人胃癌双标细胞系及鼠原位模型的高效构建被引量：1
- 2018年
- 目的建立一种高效胃癌原位模型。方法采用慢病毒感染方法构建稳定表达荧光素酶及GFP的双标细胞系SGC-7901/FLUC/GFP。将细胞悬液注射入造模小鼠胃浆膜下层,建模后第3天通过生物发光成像观测建模情况。2周后处死小鼠,通过HE及冰冻切片观察移植瘤形态。结果 SGC-7901/FLUC/GFP双标细胞系构建成功,该稳定转染细胞系高表达荧光素酶及GFP,细胞数目与荧光及生物发光信号呈线性正相关(R2=0.9667,r2=0.9110),可用于肿瘤在体观测。手术后第3天通过生物发光实验证实模型构建成功,肿瘤位于胃区生长。2周后通过HE及冰冻切片可见异型肿瘤细胞生长,符合胃癌组织学特征。结论成功建立了简便、安全、高效的大规模胃癌原位模型,该方法便于普及,可为胃癌研究提供宝贵的研究平台和实验工具。
- 胡皓胡皓王敏
- 关键词：慢病毒裸鼠
- 以胶原水凝胶为支架构建肝细胞三维培养系统被引量：10
- 2013年
- 背景:肝细胞体外培养时快速失去功能限制了肝细胞疗法的发展。目的:以胶原水凝胶为支架建立能够长时间有效维持肝细胞功能的肝细胞三维培养系统。方法:将SD大鼠肝细胞与预混肝细胞生长因子及DMEM的液态Ⅰ型胶原混合,形成肝细胞/胶原凝胶复合物,将该复合物接种至培养板,待形成胶冻状凝胶后再加培养液进行培养。通过光学显微镜、苏木精-伊红染色及透射电子显微镜对肝细胞的形态学特征及超微结构进行观察;并通过糖原染色、免疫荧光染色、实时定量PCR进一步对肝细胞特异表型及功能进行检测。收集培养上清,检测细胞白蛋白及尿素合成能力。结果与结论:①肝细胞/胶原水凝胶复合物形成后,可见肝细胞呈圆形分布于水凝胶中,培养14d后仍保持肝细胞形态并呈类似肝脏结构的肝索样聚集排列,超微结构观察显示肝细胞之间形成紧密连接。②培养14d后,糖原染色、白蛋白及肝细胞核因子4α免疫荧光染色呈阳性,证实肝细胞具有糖原及白蛋白合成能力并仍具有分化潜能。③三维培养中,肝细胞的白蛋白及尿素合成能力及分泌水平明显高于二维培养,且至少能够在较高水平维持15d。④培养7d后,Albumin、HNF-4α、Claudin-3、CYP1A1、CYP3A1以及G6P等肝细胞特异性基因的表达水平明显高于二维培养。以上结果证实,以胶原水凝胶为支架构建的三维培养系统使肝细胞在结构上更类似肝脏组织,并能在更长时间内有效的维持肝细胞合成代谢等各方面功能。
- 王敏兰亚胡皓时永全韩英周新民
- 关键词：细胞外基质材料肝细胞水凝胶合成代谢
