翟荣林
- 作品数：21 被引量：115H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雌激素受体β过表达对大肠癌细胞增殖凋亡的影响被引量：6
- 2009年
- 目的观察雌激素受体β(ERβ)过表达对大肠癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其机制。方法以脂质体介导的ERβ基因转染SW 480细胞,G418筛选阳性克隆(SW 480-C1-ERβ)。RT-PCR及W estern B lot鉴定ERβ的过表达。以正常SW 480细胞和转染了空质粒的SW 480细胞(SW 480-pEGFP-C1)作为对照,在无雌激素或有雌激素作用的条件下,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量RT-PCR方法检测凋亡相关基因survivin和Bax表达。结果SW 480和SW 480-pEGFP-C1细胞中ERβmRNA和蛋白表达较低,而稳定转染的SW 480-C1-ERβ细胞中ERβmRNA和蛋白表达明显增加。在有或无雌激素作用的条件下均可发现,与SW 480细胞或SW 480-pEGFP-C1细胞比较,SW 480-C1-ERβ细胞增殖速度减慢,凋亡率明显增高,survivin表达减低,Bax表达增高;在SW 480-C1-ERβ细胞中,有雌激素作用者较无雌激素作用者以上变化更明显。结论ERβ过表达可以同时以配体非依赖性和配体依赖性的方式抑制细胞增殖和增加细胞凋亡,可能与调控凋亡相关基因survivin和Bax表达有关。
- 许飞王国斌蔡开琳翟荣林
- 关键词：雌激素受体Β结肠肿瘤凋亡SURVIVINBAX
- 结肠癌雌激素受体通路靶基因甲基化模式的研究被引量：3
- 2008年
- 目的探讨雌激素受体β（ERβ）通路下游靶基因启动子异常甲基化模式在结肠癌发生机制中的可能作用。方法甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测结肠癌细胞株HT-29、Lovo和Caco-2中ERβ、含雌激素反应元件（ERE，经典的ER结合位点）的孕激素受体基因（PR），以及含AP-1位点（非经典的ER结合位点）的c-fos基因启动子CpG岛甲基化模式。结果ERβ、PR基因启动子在HT-29、Lovo和Caco-2中均显示为典型的异常高甲基化致失活表型（P〈0．01）；原癌基因c-fos启动子在此3株细胞中则都显示为不完全性的部分甲基化（P〈0．05）。结论雌激素受体通路基因可能因异常高甲基化致失活模式参与结肠癌发病机制；对该通路关键基因甲基化模式的分析有助于结肠癌预防与预后判断。
- 王国斌翟荣林蔡开琳田元张景辉
- 关键词：雌激素受体甲基化结肠癌
- Dnmt1，Dnmt3a，Dnmt3b和HMT在不同结肠癌细胞系的表达及意义被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨不同结肠癌细胞系中表观遗传学酶谱的表达水平.方法:RT-PCR分别检测结肠癌细胞系HT-29、Lovo和Caco-2中Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b和HMT mRNA表达水平.结果:Dnmt3b mRNA在结肠癌细胞系HT-29、Lovo中高度表达,Dnmt1与HMT次之,Dnmt3a表达水平最低;Dnmt3b、Dnmt3a在不同结肠癌细胞系之间的表达水平存在显著的差异.结论:不同分化程度的结肠癌细胞系可能存在不同的表观遗传学发生机制;Dnmt3b在建立和维持结肠癌细胞系DNA甲基化模式中可能起更为重要的角色.
- 翟荣林蔡开琳王国斌许飞田元张景辉
- 关键词：DNA甲基化酶甲基化表观遗传学结肠癌逆转录聚合酶链式反应
- 短发卡样RNA抑制c-myc癌基因在乳腺癌细胞中的过度表达
- 2005年
- 目的构建人cmyc癌基因特异性短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,抑制靶基因cmyc在乳腺癌细胞中的过度表达。方法设计有小发夹结构的三条寡核苷酸序列,克隆至空载体pEGFPC1/U6中构建重组体并体外转染乳腺癌细胞株MCF7,48h后分别用RTPCR和Westernblot方法检测胞内cmyc癌基因mRNA水平和蛋白水平。结果①成功构建shRNA真核表达载体;②shRNA表达载体转染MCF7细胞48h后,pEGFPC1/U62能明显下调胞内cmycmRNA水平和蛋白水平(P<0.01)。结论构建的shRNA真核表达载体能显著抑制cmyc癌基因在MCF7细胞中的过表达。
- 翟荣林王国斌
- 关键词：C-MYC癌基因乳腺癌细胞株MCF-7PEGFP-C1基因特异性体外转染重组体
- 结直肠癌相关基因甲基化研究现状和进展被引量：6
- 2008年
- 目的：回顾和总结国内外对结直肠癌相关基因甲基化异常改变的研究及其进展。方法：应用Medline及CNKI期刊全文数据库检索系统，以“结直肠癌、甲基化以及结直肠癌相关基因（如K-ras、p53、c-myc、APC、p16、RASSF1A、hMLH1和ERβ）”等为关键词，检索197901～2008—01结直肠癌相关基因甲基化研究的相关文献。纳入标准：1）结直肠癌与甲基化异常改变；2）结直肠癌相关基因。最后纳入35篇文献。结果：在结直肠癌组织中，K-ras和p53基因的异常改变以点突变为主；c-myc基因局部低甲基化是结直肠癌发生中的早期事件，与细胞增殖密切；APC基因除了杂合性丢失（LOH）致失活外，启动子异常高甲基化致失活也很常见；结直肠癌组织呈现一个不定的甲基化分布密度（所有CpG岛中甲基化CV-G占的比例）则可能是p16基因启动子甲基化模式在体内的特征；RASSF1A基因主要因启动子甲基化而失活；hMLH1失活引起MSI（＋）表型可能与右侧散发性结肠癌的分期有密切的关系；ERβ甲基化模式的分析对判断肿瘤预后有价值。结论：因不同基因而异，除了DNA点突变、缺失、插入和重排等遗传学改变外，甲基化等表观遗传学改变在结直肠癌发生中也占重要地位；甲基化研究对结直肠癌的防治将起到积极的探索意义。
- 翟荣林王国斌蔡开琳
- 关键词：甲基化基因结直肠肿瘤
- ERβ重组质粒的构建及其在结肠癌细胞株Caco-2中的表达
- 2008年
- 目的:基因重组技术构建重组质粒pEGFP-C1-ERβ并检测其在结肠癌细胞株Caco-2中的表达.方法:应用RT-PCR从人结肠癌手术患者正常切缘组织中分离、扩增目的基因片段,将所得cDNA定向克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,采用双酶切和测序分析鉴定插入基因的序列;脂质体介导重组质粒pEGFP-C1-ERβ瞬时转染Caco-2并上流式细胞仪分选,获得比较单一的转染细胞;分别采用RT-PCR、Western blot检测转染前后ERβ基因不同分子水平表达.结果:酶切鉴定和测序分析表明重组表达质粒pEGFP-C1-ERβ构建无误;RT-PCR和Western blot分析均表明,与转染空质粒pEGFP-C1组和空白对照组细胞相比,转染重组表达质粒pEGFP-C1-ERβ组细胞ERβ基因表达水平明显提高.结论:成功构建重组质粒pEGFP-C1-ERβ并在Caco-2细胞株中表达,为进一步研究ERβ如何通过雌激素受体通路调控下游靶基因表达和参与结肠癌表遗传学发生机制奠定了基础。
- 翟荣林王国斌蔡开琳许飞田元
- 关键词：雌激素受体Β基因重组真核表达载体结肠癌
- ERβ基因衰老性甲基化对结肠癌细胞雌激素信号传导通路的表观遗传学调控的研究
- 研究目的:
了解结肠癌细胞中雌激素信号传导通路/(Estrogen Signaling/)的异常甲基化模式以及其与转录失活的因果关系,探讨雌激素受体β亚型基因/(ERβ/)对雌激素信号传导通路的表观遗传学调控方...
- 翟荣林
- 关键词：雌激素雌激素受体Β表观遗传学CACO-2DNA甲基转移酶组蛋白甲基转移酶
- 文献传递
- XELOX方案治疗晚期胃癌疗效及安全性观察被引量：10
- 2014年
- 目的:研究奥沙利铂联合卡培他滨(XELOX方案)治疗晚期胃癌的疗效及安全性。方法:对无法行手术治疗的45例晚期胃癌行XELOX方案化疗,观察化疗疗效及不良反应,对比化疗前后生存质量改变。结果:XELOX方案治疗晚期胃癌有效率为55.6%,相关不良反应为胃肠道反应(71.1%)、骨髓抑制(44.4%)、肝肾功能损害(31.1%)和神经毒性(22.2%)。本组晚期胃癌患者化疗后生理状况和情感状况评分均显著低于化疗前(均P<0.05),社会/家庭状况和功能状况评分均显著高于化疗前(均P<0.05)。结论:XELOX方案治疗晚期胃癌有效率高,不良反应可耐受,可显著改善生存质量。
- 李信华牛彦锋杜寒松翟荣林金鑫詹苏东张万里
- 关键词：胃癌XELOX方案疗效
- 胃镜活检组织RASSF1基因启动子甲基化检测及其临床意义分析
- 2014年
- 目的探讨胃镜活检组织RAS相关结构域蛋白1(RASSF1)基因启动子甲基化水平及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测胃癌患者胃镜活检癌组织、癌旁组织及健康者正常胃组织RASSF1基因启动子甲基化状态,并比较其差异;分析胃癌患者RASSF1基因启动子甲基化与不同临床病理因素的关系。结果胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率为62.7%,癌旁组织甲基化率为4.0%,健康者正常胃组织甲基化率为2.7%,癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织(P<0.05)。胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率在不同性别、年龄、病变部位及幽门螺杆菌感染患者间比较差异无统计学意义(P>0.05),在不同分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期患者间,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者胃镜活检癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织,且甲基化率与癌组织分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关,可反映胃癌患者的病情及预后。
- 杨军关秀文牛彦锋杜寒松翟荣林曾荣张万里
- 关键词：启动子甲基化
- c-myc靶向小干扰RNA诱导乳腺癌细胞凋亡的作用被引量：25
- 2005年
- 目的构建小干扰RNA(siRNA)表达载体,体外观察其诱导乳腺癌细胞凋亡效应。方法基因克隆技术构建人cmyc癌基因特异性siRNA表达载体,体外转染MCF7,48h后检测c-myc癌基因表达状况并观察MCF7凋亡诱导效应。结果(1)成功构建siRNA表体载体:pEGFP-C1/U61、pEGFP-C1/U62和pEGFP-C1/U63;(2)siRNA表达载体转染MCF748h后,pEGFP-C1/U62组显著抑制胞内c-myc表达(80%);(3)转染24h和48h后,pEGFP-C1/U62组凋亡率分别为11.01%和21.30%,明显高于对照组(P<0.01)。结论构建的cmyc靶向siRNA表达载体能显著下调cmyc在MCF7中的过表达,诱导乳腺癌细胞株MCF7凋亡。
- 翟荣林王国斌夏泽峰
- 关键词：C-MYC小干扰RNA乳腺癌细胞凋亡
