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牛源大肠杆菌O157∶H7河南分离株的主要毒力基因分析被引量：1: 2015年; 为了解河南地区牛源大肠杆菌(E.coli)O157∶H7分离株携带毒力因子的情况,针对大肠杆菌O157∶H7的hly A、eae A、stx1和stx2毒力基因设计合成了4对特异性引物,通过PCR方法对前期分离的15株牛源E.coli O157∶H7的毒力基因进行分析。结果显示,有6株牛源E.coli O157∶H7的基因型为hly A+/eae A+/stx1-/stx2+,1株分离株的基因型为hly A+/eae A-/stx1-/stx2+,8株分离株的基因型为hly A-/eae A-/stx1-/stx2-。表明河南地区牛源E.coli O157∶H7至少有3种毒力基因型。; 魏法山曹贝贝陶健韩丽程慧芳胡慧; 关键词：毒力基因

链球菌SYBR Green I 荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 2014年; 为建立链球菌的快速定量检测方法,本研究根据链球菌延伸因子EF-Tu基因保守序列设计一对引物,以链球菌DNA为模板通过PCR扩增其197 bp的EF-Tu基因片段,并克隆至p MD18-T载体中。以纯化的重组质粒为标准品建立标准曲线,建立了链球菌SYBR Green I荧光定量PCR检测方法。结果显示在3.98×106拷贝/m L^3.98×102拷贝/μL范围内具有较好的线性关系,相关系数为R2=0.995,最低检出量为39.8拷贝/μL。此外,该方法具有良好的特异性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等其他细菌的检测结果均为阴性。重复性试验表明,该方法的组内和组间变异系数均低于1.0%。利用该方法对34份疑似链球菌感染病料进行检测,结果显示本研究所建立的方法对链球菌的检出率比常规PCR高14.7%,比细菌分离鉴定方法高29.4%。表明该方法可以用于对链球菌感染的定量研究和流行病学调查。; 徐卫松刘中原程慧芳王亚宾付彤魏战勇; 关键词：链球菌 SYBR

牛源大肠杆菌O157∶H7的分离鉴定及其生物学特性研究被引量：5: 2014年; 目的为了解郑州地区牛携带大肠杆菌O157∶H7的情况。方法应用本实验室已建立的大肠杆菌O157∶H7多重PCR方法对其进行了检测,并对临床分离的动物源大肠杆菌O157∶H7的生物学特性及携带的毒力基因情况进行了分析。结果所采集的样品中共分离鉴定出2株大肠杆菌O157∶H7,分别命名为L1和L2,其检出率为1.4%;临床分离菌株的生化试验结果均符合大肠杆菌的常规生化特性;L1和L2菌株的生长曲线一致,均比标准株的迟缓期短,较早进入对数生长期;L1菌株在48h可形成成熟完整的生物被膜,L2菌株在36h形成成熟完整的生物被膜;L1和L2菌株均携带有hlyA和eaeA毒力基因,同时L1还携带Stx2毒力基因。结论该结果为大肠杆菌O157∶H7流行病学调查提供了相关数据,对郑州地区大肠杆菌O157∶H7有效的监测奠定了基础。; 程慧芳寇亚楠陈雅君刘中原张龙现王亚宾陈丽颖胡慧; 关键词：大肠杆菌O157 H7 多重PCR 生物被膜

致病性大肠杆菌O157:H7生物被膜形成的影响因素研究被引量：4: 2015年; 为了解不同因素对大肠杆菌(E.coli)O157∶H7生物被膜形成的影响,本研究采用生物被膜体外定量粘附性检测方法对E.coli O157∶H7在不同环境(培养时间,培养基类型,营养条件)下产生生物被膜的差异进行研究。实验结果显示,在载体为96孔聚乙烯微孔板中,E.coli O157∶H7体外生物被膜的形成最适的形成时间是培养48 h,最适合的培养基为5%的TSB,而且效果显著优于LB和M63培养基。另外,在M63培养基中当葡萄糖浓度为3%时可以促进生物被膜的形成。本研究结果表明,不同培养基和不同的葡萄糖浓度均可以影响生物被膜的形成。本研究为E.coli相关菌膜疾病防治提供了实验数据。; 陶健曹贝贝魏法山周琼琼韩丽程慧芳王亚宾胡慧; 关键词：生物被膜影响因素

猪传染性胃肠炎病毒HN-2012分离株S基因遗传变异分析及其真核表达研究: 引言猪传染性胃肠炎(Transmissible gastroenteritis of swine,TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种高接触性传染病,主要引起猪呕吐、腹泻和脱水死亡,不同品种和年龄的猪只均...; 程慧芳陈雅君刘中原寇亚楠崔保安胡慧

猪流行性腹泻病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：7: 2015年; 为建立一种快捷、特异、敏感检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法,本研究根据Gen Bank中登录的PEDV ZKHFQ株的N基因序列的保守区设计一对特异性引物,经过对反应条件进行优化,建立了检测PEDV的SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法。该方法对常见的病毒均未检测到荧光信号,而仅对PEDV检测为阳性,其灵敏度为57拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于1%。利用该方法对26份疑似PEDV感染的病料样品进行检测,结果显示本研究所建立的方法对PED的检出率比常规PCR高23.07%。本实验建立的荧光定量RT-PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可以用于临床PEDV的检测。; 曹贝贝韩丽于朋飞兰培英程慧芳宋月胡慧; 关键词：猪流行性腹泻病毒 SYBR I 荧光定量RT-PCR

TGEV的感染特性及IFN-α在TGEV与宿主细胞相互作用中的免疫功能研究: 猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)是引起猪传染性胃肠炎(TGE)的主要病原。该病是一种急性、高度接触性肠道传染病,在临床上以呕吐、严重腹泻、脱水以及2周...; 程慧芳; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒树突状细胞; 文献传递

纳米铝胶佐剂猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫效果研究: 引言猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)是引起妊娠母猪繁殖障碍的主要病原体之一。近年来,PPV感染和造成的危害呈上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。而疫苗的开发是有效防范PPV的关键。本试验在研...; 寇亚楠刘中原徐卫松宋月程慧芳魏战勇; 关键词：猪细小病毒油乳剂灭活疫苗

猪白细胞介素18增强猪细小病毒灭活疫苗对BALB/c小鼠免疫效果影响的研究: 为研究猪白细胞介素18对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的增强作用.将60只20g左右的BALB/c小鼠随机分为6组,分别注射猪细小病毒自制灭活油苗、商品PPV灭活疫苗、猪白细胞介素18联合猪细小病毒自制灭活油苗、猪白细胞介素...; 程慧芳王瑞宁曹贝贝魏战勇胡慧; 关键词：猪细小病毒灭活疫苗免疫增强剂 BALB/C小鼠

猪白细胞介素18增强猪细小病毒灭活疫苗对BALB/c小鼠免疫效果影响的研究: 为研究猪白细胞介素18对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的增强作用。将60只20g左右的BALB/c小鼠随机分为6组,分别注射猪细小病毒自制灭活油苗、商品PPV灭活疫苗、猪白细胞介素18联合猪细小病毒自制灭活油苗、猪白细胞介素...; 程慧芳王瑞宁曹贝贝魏战勇胡慧; 关键词：猪细小病毒灭活疫苗免疫增强剂 BALB/C小鼠; 文献传递

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程慧芳