王雅文 作品数:6 被引量:32 H指数:3 供职机构: 国家食品药品监督管理总局 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 国家自然科学基金 军队“十一五”科技攻关课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
1例小肠移植术后抗体介导的血管性排斥反应诊断与治疗 被引量:3 2012年 目的报道1例临床资料,结合文献回顾对小肠移植术后急性血管性排斥反应(AVR)诊断和治疗进行总结。方法小肠移植术前进行组织交叉配型、群体反应抗体(PRA)检测。免疫抑制方案采用阿来佐单体诱导,术后单用他克莫司维持方案。移植肠末端腹壁造口黏膜色泽暗紫是AVR典型表现,但需排除外科技术并发症。AVR病理诊断为小血管内炎症细胞边集、血管内纤维素和血小板样沉积,管腔内有不同程度血栓形成,动脉壁纤维蛋白样坏死,C4d染色阳性。根据血管损伤严重程度,小肠移植AVR可分为0级和1-3级。结果淋巴细胞毒试验及PRA均阴性,术后40h发现移植造口发暗,B超显示移植肠血管通畅,术后44h造口液转为血性,行剖腹探查术发现移植肠已失去生机,遂切除移植肠。病理诊断重度血管性排斥反应(3级),C4d染色阳性。结论黏膜色泽暗紫是AVR典型临床表现,但需排除外科技术并发症。对于轻度的AVR,早期、及时的诊断和积极治疗可挽救移植肠,但重度AVR移植肠的切除率非常高。 李元新 石炳毅 刘磊 王雅文 陈莉萍 梁玉梅 曹兵生关键词:小肠移植 急性血管性排斥反应 5-羟色胺受体2A在大鼠肝移植术后胆管纤维化中的作用 被引量:1 2014年 目的探讨5-羟色胺受体2A亚型(5-HT2A)在大鼠肝移植术后胆管纤维化中的作用及意义。方法建立再动脉化大鼠原位肝移植模型,分以下4组。对照Ⅰ组和对照Ⅱ组,供肝分别冷保存1和12h后行原位肝移植术;实验组:在对照Ⅱ组基础上,于术后24h起腹腔注射选择性5-HT2A拮抗剂Ketanserin 5 mg·kg^-1·d^-1,直至术后4周观察期结束;假手术组(大鼠仅行开腹和关腹操作,不行肝移植)。术后1d、3d、1周、2周和4周,检测胆道酶系血清碱性磷酸酶、谷氨酰转肽酶、胆红素总量含量以评价胆道功能,采用酶联免疫吸附试验检测肝组织5-HT的含量,以增殖细胞核抗原免疫组织化学染色评价胆管上皮细胞(BEC)的增殖情况。术后4周采用Masson三色染色法观察胆管周围胶原纤维的分布;以α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)作为门管区成纤维细胞(PF)转化为肌纤维母细胞(MF)的标志,进行免疫组织化学染色。术后1、2和4周,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测肝组织内基质金属蛋白酶2(MMP2)和前胶原α1 mRNA的表达。结果与假手术组相比,对照Ⅰ组仅术后1d胆道酶系及5-HT含量升高,术后3d少量BEC增殖,各时点肝组织MMP2和前胶原α1 mRNA的表达无显著增加;术后4周门管区未见或仅见少量胶原纤维及MF。与此相反,对照Ⅱ组和实验组术后1d胆道酶系显著升高,随后下降,术后2周时接近假手术组水平,但术后4周又显著升高,且对照Ⅱ组显著高于实验组,差异有统计学意义(P〈0.05);两组术后各时点5-HT的含量均显著高于对照Ⅰ组,峰值出现于术后1d,实验组含量有低于对照Ⅱ组的变化趋势,并在术后4周时差异有统计学意义(P〈0.05)。对照Ⅱ组术后3d直至观察期结束可见BEC活跃增殖;术后2周和4周肝组织MMP2和前胶原α1 mRNA的表达显著增加;术后4周门管区可见大量胶� 陈莉萍 王雅文 肖漓 樊文梅 石炳毅关键词:肝移植 5-羟色胺 内镜下注射组织粘合剂治疗胃静脉曲张出血的排胶规律研究 被引量:18 2010年 目的研究内镜下注射组织粘合剂治疗胃静脉曲张出血时组织粘合剂的用量和排胶规律,评价该治疗方法的远期疗效和安全性。方法在1年半时间内148例活动性(25例)或近期(123例)胃静脉曲张出血的患者行内镜下组织粘合剂注射治疗直到曲张静脉闭塞。根据上腹部平片、CT血管成像和电子胃镜观察排胶规律。平均随访时间为13.1个月。结果86.1%患者在1个月内排胶,在1年内可消失。内镜下组织粘合剂注射后团块形态与血管解剖结构相近,排胶时间与剂量无关系。远期生存率的决定因素是引起门脉高压的基础疾病。主要并发症是排胶出血,严重并发症是异位栓塞。结论内镜下注射组织粘合剂是治疗胃静脉曲张出血的一种安全有效的治疗方法,适合作为胃静脉曲张出血的首选治疗方法。 王艳梅 程留芳 李楠 吴凯 翟俊山 王雅文关键词:胃静脉曲张出血 组织粘合剂 门脉高压 5-羟色胺在胆管上皮细胞与门管成纤维细胞自分泌/旁分泌中的作用 被引量:1 2014年 目的探讨5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在胆管上皮细胞(biliary epithelia cells,BECs)与门管区成纤维细胞(portal fibroblasts,PFs)之间自分泌/旁分泌效应中的意义,阐述两种细胞之间的相互作用。方法体外细胞培养分为6组:1)BECs组单独培养;2)BECs+TGF-β1组,BECs单独培养,用2 ng/ml重组TGF-β1干预24 h后更换培养液;3)BECs+5-HT组,BECs单独培养,以60 ng/ml的5-HT干预48 h后更换培养液;4)PFs组单独培养;5)PFs+5-HT组,PFs单独培养,以60 ng/ml的5-HT干预48 h后更换培养液;6)BECs+PFs,共同培养。各组均在培养72 h后,以酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测培养介质内5-HT、TGF-β1含量;实时荧光定量多聚酶链反应(QRT-PCR)检测BECs内色氨酸羟化酶(TPH1、TPH2)和5-HT受体1A、1B表达;以BrdU、α-SMA分别作为BECs增殖及PFs转化为肌纤维母细胞(myofibroblasts,MFs)的标志,免疫细胞化学检测。结果单独培养的BECs表达5-HT合成限速酶TPH1、TPH2及5-HTR1A、5-HTR 1B,5-HT分泌较高而BECs增殖不明显;经TGF-β1处理或与PFs共培养后,TPH1、TPH2表达各减少80%和87%,5-HTR1A、5-HTR1B表达分别减少75%和85%,BECs增殖明显。单独培养的PFs分泌TGF-β1,部分呈α-SMA阳性的MFs;经5-HT处理或与BECs共培养后,TGF-β1表达及MFs显著增加。结论 BECs来源的5-HT以及PFs来源的TGF-β1介导BECs与PFs之间的自分泌与旁分泌效应,维持BECs增殖和PFs向MFs的转化,在胆管病发病机制中可能具有重要意义。 陈莉萍 王雅文 樊文梅 肖漓 石炳毅关键词:5-羟色胺 胆管上皮细胞 自分泌 旁分泌 抗CD25单克隆抗体对肾移植受者CD4^+CD25^(high)调节性T细胞的影响 被引量:4 2009年 目的评价抗CD25单克隆抗体对肾移植受者术后早期CD4+CD25high调节性T细胞(CD4+CD25 high Treg)的影响。方法2007年2-9月接受初次亲属活体供肾移植的受者41例,根据是否使用抗CD25单克隆抗体(商品名daclizumab)分为抗体组(21例)和对照组(20例)。其中抗体组在肾移植术前2h及术后第14天分别给予抗CD25单抗各50mg。在移植前及移植后第13、17、60天分别留取肝素抗凝外周血15ml。应用流式细胞仪测定两组受者外周血CD4+T细胞和CD4+CD25 high Treg比例的变化,半定量RT-PCR检测CD25 mRNA的表达变化。结果肾移植术后13、17、60d抗体组的CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例(20%±8%、13%±7%、24%±9%)低于对照组(45%±6%、41%±5%、40%±6%),差异有统计学意义(P<0.05)。抗体组术后第17天CD4+CD25 high Treg占CD4+T细胞的比例为4.40%±0.26%,明显低于对照组(8.56%±0.36%,P<0.01);而术后13、60d抗体组CD4+CD25 high Treg所占比例分别为7.00%±0.47%、3.75%±0.19%,与对照组(分别为8.04%±0.32%、3.66%±0.31%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。抗体组CD25 mRNA相对表达水平在给予第二次抗体前(术后第13天)为1.65±0.22,术后第17天为1.84±0.27,两者间差异无统计学意义(P>0.05)。对照组术后第17天CD25 mRNA相对表达水平为1.70±0.23,与抗体组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论两剂共100mg抗CD25单抗仅一过性地降低CD4+CD25 high Treg,不会影响其活化扩增,无损于术后早期的免疫耐受诱导及维持。 石炳毅 王振 肖漓 钱叶勇 蔡明 王雅文关键词:肾移植 免疫耐受 肾移植后诱导活化高表达CD25的CD4^+CD25^high调节性T细胞的表型特点与免疫调节功能 被引量:6 2009年 目的探讨肾移植受者活化并表达不同强度CD25的CD4细胞的表型特征和功能特点。方法依据CD25的表达水平,应用流式细胞仪将9例行初次亲属活体肾移植受者的外周血CD4+T细胞分为CD25-、CD25高表达(CD25 high)和CD25低表达(CD25 low)3群,并比较3群细胞叉头翼状螺旋转录因子(FoxP3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)表达强度。经免疫磁珠法和CD4+CD25+调节性T细胞分选试剂盒分选得到受者外周血CD4+CD25-、CD4+CD25 high T细胞,分别作为反应细胞,以Co60γ射线照射灭活的供者外周血单个核细胞(PBMC)作为刺激细胞,建立体外单向混合淋巴细胞培养系统。采用半定量RT-PCR检测系统中IL-2 mRNA的表达。结果在肾移植术后受者3群细胞中,FoxP3的表达以CD4+CD25 high细胞最高(93.7%±3.58%),其次是CD4+CD25low细胞(16.4%±6.8%),CD4+CD25-细胞最低(1.8%±1.1%),三者间差异均有统计学意义(P<0.01);CTLA-4表达以CD4+CD25 high细胞最高(80.8%±7.9%),其次是CD4+CD25 low细胞(22.9%±6.5%),CD4+CD25-细胞最低(4.1%±2.4%),三者间差异均有统计学意义(P<0.01)。在混合淋巴细胞培养中,CD4+CD25 high细胞受移植抗原刺激后不表达IL-2 mRNA;按照1∶2比例加入CD4+CD25high细胞后,CD4-细胞表达的IL-2 mRNA平均被抑制了60%。结论肾移植受者所有活化T细胞的表面均有CD25表达,高表达CD25的细胞群具有调节性T细胞的表型特点,为CD4+CD25 high调节性T细胞。 钱叶勇 石炳毅 王振 肖漓 常京元 王雅文关键词:免疫耐受