黎妮
- 作品数：9 被引量：1H指数：1
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 转基因技术在油菜育种中的应用
- 2005年
- 转基因油菜是近年来转基因研究很有成效的作物之一,而且取得了重要进展。从转基因油菜在杂种优势利用、品质改良、抗除草剂、抗病虫害等方面,综述了转基因油菜育种取得的重要进展,并对转基因油菜育种中所存在的问题提出了一些看法。
- 黎妮李栒
- 关键词：油菜转基因
- 湖南省水生蔬菜重要害虫生物学特性及成灾机制
- 黄国华王星马力黎妮朱捷刘双
- 水生蔬菜因其独特的味道、丰富的营养和保健功能，其产业发展迅速。蔬菜、食品质量安全是我国农业产业发展的新阶段，国家针对农业发展启动了“两减”重大战略。在此形势下，该项目以水生蔬菜害虫为研究对象，开展重要害虫发生规律与灾变机...
- 关键词：
- 关键词：水生蔬菜害虫治理
- 烟芽夜蛾囊泡病毒3h株3h-38基因原核表达及转录、表达时相分析被引量：1
- 2021年
- 烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)作为一种极具生防潜力的环状双链DNA昆虫病毒,自被分离后,对其基因的特性和相关蛋白功能研究从未间断。本研究通过生物信息学预测3H-38蛋白序列发现其131~150氨基酸位置有一段由胞外向胞内的跨膜区序列,N端23~121氨基酸位置有一个BRO家族结构域,和其同源蛋白的序列对比发现3H-38与烟芽夜蛾囊泡病毒3i株(Heliothis virescens ascovirus 3i,HvAV-3i)和烟芽夜蛾囊泡病毒3j株(Heliothis virescens ascovirus 3j,HvAV-3j)编码的同源蛋白3I-40和3J-43相似性高达85%以上。进一步通过RT-PCR克隆、构建pET-28a-38原核表达载体、IPTG诱导表达、Ni^(2+)-NTA亲和层析柱纯化蛋白等方法获得了His-tag融合的3H-38重组蛋白,并制备了该蛋白的兔多克隆抗体。通过检测3h-38基因在HvAV-3h感染的甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)幼虫中的转录和表达时相,本研究发现3h-38从感染后3 h开始转录,从感染后36 h开始表达,即3h-38是一个早期转录、晚期表达的基因。3h-38基因的生物学信息分析和转录表达时相检测为进一步研究该蛋白的功能和特性奠定了基础。
- 曹生凯何磊黎妮黎妮王星
- 关键词：原核表达多克隆抗体转录时相
- 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法
- 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法，是将含囊泡病毒的待测样品超声破碎，然后稀释、过滤，用其感染对数生长期细胞1h，收集细胞悬液、计算细胞数量，提取总DNA；对上述DNA进行qPCR检测，以含有该片段的pGEM‑...
- 黄国华宋晓慧李梓琦黎妮
- 烟芽夜蛾囊泡病毒3h株早期基因调节病毒复制的分子机制
- 双链DNA病毒的早期基因是指转录起始先于病毒基因组DNA复制的一类基因,通常在病毒侵染初始阶段发挥着激活病毒基因在宿主体内的级联转录功能,对病毒的复制和侵染具有重要意义。囊泡病毒是一种极具生防潜力且对非靶标生物安全的昆虫...
- 黎妮
- 关键词：早期基因病毒复制甜菜夜蛾
- 烟芽夜蛾囊泡病毒3h毒株3h-161的克隆和表达谱分析
- 2022年
- 【目的】本文旨在明确烟芽夜蛾囊泡病毒3h毒株(HvAV-3h)编码的第161号开放阅读框(3h-161)的序列特征及表达谱,为深入研究其功能奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆3h-161的CDs序列,构建原核表达载体,并制备高效的多克隆抗体;利用RT-PCR技术检测3h-161的转录情况,利用蛋白免疫印迹法检测3H-161的表达情况。【结果】3h-161编码区长516 bp,共编码172个氨基酸残基,感染甜菜夜蛾Spodopteraexigua3龄幼虫后12h开始转录、48h开始表达;3H-161在囊泡病毒属内的不同毒株(HvAV-3j、HvAV-3i、HvAV-3e、HvAV-3f和HvAV-3g)间高度保守,序列一致性为100%。【结论】本研究阐明了3h-161的序列特征、获得了3H-161的多克隆抗体,明确了其表达谱,为进一步研究该基因在HvAV-3h感染甜菜夜蛾过程中发挥的作用奠定基础。
- 陈斌徐存翊黎妮谭赟于欢黄国华
- 关键词：原核表达时相分析
- 根癌农杆菌介导兔防御素NP-1基因转化油菜体系的研究
- 油菜是我国重要的油料作物，但是由于病害的危害，其产量与品质受到严重影响。通过转基因技术将抗性基因转入油菜品种则是解决油菜抗病性的重要途径之一。兔防御素NP-1为一广谱抗菌肽，它已被成功地导入烟草、番茄、百合等植物。将兔防...
- 黎妮
- 关键词：甘蓝型油菜根癌农杆菌抗病性
- 文献传递
- 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法
- 一种快速测定囊泡病毒滴度的绝对定量PCR方法，是将含囊泡病毒的待测样品超声破碎，然后稀释、过滤，用其感染对数生长期细胞1h，收集细胞悬液、计算细胞数量，提取总DNA；对上述DNA进行qPCR检测，以含有该片段的pGEM‑...
- 黄国华宋晓慧李梓琦黎妮
- 文献传递
- 甜菜夜蛾半胱天冬酶基因的克隆及对细胞凋亡诱导剂和病原微生物感染的表达响应
- 2021年
- 【目的】本研究旨在明确甜菜夜蛾Spodoptera exigua半胱天冬酶(caspase)在细胞凋亡诱导剂诱导和病原微生物胁迫下的表达模式,为丰富鳞翅目昆虫细胞凋亡机制研究奠定基础。【方法】利用RT-PCR技术从甜菜夜蛾3龄幼虫体内扩增两个半胱天冬酶基因(SeCasp-3和SeCasp-4)编码区的全长;利用qPCR技术分别检测两个半胱天冬酶基因在细胞凋亡诱导剂过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)(100μmol/L)、放线菌素D(actinomycin D,ActD)(10μg/mL)和地塞米松(dexamethasone,DEX)(50μg/mL)诱导后甜菜夜蛾脂肪体细胞中及病原菌苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis kurstaki(Btk)(108个细菌/mL)、大肠杆菌TG1菌株Escherichia coli TG1(E.coli TG1)(108个细菌/mL)、烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(Heliothis virescens ascovirus 3h,HvAV-3h)(1.16×1011个基因组拷贝/mL)和苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV)(5000 OBs/μL)感染后甜菜夜蛾3龄幼虫体内的表达模式。【结果】SeCasp-3(GenBank登录号:MW183334)的编码区长942 bp,共编码313个氨基酸;SeCasp-4(GenBank登录号:MW183335)的编码区长843 bp,共编码280个氨基酸。SeCasp-3和SeCasp-4的假定蛋白序列与家蚕Bombyx mori Dronc的氨基酸序列一致性分别为45.54%和58.46%,且SeCasp-3和SeCasp-4之间具有较高的同源性。SeCasp-3和SeCasp-4在不同化学物质诱导下的甜菜夜蛾脂肪体细胞中的表达模式存在明显差异,在100μmol/L H2O2和10μg/mL ActD处理后24和48 h,脂肪体细胞中SeCasp-3和SeCasp-4的相对表达量均显著升高;50μg/mL DEX处理后24和48 h,SeCasp-3的相对表达量未见显著变化,但SeCasp-4的相对表达量升高了数千倍。在不同病原微生物感染后的甜菜夜蛾3龄幼虫体内,SeCasp-3和SeCasp-4的表达模式基本相同。一般线性模型的分析结果表明,Btk和E.coli TG1的感染不造成SeCasp-3和SeCasp-4相对表达量的显著变化,而HvAV-3h和AcMNPV的感染则显著抑制
- 宋晓慧杨长锦黎妮黄国华黄国华
- 关键词：甜菜夜蛾细胞凋亡病原菌半胱天冬酶DRONC
