高金宁
- 作品数:9 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国海洋大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技基础条件平台建设计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段及其应用
- 本发明涉及一种半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段及其应用。半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段,其特征在于所述的DNA片段为:(a)、具有序列为SEQ?ID?NO:1或SEQ?ID?NO:2的DNA片段;(b)、分别与(a...
- 王旭波张全启高金宁翟腾齐洁王志刚于海洋
- 文献传递
- 半滑舌鳎雌性特异fosmid克隆的筛选及FISH定位被引量:1
- 2011年
- 通过对半滑舌鳎雌鱼fosmid文库进行有序混合,成功构建了两步-三维PCR筛选体系,为后续的基因筛选奠定了基础。通过对半滑舌鳎W染色体文库序列进行引物设计,并分别在雌、雄鱼基因组DNA中筛选,获得1对雌鱼特异性引物。使用该引物对fosmid文库进行筛选,得到1个雌鱼特异性克隆,并通过荧光原位杂交技术将克隆定位到了W性染色体上,证实了使用该体系进行文库筛选的有效性以及雌鱼引物的特异性,建立了半滑舌鳎遗传性别的分子及细胞遗传学鉴定方法,为后续半滑舌鳎基因组及性染色体的研究奠定了基础。
- 翟腾王旭波王晶高金宁翟介明张全启
- 关键词:半滑舌鳎FOSMID文库荧光原位杂交
- 牙鲆(Paralichthys olivaceus)Activin基因两种β亚基的启动子克隆及生物信息学分析
- 2015年
- 以牙鲆为研究对象,利用染色体步移(Genome walking)获得了Activin两个β亚基基因的上游部分启动子序列,并对其进行了转录调控元件的生物信息学预测分析。获得了ActivinβA和βB两个亚基的启动子部分序列,长度分别约为2.7 kb和2.4 kb;在预测的ActivinβB转录起始位点(+1位)的上游31 bp处有1个典型的TATA box,而在ActivinβA中未发现TATA box的存在。两个基因的启动子上发现了多个转录因子Sp1、Oct-1、C/EBP、CREB、GATA-1、HNF-3、HNF-1、USF等结合位点,还发现了与内分泌相关的Pit-1、ER、PR、GR、RAR、RXR等结合位点,但肌性转录因子Myo D、myogenin和雄性的性别决定基因SRY结合位点仅在ActivinβA启动子中发现。生物信息学分析显示,牙鲆ActivinβA和βB表达受到多种潜在因子的调控,二者在调控上有所差异。
- 刘蒙蒙王晶高金宁马丽曼张全启
- 关键词:牙鲆激活素启动子生物信息学分析
- 半滑舌鳎(Cynoglossus Semilaevis)EB1基因的克隆、表达及其对细胞迁移能力的相关性分析被引量:1
- 2013年
- EB1作为一种微管末端结合蛋白,在微管聚合和微管正端蛋白复合体的装配中起着关键的作用。以半滑舌鳎cDNA文库为基础,克隆EB1基因。该基因包含777bp的开放读码框,编码推测的氨基酸258个,分子量为29.497kDa。与其他物种EB1序列同源比对发现,该蛋白包括EB1和CH 2个保守的结构域,以及FYF和EEF/Y 2个保守的三联氨基酸位点。同源聚类分析结果显示,EB1蛋白的系统进化较好地反映物种从低等到高等的进化进程。实时荧光定量PCR结果表明,该基因在脑、鳃、心脏、肠、头肾、肝脏、肌肉、卵巢、脾脏和精巢组织中都有表达,其中,卵巢的表达量最高,比表达量最低的肝组织高14.6倍。对细胞迁移能力的研究中发现,细胞迁出能力显示出与荧光定量PCR中选取的组织中EB1的表达量相符的规律,EB1基因表达量越高的组织细胞迁出的能力越强。
- 刘聪辉高金宁辛念马丽曼侯熠齐洁
- 关键词:半滑舌鳎细胞迁移
- 荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法
- 本发明涉及一种荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法。其特征在于,用于原位杂交的探针为含有半滑舌鳎雌性特异DNA片段的fosmid或BAC克隆,在雌性半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有一个荧光信号,而在超...
- 王旭波张全启高金宁姜佳君齐洁王志刚于海洋
- 牙鲆(Paralichthys olivaceus)干细胞多能性相关转录因子Oct4、Nanog和Sox2的克隆与分析
- 我国是水产养殖大国,近年来随育种技术的发展已培育出大量水产优良品种。而建立水产生物完整遗传信息长期稳定的保存方法,对于有利地保护濒危生物资源,实现优良品种和品系优质遗传资源的稳定保存和利用具有十分重要的意义。干细胞具有无...
- 高金宁
- 关键词:牙鲆干细胞
- 文献传递
- 荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法
- 本发明涉及一种荧光原位杂交技术检测半滑舌鳎的性染色体组成的方法。其特征在于,用于原位杂交的探针为含有半滑舌鳎雌性特异DNA片段的fosmid或BAC克隆,在雌性半滑舌鳎的一个细胞或一个染色体分裂相中有一个荧光信号,而在超...
- 王旭波张全启高金宁姜佳君齐洁王志刚于海洋
- 文献传递
- 静水压法人工诱导牙鲆(♀)×圆斑星鲽(♂)杂交三倍体的探索被引量:3
- 2014年
- 开展了牙鲆(Paralichthys olivaceus)(♀)和圆斑星鲽(Verasper variegatus)(♂)杂交,通过静水压抑制受精卵第二极体的释放来诱导杂交三倍体,设计单因素分析实验,筛选出当前试验条件下的最佳诱导条件。结果表明:静水压法可成功诱导出杂交三倍体,诱导率主要受到受精后处理起始时刻、处理压强和压强处理时间3个因素的影响。静水压法的最佳诱导条件为:海水温度(15.0±0.2)℃,受精后3 min起,以70 MPa压力处理6 min。此时相对孵化率为(24.06±1.10)%,利用倍性分析仪对其进行倍性鉴定,三倍体率为(26.67±6.67)%。染色体分析表明,三倍体胚胎的染色体数目为71条,对照组二倍体胚胎的染色体数目为47条。还发现有少量染色体数目为24条的单倍体胚胎。研究结果为鲆鲽鱼类异源多倍体的培育提供了参考。
- 刘金相王旭波刘聪辉高金宁王忠凯王文基王志刚于海洋齐洁张全启
- 关键词:杂交三倍体牙鲆圆斑星鲽
- 半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段及其应用
- 本发明涉及一种半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段及其应用。半滑舌鳎雌性特异的基因组DNA片段,其特征在于所述的DNA片段为:(a)具有序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的DNA片段;(b)分别与(a)中...
- 王旭波张全启高金宁翟腾齐洁王志刚于海洋
- 文献传递