王旭波
- 作品数：53 被引量：74H指数：5
- 供职机构：中国海洋大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程经济管理更多>>
- Kisspeptin在三种养殖鱼类中的生物学功能初步分析
- Kisspeptin是一种神经内分泌多肽,它在动物青春期的启动、内分泌激素的合成与分泌过程等方面都发挥了重要功能,近年来受到广泛关注。哺乳类和两栖类中仅有一种kisspeptin基因kiss1,而在鱼类中kisspept...
- 宋华玉贺艳王志刚于海洋王旭波齐洁张全启
- 一种建立稳定转基因的牙鲆胚胎细胞株方法
- 本发明提供一种建立稳定转基因的牙鲆胚胎细胞株方法，是把牙鲆广泛表达的β‑actin启动子启动的增强型绿色荧光蛋白且能表达G418抗性蛋白的质粒转染牙鲆胚胎细胞。24h后,荧光显微镜下观察EGFP表达，并通过G418筛选得...
- 汪波张全启王慧贞杨帆齐洁王志刚王旭波于海洋贺艳刘金相
- 文献传递
- 半滑舌鳎抗菌肽hepcidin的重组表达及其应用
- 本发明涉及一种半滑舌鳎抗菌肽hepcidin的重组表达及其应用，所述的表达载体中插入了用于重组表达序列为SEQ ID NO：1的半滑舌鳎抗菌肽hepcidin的核苷酸片段，并在宿主菌中表达半滑舌鳎抗菌肽hepcidin的...
- 王亚楠张全启刘旭东王旭波齐洁王志刚于海洋王兴莲
- 牙鲆(Paralichthys olivaceus)CD59基因的原核表达与功能探究被引量：1
- 2017年
- 本研究分析了CD59基因在牙鲆(Paralichthys olivaceus)感染鳗弧菌(Vibrio anguillarum)前后的表达模式。结果显示,感染前,CD59基因在检测的4种免疫器官中均不表达;感染后,该基因均有不同程度的表达,其中,肾脏的表达量最高。对牙鲆CD59基因进行原核表达,构建原核表达载体pET-32a-CD59,并将其转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,使用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得约为29 kDa的重组蛋白pET-32a-CD59。该蛋白以包涵体形式存在,通过His亲和层析柱纯化和超滤管浓缩目的蛋白后,经SDS-PAGE检测得到单一条带,纯化效果较好。Western blotting分析结果显示,重组蛋白p ET-32a-CD59可以与抗His单克隆抗体发生特异性反应,说明牙鲆CD59基因在大肠杆菌系统中成功表达。对重组蛋白进行透析复性,复性结束后,蛋白无析出或絮状沉淀,初步表明复性成功。选取嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鳗弧菌、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌4种致病指示菌,测定复性重组蛋白p ET-32a-CD59的抑菌活性。研究表明,重组蛋白pET-32a-CD59对嗜水气单胞菌具有一定的抑菌活性。本研究旨在探究牙鲆免疫调节机制,并为提高牙鲆养殖效率提供一定的分子理论基础。
- 周纳宇曹丹丹王志刚张全启齐洁王旭波于海洋
- 关键词：牙鲆CD59原核表达抑菌活性
- 半滑舌鳎三倍体诱导研究被引量：4
- 2012年
- 采用冷休克抑制第二极体排出的方法诱导了半滑舌鳎三倍体,并探讨了三倍体诱导的最佳条件。通过流式细胞仪倍性检测和染色体观察验证各组三倍化率。结果显示:在受精后5min开始,将受精卵放在4℃海水中进行冷休克处理,持续时间为20min,三倍体诱导率最高为35%。通过对三倍体染色体进行分析,辨认其雌雄染色体型为ZWW/ZZZ,出现频率为1∶1,没有发现ZZW型雌鱼,暗示半滑舌鳎Z染色体和W染色体之间的交叉和互换受到严重抑制。
- 刘志鹏王旭波翟介明张全启
- 关键词：半滑舌鳎三倍体冷休克
- 一种优化的牙鲆鱼β-肌动蛋白启动子
- 本发明的目的在于提供一种优化的牙鲆鱼β‑肌动蛋白启动子，本发明将在牙鲆中广泛表达的β‑肌动蛋白的启动子进行优化进而获得启动效率更强的重组启动子表达载体eGFP‑优β‑肌动蛋白。并且这一新的载体可使外源基因有效转入牙鲆不同...
- 齐洁汪波王慧贞张全启贺艳王志刚于海洋王旭波程杰
- 文献传递
- 半滑舌鳎hepcidin抗菌肽
- 本发明涉及一种半滑舌鳎hepcidin抗菌肽，该抗菌肽的序列为SEQ IDNO：3。本发明的半滑舌鳎hepcidin抗菌肽的前体肽和成熟肽均可以是通过化学合成、基因重组表达获得的产物。本发明获得的半滑舌鳎抗菌肽hepci...
- 王亚楠张全启刘旭东王旭波齐洁王志刚于海洋王兴莲
- 文献传递
- 牙鲆同质雌核发育二倍体的诱导及其早期生长研究被引量：9
- 2010年
- 人工诱导雌核发育是水产动物性别控制的重要技术手段之一,同时也是快速建立近交系或纯系、建立遗传作图群体的方法之一。采用静水压力抑制受精卵第一次卵裂的方法诱导了牙鲆同质雌核发育二倍体。不同的处理起始时刻、不同压力及压力持续的时间对受精卵的发育及染色体加倍率有较大影响。处理组受精卵发育相对缓慢,畸形率较高,正常仔鱼孵化率较低。如果处理前受精卵保持在(15.5±0.5)℃,压力处理受精卵的最佳条件是:从受精后75 min开始、用55 MPa的压力处理6 min,该条件下处理组正常仔鱼孵化率较高,为13.7%,染色体观察和最大核仁数计数结果表明,此时的二倍体诱导率也最高。染色体观察结果还显示在不同处理组中存在不同比例的非整倍体。利用获得的最佳诱导条件处理获得了数千尾雌核发育幼鱼,观察表明,雌核发二倍体鱼的生长速度明显低于普通二倍体,且个体间差异较大。该研究为进一步开展牙鲆全雌育种和连锁图谱的构建提供技术支撑。
- 庄岩蓝勋王志刚齐洁王旭波张全启
- 关键词：牙鲆静水压力
- 半滑舌鳎雌性特异fosmid克隆的筛选及FISH定位被引量：1
- 2011年
- 通过对半滑舌鳎雌鱼fosmid文库进行有序混合,成功构建了两步-三维PCR筛选体系,为后续的基因筛选奠定了基础。通过对半滑舌鳎W染色体文库序列进行引物设计,并分别在雌、雄鱼基因组DNA中筛选,获得1对雌鱼特异性引物。使用该引物对fosmid文库进行筛选,得到1个雌鱼特异性克隆,并通过荧光原位杂交技术将克隆定位到了W性染色体上,证实了使用该体系进行文库筛选的有效性以及雌鱼引物的特异性,建立了半滑舌鳎遗传性别的分子及细胞遗传学鉴定方法,为后续半滑舌鳎基因组及性染色体的研究奠定了基础。
- 翟腾王旭波王晶高金宁翟介明张全启
- 关键词：半滑舌鳎FOSMID文库荧光原位杂交
- 一种在鱼类生殖系细胞中特异性表达基因的3’UTR区序列及其应用
- 本发明提供一种在牙鲆原始生殖细胞中调节基因表达的3′UTR区序列，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1；该3′UTR区序列用于调控基因在牙鲆原始生殖细胞中进行表达。本发明的3′UTR区序列为牙鲆鱼特有的序列，可以用于鲆鲽...
- 张全启汪波王慧贞齐洁王旭波于海洋贺艳刘金相王志刚
- 文献传递
