高志刚
- 作品数：10 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军白求恩国际和平医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点科技攻关计划项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位W/O/W型复乳剂的研制被引量：2
- 2003年
- 目的 制备重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(rUreB)复乳剂,研究其物理性质及免疫效率。方法 设计处方采用二步法制备复乳,显微镜观察乳滴结构及粒径分布,以电导法测定包封率,以经典法、离心法及电导法观察复乳的稳定性,免疫印迹观察抗原制备成复乳剂后免疫反应性的变化,以动物实验观察rUreB复乳的免疫效率。结果 制备的rUreB复乳性质稳定、包封率98.3％、粒径大小主要在2～10μm,免疫印迹及小鼠口服免疫后特异性抗体测定结果表明,该复乳具有良好的免疫原性,剂量小、免疫效率高。结论 将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位制备成复乳剂可得到高效、廉价、使用方便的疫苗,复乳是一个很有潜力的黏膜疫苗传送系统。
- 高志刚邹全明郭刚郭桐生曾韦锟
- 关键词：幽门螺杆菌尿素酶B亚单位复乳
- 重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的表达、纯化及黏膜佐剂活性研究被引量：6
- 2005年
- 目的 对大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)进行基因克隆、重组表达、蛋白纯化和黏膜佐剂活性分析。方法 应用PCR技术从产肠毒素大肠杆菌基因组中扩增出不耐热肠毒素B基因,将此构建于原核表达载体pET 11C,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,然后采用D(+) immobilizedgalactose亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。以纯化后重组LTB为佐剂,与幽门螺杆菌重组尿素酶B亚单位蛋白(rUreB)共同口服和滴鼻免疫BALB c小鼠,分析重组LTB的黏膜佐剂活性。结果 PCR扩增出390 bp LTB基因,与GenBank公布的核苷酸序列的相似性为99.5%。重组LTB蛋白的表达率为6%,以胞周质分泌形式表达,经亲和层析后蛋白纯度大于95%。该重组蛋白保持了与神经节苷脂GM1结合的生物学活性和良好的免疫原性及免疫反应性。动物试验表明,重组LTB与rUreB抗原共同口服和滴鼻免疫小鼠后的特异性血清IgG及鼻腔、气管、胃黏膜和小肠黏膜sIgA水平显著高于单独rUreB抗原免疫组(P<0.05)。结论 所获得的重组LTB具有较好的黏膜佐剂活性,为其在黏膜疫苗中的应用奠定基础。
- 吴超冯强曾韦锟郭桐生高志刚邹全明
- 关键词：黏膜佐剂活性研究BL21(DE3)产肠毒素大肠杆菌神经节苷脂GM1LTB基因
- 鼻粘膜免疫的研究进展被引量：5
- 2003年
- 高志刚邹全明
- 关键词：免疫机理疫苗研究
- 胃佛丹治疗胃溃疡疗效观察
- 2010年
- 目的评价胃佛丹治疗胃溃疡的临床疗效。方法将胃溃疡患者随机分为2组:治疗组给予胃佛丹1丸,每日3次饭前服,4周为1个疗程。对照组给予雷尼替丁胶囊0.15 g,每日2次饭后服,4周为1个疗程。2组在服药期间均禁止服用其他治疗胃病的药物及影响疗效观察的药物。结果治疗组溃疡愈合率为77%,总有效率为97%;对照组溃疡愈合率为50%,总有效率为87%。2组愈合率相比有显著性差异。结论胃佛丹治疗胃溃疡疗效较好,且无不良反应,是一种安全有效的药物。
- 李然皇晓坤高志刚
- 关键词：胃溃疡雷尼替丁
- ^(125)Ⅰ标记rLTB-UreB及口服BALB/c小鼠示踪实验研究
- 2003年
- 目的 观察^(125)Ⅰ标记基因重组融合蛋白LTB-UreB灌喂BALB/c小鼠后的体内分布。方法 采用氯胺T氧化法标记rLTB-UreB,Sephadex-G25凝胶过滤纯化,纸层析鉴定放射化学纯度及比活度。将BALB/c小鼠随机分为PBS口服空白对照组、Na^(125) Ⅰ口服对照组和^(125)Ⅰ-rLTB-UreB实验组,于不同时间采集标本,γ放射计数器检测CPM(每分钟计数值),SPSS分析结果。结果 纯化后的标记蛋白纯度>90％。实验组PP结和肠系膜淋巴结CPM升高,与对照组比较差异有非常显著意义。结论 ^(125)Ⅰ标记融合蛋白口服后可在肠道粘膜下淋巴组织沉积,为融合蛋白作为幽门螺杆菌口服疫苗候选抗原提供重要实验依据。
- 郭桐生邹全明曾韦锟郭刚高志刚
- 关键词：重组融合蛋白幽门螺杆菌
- 重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位疫苗鼻腔免疫的实验研究被引量：12
- 2003年
- 目的:探讨基因工程疫苗Hp重组尿素酶B亚单位(rUreB)鼻腔接种的免疫效果。方法:以rUreB不同剂量或加不同佐剂滴鼻免疫BALB/c小鼠。末次免疫7 d后,收集血清及胃黏膜、小肠黏膜、鼻黏膜及气管黏膜冲洗液,用ELISA法检测抗rUreB特异性抗体。结果:rUreB鼻腔免疫后各实验组血清特异性IgG及各黏膜冲洗液中特异性IgA的水平均明显增高,与对照组相比较差异显著(P<0.01)。20μg剂量组与10μg剂量组相比较,仅血清特异性IgG水平增高,其它黏膜特异性IgA的水平未见增高。大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的佐剂效果较霍乱毒素B亚单位(CTB)强,卡泊波可增强鼻腔接种疫苗在胃黏膜洗液中的抗体应答水平。结论:CTB、LTB、卡泊波均可作为rUreB鼻腔黏膜接种的佐剂。HprUreB鼻黏膜接种,不仅可诱导血清特异性抗体反应,而且能引起多个黏膜部位的免疫应答,是一种方便、有效、廉价的免疫途径。
- 高志刚邹全明郭刚郭桐生曾韦锟解庆华
- 关键词：疫苗鼻腔免疫
- 重组幽门螺杆菌疫苗口服免疫BALB/c小鼠的研究被引量：3
- 2005年
- 目的 研究重组幽门螺杆菌疫苗口服免疫BALB/c小鼠后免疫保护效果和维持时间 ,并初步探讨其免疫机制。方法 ELISA检测特异性抗体水平 ;同时ELISPOT检测派伊尔结特异性抗体分泌细胞 ;RT PCR显示T淋巴细胞IFN γ、IL 4mRNA表达差异 ;以培养、组织切片、尿素酶试验结果判断攻毒保护率。结果 ( 1 )疫苗组在胃、肠、气管冲洗液和血清产生高水平抗体 ;( 2 )疫苗组小鼠派伊尔结特异性抗体分泌细胞显著升高 (P =0 ) ;( 3)抗原刺激后 ,免疫组T淋巴细胞的IFN γ、IL 4mRNA表达量升高 ;( 4 )免疫组攻毒保护率为 86 .7%～ 92 .8% ,且至少维持 30周。结论 重组幽门螺杆菌疫苗口服免疫小鼠后有良好的预防Hp感染作用 ;疫苗诱导的可能是TH1 /TH2型免疫应答。
- 郭桐生邹全明郭刚解庆华刘开云曾韦锟高志刚
- 关键词：BALB/C小鼠口服免疫BALB/C小鼠特异性抗体水平ELISPOTMRNA表达量尿素酶试验
- 重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位鼻腔免疫凝胶剂的研制被引量：2
- 2007年
- 目的研制重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位疫苗凝胶剂,考察其特性及免疫效果。方法以卡泊波为基质,脱氧胆酸钠为黏膜吸收促进剂,制备凝胶剂,以落球法测定凝胶的黏度,SDS-PAGE电泳分析脱氧胆酸钠对蛋白纯度的影响,以免疫印记检测疫苗蛋白的完整性,以留样观察法及离心法考察凝胶的稳定性,以含抗原凝胶剂鼻腔免疫BALB/c小鼠,并与溶液剂相比较,考察凝胶剂的免疫效果。结果制备的凝胶剂稳定性好,凝胶的黏度为8050mPa.s,脱氧胆酸钠不影响蛋白的纯度,抗原蛋白的完整性良好。小鼠鼻腔免疫凝胶剂后产生了较强的特异性血清IgG及胃肠sIgA反应,优于液体免疫。结论重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位凝胶剂性质稳定,具有生物黏附性,可提高免疫效果,是较好的鼻腔免疫剂型。
- 高志刚邹全明刘凤英曹向光
- 关键词：鼻腔免疫
- 幽门螺杆菌尿素酶B亚单位W/O/W型复乳的制备及免疫原性研究
- 本文试制了幽门螺杆菌疫苗复乳,并对复乳的物理性质、稳定性及其免疫原性进行了研究,为开发新型疫苗剂型,研制高效、廉价,使用方便的疫苗奠定了基础.
- 高志刚邹全明郭刚郭桐生曾韦琨
- 关键词：幽门螺杆菌疫苗免疫原性
- 文献传递
- 重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位疫苗（rHp）剂型及免疫途径的实验研究
- 幽门螺杆菌/(Helicobacter pylori，Hp/)是定植于人胃粘膜的重要致病菌，全球感染率高达50％以上，与慢性胃炎、胃十二指肠溃疡及胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的发生、发展密切相关，1994年世界卫生组织/(W...
- 高志刚
- 关键词：幽门螺杆菌复乳鼻腔免疫
- 文献传递
