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用含10%胎牛血清的DMEM培养肠出血性大肠杆菌O157∶H7可增强其对HeLa细胞的黏附/擦拭损伤被引量：1: 2010年; 目的:研究生长在不同培养基中的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7对宿主细胞造成的黏附/擦拭损伤是否存在差异。方法:分别用LB、DMEM、DMEM(含10%胎牛血清)、DMEM(含终浓度为25mmol/L的HEPES)等4种培养基培养O157∶H7,然后感染HeLa细胞,利用Giemsa染色观察细菌黏附差异,进行肌动蛋白荧光染色实验并观察宿主细胞肌动蛋白聚集差异。结果:在含10%胎牛血清的DMEM培养基中培养EHECO157∶H7,其黏附力增加,聚集细胞骨架肌动蛋白的能力明显增强。结论:为进一步研究EHECO157∶H7的致病性,探索O157∶H7新的致病因子奠定了基础。; 马延周围高原梁龙; 关键词：DMEM培养基胎牛血清

微生物的染色方法: 本发明公开了一种微生物的染色方法。该方法包括将待染色的微生物在色素培养基中培养对所述待染色的微生物进行活细胞染色的步骤，所述色素培养基由食用色素和用于培养所述待染色的微生物的培养基组成，所述食用色素在所述色素培养基中的浓...; 凌焱陈惠鹏曲芬李玉霞吴逊李炳娟白东梅李伟东刘刚周围李北平高原岳俊杰梁龙; 文献传递

新预测的Ⅲ型分泌系统毒力蛋白Z3672的基因克隆、表达及纯化被引量：1: 2009年; 目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌EHEC O157∶H7新预测毒力蛋白Z3672,以进一步开展其结构与功能的研究。方法:利用PCR方法从EHEC O157∶H7基因组中扩增出基因z3672,构建重组表达质粒,经测序证实后,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现诱导表达,采用质谱分析法和W estern印迹试验进行鉴定,通过洗涤包涵体纯化目的蛋白。结果:构建了pET-24 az-3672重组质粒,经酶切及测序鉴定与预期序列一致,实现了目的蛋白的融合表达,并且对蛋白条带的质谱分析证实了表达蛋白即为Z3672蛋白。纯化后目的蛋白的纯度>90%。结论:得到了新预测的毒力蛋白Z3672,为下一步研究蛋白功能,并进一步研究EHEC O157∶H7的致病机制奠定了基础。; 高原马延毛赟赟李玉霞凌焱张京生周围梁龙; 关键词：大肠杆菌O157:H7 基因表达

日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用: 本发明公开了一种日落黄色素在抗炭疽杆菌中的应用。本发明公开了日落黄色素在制备抑制炭疽杆菌生长的产品中的应用。本发明发现日落黄色素可有效抑制炭疽杆菌的生长，从而在治疗炭疽感染方面发挥巨大作用。; 凌焱陈惠鹏李玉霞吴逊白东梅张昕凌婧怡李伟东刘刚周围李北平高原岳俊杰梁龙; 文献传递

caspase重组酶原及其编码基因与应用: 本发明公开了caspase重组酶原及其编码基因与应用。所述caspase重组酶原氨基酸序列由组成具蛋白酶活性的caspase的蛋白质亚基序列及连接所述蛋白质亚基序列的连接肽序列组成；所述连接肽序列中的至少一个序列为包含3...; 凌焱陈惠鹏李玉霞李炳娟孙芳毛艳李伟东刘刚岳俊杰张景海吴逊白东梅梁龙周围李北平高原; 文献传递

幽门螺杆菌Lpp20蛋白的生物信息学分析被引量：5: 2009年; 目的:分析幽门螺杆菌Lpp20蛋白的主要化学和免疫学分子特征,为基因工程疫苗和诊断抗原的研究奠定基础。方法:根据Lpp20蛋白的氨基酸序列,应用生物信息学工具分析其蛋白序列,预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质。结果:Lpp20蛋白具有一段信号肽、脂蛋白信号肽酶切位点及脂盒模体,没有跨膜区,可能是一个外周膜蛋白;Lpp20蛋白的二级结构以α螺旋为主,其三级结构为一个致密的球状。结论:为基于幽门螺杆菌Lpp20蛋白的疫苗开发打下了基础。; 岳俊杰李北平周围高原王月兰梁龙; 关键词：幽门螺杆菌生物信息学

大肠杆菌O157:H7的sRNA伴侣蛋白Hfq的基因克隆、表达及纯化: 2011年; 目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的sRNA伴侣蛋白Hfq。方法:利用PCR方法从EHEC O157:H7基因组中扩增出基因hfq,并插入含6×His标签序列的原核表达载体pET28a(+)的多克隆位点中,构建重组表达质粒pET28a(+)-hfq,以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导目的基因表达,采用Western印迹法进行鉴定,通过Ni2+螯合柱纯化获得目的蛋白。结果:质粒酶切鉴定结果表明pET28a(+)-hfq重组质粒构建成功;对目的蛋白进行了融合表达,SDS-PAGE显示相对分子质量约17×103的蛋白特异表达条带;对表达产物进行亲和纯化,从上清中获得了Hfq的融合蛋白。结论:得到了sRNA伴侣蛋白Hfq,为进一步筛选与该蛋白有相互作用的sRNA,研究sRNA的功能奠定了基础。; 刘晓霞马延魏波周围廖翔高原刘虎岐岳俊杰梁龙; 关键词：SRNA 基因克隆

大肠杆菌O157∶H7新蛋白Ecs4563的基因克隆、表达及纯化被引量：1: 2008年; 目的:克隆、表达并纯化肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7新预测分子伴侣蛋白Ecs4563,以进一步开展其结构与功能的研究。方法:利用PCR方法从EHEC O157∶H7基因组中扩增出分子伴侣基因ecs4563,构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现诱导表达,采用Western印迹法进行鉴定,通过Ni2+螯合柱纯化获得目的蛋白。结果:构建了pET-24a-ecs4563重组质粒,实现了目的蛋白的融合表达,Ni2+金属螯合法纯化了目的蛋白,通过Western印迹法验证了融合蛋白的特异性。结论:得到了新预测分子伴侣Ecs4563,为下一步研究蛋白功能,进一步研究EHEC O157∶H7的致病机制奠定了基础。; 毛赟赟李玉霞高原凌焱胡伟张部昌周围梁龙; 关键词：克隆基因表达

大肠杆菌O157∶H7 EDL933wz3672基因缺失突变体的构建被引量：1: 2009年; 目的:构建EHEC O157∶H7 EDL933wz3672基因缺失突变体。方法:根据已知的O157∶H7 EDL933基因组全序列,采用pKOBEG介导的Red重组系统,筛选卡那霉素抗性基因替换z3672基因的阳性克隆,然后FLP位点特异性重组去除两端带有FRT位点的卡那霉素抗性基因,最后通过PCR和测序手段证实。结果:获得了z3672基因缺失而且不含有卡那霉素抗性基因的EHEC O157∶H7 EDL933w突变菌株。结论:为进一步研究O157∶H7的致病机制奠定了基础。; 马延高原周围张京生凌焱李玉霞梁龙; 关键词：基因敲除 RED重组系统

一种融合蛋白及其编码基因与应用: 本发明公开了一种融合蛋白及其编码基因与应用。本发明提供的融合蛋白为将乙醇脱氢酶和甲酸脱氢酶通过连接肽串联得到的蛋白质。所述乙醇脱氢酶来源于短乳杆菌（Lactobacillus brevis），所述甲酸脱氢酶来源于博伊丁假...; 李玉霞陈惠鹏曲芬凌焱李炳娟岳俊杰孙芳毛艳张景海吴逊白东梅李伟东刘刚梁龙周围李北平高原

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高原