马红丹
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 大豆锰超氧化物歧化酶基因在乳酸乳球菌中的分泌表达被引量：4
- 2015年
- 为使大豆锰超氧化物歧化酶(Mn superoxide dismutase,Mn SOD)在乳酸乳球菌中高效表达,将克隆的Mn SOD基因开放阅读框序列分别重组到质粒p NZ8149和经改造的质粒p NZS上,表达载体p NZ-SOD和分泌表达载体p NZS-SOD,将两者分别以电穿孔法转化乳酸乳球菌L.lactis NZ3900,经Elliker琼脂板筛选、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、酶切鉴定正确后,获得的两重组菌株加入Nisin进行诱导表达,对L.lactis NZ3900/p NZ-SOD和L.lactis NZ3900/p NZS-SOD的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和酶活性对比分析。结果显示:L.lactis NZ3900/p NZS-SOD菌株表达SOD总活性约是L.lactis NZ3900/p NZ-SOD菌株的1.6倍,是L.lactis NZ3900/p NZ8149的13.5倍,且可将表达的约2/3的SOD分泌到胞外,表明经改造的乳酸菌分泌表达系统L.lactis NZ3900/p NZS能够分泌表达SOD,并增强SOD的表达。
- 马红丹张丽媛赵邯郸徐丹丹曲静关淑艳王丕武
- 关键词：乳酸乳球菌
- 大豆MnSOD基因在乳酸菌中的高效表达研究
- 超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）是生物体清除超氧阴离子自由基，防御氧化损伤的重要酶类，具有广泛的抗炎、抗衰老、抗辐射和抗病毒作用，对生物体生命活动具有重要意义，在食品、医药及日化工业领域...
- 马红丹
- 关键词：锰超氧化物歧化酶乳酸乳球菌酶学特性
- 文献传递
- 番茄愈伤组织诱导的初步研究被引量：3
- 2012年
- 以4个番茄品种为试材,从中筛选出发芽率最高的品种为"法国粉玫瑰",并以此品种为材料,针对不同外植体种类、激素组合等因素对愈伤组织生成的影响进行了初步的研究。结果表明:子叶愈伤生成的最佳培养基为MS+2.0mg/L BA+1.0mg/L 2,4-D;茎段愈伤生成的最佳培养基为MS+2.0mg/L BA+0.5mg/L 2,4-D。
- 马义勇颜雪芬刘思言马红丹刘强关淑艳
- 关键词：番茄愈伤组织最佳培养基
- 利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性
- 2015年
- 目的:利用低温聚合酶链式反应对大豆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性进行改良。方法:将6种在较低退火温度下扩增出的超氧化物歧化酶基因插入到表达载体p REP5N上,构建p PM1、p PM2、p PM3、p PM4、p PM5、p PM6表达载体,转入大肠杆菌后得到工程菌,诱导其在大肠杆菌中进行蛋白表达,并进行酶活力测定,筛选高酶活力菌株。结果:将已克隆的目的基因序列与已知的大豆Mn SOD基因序列比对分析,一致性平均为86.57%,氨基酸序列同源性平均为82.58%。对已获得的6种工程菌进行蛋白质提取,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物的分子质量约为26 k D。经1%差异水平分析,改良后的SOD酶活力均有极显著提高,平均比对照菌株的酶活力提高1.95倍。结论:本实验证明低温聚合酶链式反应是改变酶活性的一种有效方法,为超氧化物歧化酶在生产中的应用提供了技术支持。
- 张丽媛马红丹赵邯郸徐丹丹曲静关淑艳王丕武
- 关键词：酶活力
- 转phyA基因玉米新种质的创制被引量：3
- 2014年
- 【目的】构建植酸酶基因(phyA)根部特异表达的重组植物表达载体,并利用其创制磷高效利用的玉米新种质.【方法】通过PCR方法从携带phyA的表达载体pCAMBIA3301中扩增出phyA表达元件ZmGLU1P-phyA-Nos,并将其插入到带有耐盐基因的中间载体pCAMBIA1301-BADH上,获得phyA根特异表达的植物表达载体:pCAMBIA1301-ZmGLU1P-phyA-Nos,通过农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织,并对再生植株进行分子生物学检测分析.【结果和结论】经PCR检测获得了9株T0代阳性植株;T1代植株的抗盐筛选、PCR检测、Southern杂交检测及RTPCR检测证明了phyA已经整合到玉米基因组中,获得6株T1代阳性植株;T2代植株的RT-PCR及根组织的酶活性测定结果表明,phyA在转基因植株根部大量表达,植酸酶活性平均比对照植株提高了10.9倍,活性最高的达到5.432 U/g.植酸酶基因在转基因植株根部大量特异表达,获得了转phyA的玉米新种质,为创制磷高效利用的玉米新种质、提高玉米的产量奠定了基础.
- 刘强张丽媛马红丹赵邯郸袁文娅刘思言关淑艳
- 关键词：玉米植酸酶基因表达载体构建新种质
- 玉米自交系H99与齐319幼胚愈伤组织诱导条件的优化被引量：4
- 2013年
- 以优良玉米自交系H99与齐319为研究材料,采用正交试验设计L9(34),探讨了2,4-D、CaCl2、AgNO3三个因素不同浓度组合对玉米幼胚愈伤组织形成的影响。结果表明:2,4-D、CaCl2、Ag-NO3对两个自交系胚愈伤组织诱导率均有影响,其中H99所需2,4-D、CaCl2、AgNO3最佳浓度组合为2mg/L、5mmol/L、8mg/L或2mg/L、5mmol/L、12mg/L;自交系齐319所需2,4-D、CaCl2、AgNO3的最佳浓度组合为2mg/L、4mmol/L、10mg/L或2mg/L、5mmol/L、10mg/L。本研究为基于这两个自交系的玉米遗传转化提供了优化的愈伤组织培养条件。
- 袁文娅关淑艳马红丹张丽媛刘强赵邯郸张君
- 关键词：玉米自交系愈伤组织正交试验
