韩婷婷
- 作品数：19 被引量：26H指数：4
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- Jun家族蛋白在釉质发育中的表达及对amelogenin的调控作用被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨Jun家族蛋白Jun B、c-Jun和Jun D在小鼠釉质发育中的作用。方法:应用免疫组化染色检测Jun B、c-Jun和Jun D在不同发育阶段小鼠牙胚成釉细胞中的表达;分别以0.5μg和2.0μg的Jun B、c-Jun和Jun D转染小鼠成釉细胞后,运用RT-PCR观察其对釉原蛋白amelogenin mRNA表达的影响。结果:免疫组化染色结果显示:釉质分泌期时,Jun B在成釉细胞核中无显著表达,Jun D呈弱表达,而c-Jun表达明显;釉质转型期时,Jun B和Jun D表达增强且Jun D早于Jun B,c-Jun持续表达明显;在釉质成熟期时,Jun B、c-Jun和Jun D均显著表达。RT-PCR检测显示:高剂量Jun B可明显抑制amelogenin的表达(P<0.05);低剂量c-Jun可明显促进amelogenin的表达(P<0.05);Jun D对amelogenin的表达无显著影响。结论:在釉质发育早期,c-Jun可通过上调釉原蛋白的表达参与釉质发育。在釉质发育后期,Jun B可通过抑制釉原蛋白的分泌促进釉质的成熟。Jun D对amelogenin表达无显著影响。
- 徐畅魏亚红王玉敏张莉韩晓谦韩婷婷高玉光
- 关键词：釉原蛋白
- 整合素β1调控成釉细胞外基质蛋白表达的研究
- 2013年
- 目的:观察整合素β1(Integrinβ1)在小鼠牙胚成釉细胞中的表达及其对成釉细胞细胞外基质蛋白——釉原蛋白(Amelogenin,AMELX)、成釉蛋白(Ameloblastin,AMBN)、釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)mRNA表达的影响。方法:采用免疫组化方法检测整合素β1在小鼠牙胚成釉细胞中的表达。构建真核重组表达载体pcDNA3.1/myc-hisA-Integrinβ1,并将其转染至小鼠成釉细胞,利用实时定量Real-time PCR法检测AMELX、AMBN、AMTN mRNA表达水平。结果:整合素β1在小鼠牙胚发育各期成釉细胞中均有表达。RT-PCR检测显示,与转染空白质粒的对照组相比,转染pcDNA3.1/myc-hisA-Integrinβ1的成釉细胞中AMELXmRNA的表达水平明显上调(P<0.05),但对AMBN和AMTN mRNA表达无显著促进作用(P>0.05)。结论:整合素β1在小鼠牙胚成釉细胞中表达,并促进Amelogenin在成釉细胞中的表达,提示整合素β1通过调节釉原蛋白而影响牙齿的发育和矿化。
- 张海英邵丹李伯翰韩婷婷李东亮王玉敏孙岩张娟娟高玉光
- 关键词：整合素Β1成釉细胞
- 釉成熟蛋白和釉原蛋白基因在小鼠牙胚发育过程中的时空表达研究被引量：6
- 2009年
- 目的：观察、比较小鼠釉成熟蛋白（amelotin）和釉原蛋白（amelogenin）基因在牙齿发育过程中的表达。方法：利用Digoxigenin标记的cRNA探针，采用原位杂交技术对amelotin和amelogenin基因表达进行组织学定位；然后从小鼠下颌中提取总RNA，采用RT—PCR技术观察小鼠amelotin和amelogenin基因在小鼠下颌组织中的表达。结果：在出生后1d的小鼠下颌第一磨牙，随着前期牙本质形成，amelogenin在成釉细胞层开始表达，并逐渐增强，但未检测到amelotin基因表达；在出生后5d的小鼠，成釉细胞处于分泌期，amelotin和amelogenin基因在成釉细胞中显著表达；在出生后10d小鼠下颌第一磨牙，amelotin和amelogenin基因在牙尖周围成熟期成釉细胞中的表达信号明显降低。利用RT—PCR技术，在新生小鼠下颌中未检测到amelotin基因表达，但amelogenin已开始表达；从出生1—7d小鼠下颌中均检测到amelotin和amelogenin基因表达；在出生后7d小鼠，amelogenin表达显著下降。结论：amelotin和amelogenin均参与了釉质发育过程；amelotin基因表达迟于amelogenin基因，提示两种釉质基质蛋白在釉质发育过程中可能发挥不同生物学作用。
- 魏亚红孙岩张娟娟李东亮韩婷婷高玉光
- 关键词：釉原蛋白成釉细胞原位杂交
- 参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κB p65表达影响被引量：5
- 2008年
- 目的建立复发性口疮(RAU)大鼠动物模型,探讨参芪扶正注射液对RAU大鼠TNF-α、NF-κBp65表达影响。方法大鼠脊柱两侧注射大鼠口腔黏膜抗原乳化液,建模后将溃疡大鼠随机分为3组:正常组(GroupN)不建模;对照组(GroupC)建模正常饮食水;参芪扶正注射液组(GroupS)大鼠按8ml.Kg-1.d-1剂量灌胃20天。检测给药后大鼠RAU炎性细胞因子TNF-α、NF-κB p65表达水平。结果实验大鼠于最后一次抗原注射6d后开始出现口腔溃疡。口腔溃疡炎症细胞因子TNF-a表达水平均明显低,炎性细胞胞核内NF-kB P65低表达。结论参芪扶正注射液对RAU大鼠有治疗作用,其机制可能与抑制炎性细胞NF-kB P65的活化及减少炎性细胞因子的分泌有关。
- 张彦表韩成冰胥欣韩婷婷曹雪梅
- 关键词：参芪扶正注射液复发性口疮NF-ΚBP65
- 釉成熟蛋白Amelotin抗体的制备和初步鉴定被引量：7
- 2009年
- 目的:表达并纯化小鼠釉成熟蛋白(Amelotin),制备多克隆抗体,并进行初步鉴定。方法:RT-PCR获得Amelo-tin成熟肽片段,构建pET32a-Amelotin,IPTG诱导表达Amelo-tin,纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA检测抗体滴度。Western blot和免疫组织化学鉴定抗体特异性。结果:成功构建了Amelotin重组表达载体pET32a-Amelotin,表达的重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,得到的多克隆抗体ELISA显示抗体效价可以达到1∶12800。Western blot分析表明该抗体能特异结合Amelotin,免疫组化分析表明自制的抗体能特异的与Amelotin相互作用。结论:以纯化的Amelo-tin为免疫原,成功地制备了效价及特异性较高的兔抗Amelo-tin抗体,为进一步建立简便的Amelotin检测方法及研究Amelotin生物学功能奠定了良好的基础。
- 孙岩张娟娟韩婷婷李东亮曹雪梅李武修高玉光
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 人牙成釉细胞相关蛋白启动子的克隆和转录活性分析被引量：1
- 2010年
- 目的:构建人牙成釉细胞相关蛋白(odontogenic ameloblast-asssociated protein,ODAM)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞、Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础。方法:以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力。结果:成功地获得了不同长度的ODAM基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-333～-195与-195～-96区域为特异的转录调控作用区。结论:初步确定了ODAM基因启动子的转录活性区,为进一步研究该基因转录调控特点奠定基础。
- 韩婷婷刘晓影郝建忠高玉光
- 关键词：启动子成釉细胞
- 人牙釉质蛋白Amelotin,Ameloblastin及Enamelin基因启动子的初步研究被引量：1
- 2009年
- 目的分析人釉成熟蛋白(Amelotin,AMTN)、成釉蛋白(Ameloblastin,AMBN)与釉蛋白(Enamelin,ENAM)基因上游启动子序列,构建不同长度的基因上游启动子报告基因载体,为进一步判断启动子序列的转录调控区奠定基础。方法利用软件分析基因启动子序列,以PCR方法获取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中。结果成功地获得了不同长度的Amelotin,Ameloblastin及Enamelin基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功。结论成功构建了不同长度启动子的pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,为进一步研究牙釉质蛋白基因启动子的转录活性及转录调控特点奠定基础。
- 刘晓影高志芹韩婷婷官秀梅高玉光
- 关键词：AMELOBLASTINENAMELIN
- TGF-β1/Smad3信号通路调控小鼠成釉细胞Amelotin启动子转录活性的研究被引量：3
- 2014年
- 目的:研究TGF-β1/Smad3信号通路对调控小鼠成釉细胞Amelotin启动子转录活性的影响。方法:首先利用双荧光素酶报告基因检测系统分析TGF-β1和Smad3对小鼠Amelotin启动子转录活性的影响;然后利用染色体免疫共沉淀(ChIP)方法观察Smad3与Amelotin启动子特异性结合位点之间的相互作用;最后利用基因定点突变构建Smad3结合位点突变型Amelotin启动子,并用双荧光素酶报告基因检测系统分析TGF-β1和Smad3对野生型和突变型Amelotin启动子转录活性的影响。结果:TGF-β1和Smad3作用于成釉细胞后,Amelotin启动子转录活性明显增强(P<0.05);Smad3与Amelotin基因启动子的"AGAC"及"GTCT"序列有相互作用;将Amelotin启动子上Smad3结合位点特征性序列突变为"TGTC"和"GACA"后,TGF-β1和Smad3对突变型Amelotin基因启动子转录活性的影响较野生型明显减弱(P<0.05)。结论:TGF-β1/Smad3信号通路通过作用于Smad3结合位点调控成釉细胞Amelotin基因启动子的转录活性。
- 李盼王玉敏张莉李伯翰韩婷婷王爱芹高玉光
- 关键词：TGF-Β1SMAD3成釉细胞
- TGF-β1调控基质金属蛋白酶-20(MMP-20)启动子转录活性的研究被引量：6
- 2009年
- 目的:克隆MMP-20基因启动子序列,分析转化生长因子-β1对其转录活性的影响。方法:检索并分析MMP-20基因翻译起始点上游序列。利用PCR从小鼠基因组上扩增长度为2852bp的启动子序列,并与pMD18-T克隆载体连接。经酶切反应初步鉴定后,以pMD18-T-MMP-20为模板,利用PCR方法获得带酶切位点的MMP-20启动子片段(2842bp),并与pGL3-Basic载体连接。pGL3-MMP-20瞬时转染小鼠成釉细胞系(ALC)过夜后,在培养基中加入1ng/mLTGF-β1,12h后检测荧光素酶的活性。结果:经酶切反应和测序结果证实MMP-20启动子成功插入pGL3-Basic质粒。与pGL3-Basic质粒转染相比较,转染pGL3-MMP-20后荧光素酶活性明显增强;培养基中加入TGF-β1能促使pGL3-MMP-20荧光素酶活性进一步增强。结论:外源性MMP-20启动子在成釉细胞中被激活;TGF-β1能增强pGL3-MMP-20荧光素酶活性,提示釉质发育过程中,TGF-β1具有调节MMP-20基因表达的生物学功能。
- 韩婷婷孙岩张娟娟刘晓影官秀梅高玉光
- 关键词：转化生长因子-Β1启动子
- 人釉成熟蛋白Amelotin基因的启动子活性区域分析
- 2009年
- 目的构建人牙釉质蛋白(Amelotin,AMTN)基因不同长度的上游启动子荧光素酶报告基因载体,比较不同的启动子片段在成釉细胞及Hela细胞中的活性,为进一步判定上游启动子的转录调控区奠定基础。方法以PCR方法荻取基因上游启动子片段,将其构建至报告基因载体pGL3-Basic中,瞬时转染成釉细胞及Hela细胞,通过检测荧光素酶活性来分析启动子区域的转录调控能力。结果成功地获得了不同长度的Amelotin基因启动子目的片段,酶切鉴定表明不同长度启动子荧光素酶报告基因载体构建成功,不同长度的启动子在不同的细胞中活性不同,-190～-358与-35～-93区域为特异的转录调控作用区。结论成功构建了不同长度的Amelotin基因启动子的pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体,初步确定Amelotin基因启动子的转录活性区,为进一步研究Amelotin基因转录调控特点奠定基础。
- 何永云韩婷婷高玉光
- 关键词：成釉细胞
