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增殖细胞核抗原在水牛腔前卵泡中的表达与卵巢组织定位: 2013年; 【目的】探讨在水牛中增殖细胞核抗原(PCNA)参与卵泡发生的时期及其在卵巢组织不同时期卵泡中的表达定位;【方法】采用石蜡切片结合免疫组化的方法对PCNA在卵巢组织中进行定位,利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术检测PCNA在腔前卵泡中的表达情况。【结果】免疫组化结果显示:原始卵泡中的卵母细胞能检测到PCNA的表达,但颗粒细胞并未观察到PCNA的免疫染色;初级卵泡到次级卵泡,卵母细胞和颗粒细胞中均可检测到PCNA的表达,且在颗粒细胞中的表达有增强的趋势;有腔卵泡中,颗粒细胞、卵泡膜细胞及包围卵母细胞的卵丘细胞中都能观察到很强的免疫染色。定量表达检测结果显示:PCNA在原始卵泡、初级卵泡及次级卵泡中的表达呈上升趋势,并且有显著差异(43.50333±0.138338 vs 1.633804±0.093796 vs 1±0.012219,P<0.01);【结论】从初级卵泡开始在颗粒细胞中能检测到PCNA的表达,并且其表达随着卵泡的发育有明显的增强趋势,腔前卵泡中PCNA表达的QRT-PCR测定结果与免疫组化结果相一致,研究结果为阐明PCNA参与卵泡发生的分子调控机制奠定了基础。; 马帆周宇高亚可朱鹏雷小灿刘庆友石德顺; 关键词：水牛 PCNA

水牛缝隙连接蛋白43基因克隆及表达被引量：2: 2013年; 本研究克隆了水牛缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)基因序列,并运用生物信息学方法对其核苷酸序列的保守性和氨基酸的理化性质、蛋白质结构进行了系统分析,对Cx43基因在水牛不同组织和不同发育阶段卵泡中的表达差异进行了检测。结果表明,应用RT-PCR技术克隆获得了水牛Cx43基因序列,其中编码区全长1152 bp,编码383个氨基酸,蛋白质理论分子质量43.13 ku,等电点为8.88。多重序列比对结果显示,水牛Cx43核苷酸序列与牛、羊、猪、马和人相应序列的同源性分别为99%、98%、94%、93%和92%,系统进化树分析结果推测,Cx43基因在不同物种进化过程中具有高度保守性;对水牛Cx43蛋白的二级和三级结构分析发现,其具有缝隙连接蛋白的特有结构。定量RT-PCR结果显示,Cx43在水牛卵巢组织中相对表达量最高,睾丸、肾脏、心脏和皮肤次之,肝脏和大脑表达量较低。免疫组化结果发现,Cx43蛋白表达随卵泡发育时期的不同而变化,Cx43蛋白随卵泡发育表达逐渐增强。; 林浪龚云王梦屈春凤黄时海雷小灿石德顺李湘萍; 关键词：水牛克隆

水牛卵巢腔前卵泡数量统计与超微结构观察被引量：1: 2013年; 本实验通过石蜡切片染色观察统计比较水牛与黄牛卵巢各级腔前卵泡数量,并对水牛卵泡的超微结构进行了观察。结果表明:水牛卵巢中原始卵泡为37 578.81个,极显著高于初级卵泡的11 537.94个和次级卵泡的1753.40个(P<0.01);水牛卵巢腔前卵泡的总平均数为50 870.14个,极显著低于黄牛卵巢的113 483.32(P<0.01);超微结构观察发现水牛腔前卵泡卵母细胞和颗粒细胞间形成桥粒和间隙连接,细胞核位于胞质中心,细胞质中分布有大量的圆形脂质滴,存在粗面内质网以及少量游离的核糖体和皮质颗粒。实验从组织学水平上初步探明水牛比黄牛繁殖力低的原因,并为水牛腔前卵泡的分离培养提供了理论参考。; 谭敏捷蒋建荣陆凤花雷小灿刘庆友石德顺崔奎青; 关键词：超微结构水牛

EB诱导雄性不育的氧化应激机制研究: 目的探讨外源性雌激素苯甲酸雌二醇（estradiol benzoate,EB）诱导雄性小鼠不育的氧化应激机制。方法 60只昆明小鼠随机分为三组,对照组肌肉注射150山玉米油,实验组含5mg/kg、10 mg/kg体重EB...; 张瑞雷小灿陈伟; 文献传递

水牛MSTN基因克隆分析及在不同组织中的基因功能分析: 杨素芳李海洋朱鹏苏节雷小灿邓彦飞韦英明蒋建荣李湘萍石德顺

耐力训练时脂肪甘油三酯脂肪酶与工作肌糖代谢和线粒体密度——基于ATGL基因敲除小鼠的研究被引量：1: 2017年; 目的:(1)观察ATGL基因敲除小鼠耐力训练时胰岛素抵抗、工作肌糖转运蛋白及线粒体密度的变化;(2)测定Akt、PKC、PPAR-α蛋白激活及含量,探究其与胰岛素抵抗、工作肌糖转运蛋白及线粒体密度的变化之间的关系。方法:ATGL-/-、ATGL+/-和C57BL/6J小鼠跑台耐力训练训练7天,测定小鼠体重、肌糖原、血糖、血胰岛素和胰岛素抵抗,蛋白印记法测定腓肠肌和比目鱼肌GLUT-4(内外膜)、p-Akt、Akt、p-PKC、PKC含量和PPAR-α水平。结果:(1)运动训练后,腓肠肌和比目鱼肌糖原含量、HOMA-IR指数存在基因类型、运动训练的差异(P<0.05)。运动训练引起血糖和血胰岛素在基因类型的差异(P<0.05)。(2)运动训练后,腓肠肌和比目鱼肌Akt、PKC、磷酸化水平、腓肠肌总Akt、PPAR-α蛋白表达存在基因类型、运动训练的差异(P<0.05)。比目鱼肌总Akt表达、腓肠肌和比目鱼肌总PKC、PPAR-α蛋白运动训练的差异不具有显著性意义(P>0.05)。结论:耐力训练时,ATGL通过上调Akt和PKC促进胰岛素敏感性和改善胰岛素抵抗;ATGL上调PPAR-α起到促进线粒体含量。; 宋刚张国栋宋刚张国栋李莉雷小灿; 关键词：运动生物化学跑台训练胰岛素抵抗

耐力训练Cidec在小鼠不同组织中基因表达变化: 研究目的:诱导细胞死亡的DFF45样效应因子C(Cidec)是一种新发现与脂肪代谢相关的细胞因子,可调节脂肪代谢,与动脉粥样硬化有密切联系,目前运动与Cidec变化的研究较少,尤其是运动时其在组织中的变化鲜见报道。本研究...; 宋刚雷小灿罗明盟黄日升彭莉罗炯; 关键词：小鼠; 文献传递

耐力训练C57BL/6J小鼠工作肌ATGL的变化及信号分子cAMP和PPAR-γ的影响被引量：3: 2017年; 目的:1)了解耐力训练不同时间点C57BL/6J小鼠ATGL基因和蛋白表达的变化;2)腹腔注射c AMP的激活剂Forskolin、PPAR-γ的抑制剂T0070907、观察耐力训练后ATGL的表达,探究ATGL变化可能的信号分子机制。方法:实验1,C57BL/6J小鼠跑台耐力训练训练4周,使用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法测定腓肠肌和比目鱼肌ATGL基因和蛋白表达的变化;实验2,采用跑台耐力训练小鼠4周,分别每天腹腔注射forskolin、T0070907和DMSO,测定腓肠肌和比目鱼肌ATGL基因和蛋白表达的变化。结果:1)耐力运动引起比目鱼肌ATGL基因和蛋白表达量出现上升(P<0.05),并且在第4周运动组的ATGL基因表达量显著高于对照组(P<0.05);第3、第4周ATGL蛋白表达都显著高于对照组(P<0.05);2)耐力运动时腓肠肌ATGL基因和蛋白表达出现上升(P<0.05),耐力训练第3周和4周ATGL基因和蛋白表达量运动组显著高于对照组(P<0.05);3)4周的耐力运动训练后,forskolin组的ATGL基因和蛋白表达无论是比目鱼肌还是腓肠肌都出现显著高于对照组(P<0.05),T0070907组的腓肠肌中ATGL基因和蛋白表达显著低于对照组(P<0.05);4)在4周的耐力运动训练后,forskolin组的ATGL基因表达腓肠肌显著高于比目鱼肌(P<0.05)。结论:耐力训练会引起C57BL/6J小鼠比目鱼肌和腓肠肌中的ATGL基因和蛋白表达上升,信号分子c AMP和PPAR-γ参与了这一过程。; 宋刚雷小灿李莉彭莉; 关键词：小鼠信号分子

水牛转录抑制因子CTCF基因克隆分析及不同组织中的表达研究被引量：2: 2013年; 本研究克隆了水牛转录抑制因子CTCF基因序列,并运用生物信息学方法对其核苷酸序列的保守性和氨基酸的理化性质、蛋白质结构进行了系统分析,此外还对CTCF基因在水牛不同组织中的表达差异进行了检测。结果表明,应用RT-PCR技术克隆获得了长2239bp水牛CTCF基因序列,其中编码区全长2184bp,编码727个氨基酸,理论蛋白质分子质量82.7ku,等电点为6.57。多重序列比较分析显示,水牛CTCF核苷酸序列与牛、猪、马、人和小鼠相应序列的相似性分别为99%、96%、96%、94%和92%,结合系统进化树分析结果推测,CTCF基因在不同物种及进化的过程中具有高度的保守性。对水牛CTCF蛋白的二级和三级结构分析结果发现,其存在连续11个锌指C2H2结构,预测其为重要的DNA结合蛋白。定量表达分析结果显示,CTCF在水牛肝脏组织中相对表达量最高,大脑、肌肉和肾脏次之,卵巢和皮肤表达量较低。; 苏节朱鹏刘庆友雷小灿石德顺崔奎青; 关键词：水牛克隆

耐力运动小鼠凯莫瑞在比目鱼肌、腓肠肌、心肌、肝脏和肾脏基因表达变化: <正>1研究目的凯莫瑞(chemerin)是一种新发现与脂肪代谢相关的细胞因子,目前运动与凯莫瑞变化的研究较少,尤其是运动时其在组织中的变化鲜见报道。本研究以6周龄雄性健康SPF级C57BL/6小鼠(购自北京华阜康生物科...; 宋刚罗明盟雷小灿黄日升曾恒李志清; 关键词：比目鱼肌腓肠肌心肌肝脏肾脏; 文献传递

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