陈系古
- 作品数：117 被引量：543H指数：13
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 小鼠胚胎干细胞的培养被引量：21
- 1999年
- ＥＳ细胞的培养应满足促进细胞增殖和抑制细胞分化而保持其高度未分化潜能。我们用胚胎成纤维细胞作为饲养层，培养基ＤＭＥＭ中加白血病抑制因子的方法来培养ＥＳ细胞。培养的ＥＳ细胞呈集落状生长，细胞排列紧密，呈未分化状态。胚胎成纤维细胞作为饲养层是分离培养ＥＳ细胞最普遍使用而且有效的方法。本文还围绕ＥＳ细胞培养中的促进增殖和抑制分化这两个方面的影响因素进行了讨论。
- 都同功陈系古刘兰英俞生钟女奇黄冰林学颜
- 关键词：ES细胞干细胞小鼠胚胎饲养层集落分化潜能DMEM
- 玻璃体腔注射对裸小鼠视网膜组织形态学的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察单纯的玻璃体腔注射对裸小鼠视网膜组织形态学的影响,为建立简单的制作视神经损伤动物模型奠定实验基础。方法在全身麻醉配合眼部局部麻醉情况下,利用微量注射器往裸小鼠玻璃体腔内迅速注入10μL生理盐水,然后在不同的时间点取注射眼进行固定、切片和HE染色,观察视网膜特别是视神经节细胞的变化。结果正常对照组视网膜层次清晰,各层排列整齐而致密,视网膜神经节细胞呈单层排列,大小不一,染色质分布均匀。实验组于注射后第1天、第3天和第5天视网膜神经节细胞减少的情况不明显,十层结构仍相对清晰。但于第7天,视网膜神经节细胞出现细胞明显缺失的现象,第14天为最严重,第30天和第60天与第14天相比无明显差别。结论玻璃体腔注射过量的生理盐水能够损伤视网膜组织,造成神经节细胞减少,有可能成为一种简单的制作视神经损伤动物模型的方法。
- 刘茜黎韦华黄冰李永平林少春黄健发徐晓平孙雪荣陈梦飞陈系古廖秀珍
- 关键词：视神经损伤裸小鼠玻璃体腔注射
- 丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达致人肝细胞恶性转化的研究被引量：4
- 2004年
- 丙型肝炎病毒核心 (HCV C)蛋白是维持丙型肝炎病毒结构的重要蛋白质 ,由于参与调节细胞的生长与凋亡 ,被认为与HCV感染所致的肝硬化及肝细胞癌的发生有关 .为了进一步探索HCV C蛋白与肝细胞癌发生的关系 ,首先构建了表达HCV C蛋白的真核表达载体 ,脂质体介导转染Chang liver人肝细胞株 ,建立表达HCV C蛋白的人肝细胞模型 ,RT PCR方法检测HCV C基因在人肝细胞内的表达 ,蛋白质印迹和免疫细胞化学方法鉴定Chang liver肝细胞内HCV C蛋白及其在细胞内的分布情况 .表达HCV C蛋白的Chang liver人肝细胞培养 2 0代以后 ,与对照组细胞相比 ,细胞的形态出现长梭形样改变 ,生长速度显著加快 ,细胞内DNA含量的均一性变差 .接种表达HCV C蛋白的Chang liver人肝细胞的 6只裸鼠在第 2 0天时全部有肿瘤长出 ,且肿瘤组织结构符合肝细胞癌病理形态特点 ,对照组裸鼠未见肿瘤生长 .上述结果表明HCV C基因表达可导致Chang liver人肝细胞发生恶性转化 ,提示HCV C蛋白与HCV感染所致肝细胞癌的发生有直接关系 .
- 单于陈系古黄冰胡安斌郭中敏黄文革
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白基因表达肝细胞恶性转化
- 小鼠胚胎干细胞植入大鼠脑内分化的研究被引量：8
- 2002年
- 观察小鼠胚胎干细胞植入大鼠隔区和海马内之后的分化状况。以 SD大鼠为宿主 ,将胚胎干细胞移植入宿主隔区和海马内 ,移植后在 l、2、3、4和 8周取脑 ,冰冻切片 ,进行 Nissl染色和 M6、NSE、GFAP免疫组织化学反应。胚胎干细胞移植入大鼠隔区和海马之后 ,从第 2周开始表达 M6、GFAP、NSE等抗原 ,持续至第 4周 ,主要位于移植区内 ,较少迁移。小鼠胚胎干细胞移植入大鼠隔区和海马内之后 。
- 刘述谢瑶陈系古姚志彬
- 关键词：小鼠胚胎干细胞植入脑移植
- 标准化实验动物饲养系统中细菌学检查规范的建立
- 1994年
- 标准化实验动物饲养系统中细菌学检查规范的建立黄冰，陈系古中山医科大学实验动物中心本文在参照国内有关资料的基础上对本校实验动物中心清洁动物和ＳＰＦ饲养系统进行细菌学检查，实验结果与中国医学科学院实验动物研究所对本文中心动物检查结果相同。本实验说明要生产...
- 黄冰陈系古
- 关键词：实验动物细菌学检查
- 原癌基因c-kit在免疫性生精障碍模型中的表达研究
- 2007年
- 目的:探讨原癌基因c-kit在免疫性生精障碍模型中的表达及意义。方法:建立免疫性生精障碍模型,在建模过程中对模型进行分析:在第1次给予抗原注射后1,2,3,4,6,8周各取1组小鼠的睾丸组织,用RT-PCR检测其c-kit mRNA的变化,用免疫组化法检测其蛋白的变化。结果:在第1次给予抗原注射后第1周开始c-kit mRNA转录水平开始降低,第2周起明显低于对照组(P<0.05),至第3,4周降至最低,第6周逐渐开始恢复,至第8周其水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果提示随着建模时间的推移,管腔内c-kit阳性细胞的数目有减少的趋势。结论:c-kit基因与生精功能密切相关,c-kit基因的低表达可能参与免疫性生精障碍导致不育的发病机制。
- 谷保霞杨冬梓王文军陈系古莫亚琴
- 关键词：RT-PCR免疫组化
- 严密型四环素调控系统转基因首建鼠的建立
- 2008年
- 目的制备ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠1,为严密型四环素调控系统的体内研究提供调控部分的转基因小鼠,以便与反应部分小鼠交配得到双转基因小鼠。方法重组构建含目的基因的质粒pApoE-rtTA-tTS,应用显微注射法将其注入母鼠的受精卵,再植入代母输卵管,出生小鼠经PCR初步筛选出阳性,再经Southern杂交对阳性小鼠基因组DNA标本进一步鉴定。结果产生了2只整合ApoE-rtTA-tTS基因的首建鼠。结论成功制备了ApoE-rtTA-tTS转基因小鼠,为下一步建立严密型四环素调控系统的双转基因小鼠模型奠定了基础。
- 帅丽芳张若霜邓新燕赵勇孙金海唐博恒陈系古
- 关键词：显微注射
- 人类疾病转基因小鼠模型的研制及开发
- 陈系古潘兴华刘光泽韩俊英贾彦征张海宏王洪敏
- 该课题中课题承担单位掌握了雄原核注射和基因敲除转基因小鼠制作的各项技术，获得多种转基因小鼠，在广州建立起一个转基因小鼠模型制作基地，为人类疾病研究和医药产品的开发提供实验模型和技术平台，并且已为社会提供转基因动物制作服务...
- 关键词：
- 敲除β珠蛋白β^(maj)及β^(min)基因的C129小鼠ES-D3细胞系建立被引量：1
- 2005年
- 目的通过构建C129系小鼠β珠蛋白基因内源性珠蛋白βmaj及βmin基因打靶载体,建立C129小鼠敲除β珠蛋白基因内源性珠蛋白βmaj及βmin基因ES-D3细胞系,为制作基因敲除嵌合体小鼠提供稳定的胚胎干细胞系。方法根据C129系小鼠β珠蛋白基因分子结构基础,用基因克隆方法在βmaj和及βmin两个同源序列两侧分别将1.7kb和7.0kb的片段插入pNTK质粒中,构建置换型打靶载体β-pNTK,用新霉素抗性基因(Neo)和单疱病毒腺苷激酶(TK)抗性基因作为正负筛选标记。用SalⅠ酶切将打靶载体β-pNTK线性化,采用电穿孔法在ES-D3细胞水平进行打靶,通过G418和GAN进行正负筛选,获得生长良好的胚胎干细胞克隆;用PCR和Southern印迹杂交方法鉴定阳性克隆基因组DNA整合结果,用碱性磷酸酶实验、体外胚体形成实验以及畸胎瘤成瘤实验鉴定细胞生物学特性。结果构建了C129系小鼠置换型打靶载体,经Neo-Major鉴定引物PCR扩增、BamHⅠ及EcoRⅠ酶切及部分测序分析,所插入方向正确,结构合理,达到所预期的目的;获得了8个阳性克隆珠,阳性克隆细胞株经PCR和South-ern印迹杂交方法鉴定外源基因整合到ES细胞基因组DNA中;经胚胎干细胞特性鉴定所获细胞具有良好的未分化特性和多能性。结论构建了C129系小鼠β珠蛋白基因内源性珠蛋白βmaj及βmin基因置换型打靶载体;该载体在胚胎干细胞水平进行基因打靶后,获得了稳定的敲除β珠蛋白内源性珠蛋白βmaj及βmin基因的胚胎干细胞系,为制作基因敲除嵌合体小鼠奠定了基础。
- 韦相才马芸邓新燕卢丽黄冰陈系古
- 关键词：基因敲除珠蛋白
- 实验动物大、小鼠管状线虫防治研究
- 1996年
- 大、小鼠管状线虫是我国标准化实验动物清洁级大、小鼠应排除的寄生虫，而实际工作中发现：清洁级大、小鼠经常单纯性感染管状线虫。这严重地影响了清洁级大、小鼠的质量。史克肠虫清（阿苯达唑）是一种广谱驱虫药；在药量达１００ｍｇ／只大鼠（１０只小鼠），溶于２５０ｍｌ饮水中让其自由饮水３ｄ，每隔２周一次，连续３次时，既可达到驱虫作用，也不影响种鼠的繁殖功能，在引种困难的情况下可作为种群净化的一种手段。
- 黄冰邱国光黎福荣黄文革陈颖青陈系古
- 关键词：小鼠实验动物单纯性肠虫清线虫
